紫外分光光度法测定富硒农产品中硒的含量

刁全平，郭俊生，吕 淼，秦樱奇，侯冬岩

(鞍山师范学院 化学与生命科学学院,辽宁 鞍山 114007)

硒元素是促进植物生长的有益元素，也是人和动物必需的微量元素之一，具有抗氧化、抗辐射、防癌抗癌、调节免疫力、拮抗重金属(如镉、砷、铅、汞等)毒性等作用[1-3]，主要通过食物进行补充.硒具有生物二重性，如果摄入过量，会导致慢性或急性硒中毒，出现脱发、脱甲、偏瘫等症状[4-5]，因此食品中硒含量的测定非常重要[6-7].目前，测定食品中硒的方法主要有高效液相色谱法[8]、原子光谱法[9]、氢化物原子荧光光谱法[10]、荧光分析法[11]、紫外分光光度法[12-15]、原子吸收分光光度法[16]和电化学分析法[17]等.本文以富硒农产品为研究对象,以邻苯二胺为显色剂，采用紫外分光光度法测定硒含量,建立一种操作简便、选择性好、灵敏度高的硒测定方法.

1 材料和方法

1.1 样品来源

富硒香菇,富硒木耳,富硒黄豆,富硒花生,富硒马铃薯,富硒大蒜(均产自湖北恩施)；富硒大米(产自黑龙江五常).

1.2 材料和试剂

硒粉(高纯，北京化工厂)；邻苯二胺、EDTA、高氯酸、氨水、甲苯、浓硝酸、浓盐酸均为分析纯;超纯水自制.

1.3 仪器与设备

Cary 50紫外可见分光光度计(美国瓦里安公司)；FAI 2048电子天平(上海精密科学仪器有限公司)；PB-10酸度计(赛多利斯科学仪器有限公司).

玻璃容器均在10%HNO3中浸泡48 h以上，使用前超纯水冲洗3次.

1.4 试验方法

1.4.1 样品预处理

富硒香菇(干)、富硒木耳(干)：粉碎后过孔径0.425 mm筛，密封保存备用.

富硒黄豆、富硒大米：用超纯水洗净，在 60 ℃烘箱中烘干表面水分，冷却至室温，粉碎后过孔径为0.425 mm筛，密封保存备用.

富硒花生：样品去壳，在60 ℃烘箱中烘干水分，去皮，在60 ℃烘箱中烘干，冷却至室温，粉碎后过孔径为0.425 mm筛，密封保存备用.

富硒马铃薯：样品用刀去皮并切成片状，在60 ℃烘箱中烘干，冷却至室温，粉碎后过孔径为0.425 mm筛，密封保存备用.

富硒大蒜：样品去皮，在60 ℃烘箱中烘干，冷却至室温，粉碎后过孔径为0.425 mm筛，密封保存备用.

1.4.2 样品的消解 精确称取样品1 g左右(精确至0.000 1 g)于100 mL凯氏烧瓶中，加入10 mL硝酸，待试样完全浸润后，再加入4 mL高氯酸,缓慢加热，消化至溶液呈无色或微黄色，样品溶液约黄豆粒大小后冷却待用.

1.4.3 样品的测定 将消解液置于具塞锥形瓶中，加入1.00 mL 5%EDTA 溶液，用1 mol/L的HCl和1 mol /L氨水调至pH=2.00.再加入5.0 mL 0.2%邻苯二胺，混匀后在50 ℃水浴加热30 min，加入10 mL甲苯萃取3次待测.

2 结果与讨论

2.1 标准溶液配制

精确称取0.010 0 g硒粉于100 mL烧杯中，用少许水润湿后，加10 mL浓HNO3和1 mL浓HCl，蒸发至近干.冷却后用少量超纯水溶解后定容到100 mL，得质量分数为100 μg·g-1的 Se(IV)储备液.

2.2 检测波长的确定

取2 μg·g-1硒标准溶液5.0 mL于具塞锥形瓶中,按照1.4.3步骤处理，萃取液用紫外分光光度计进行波长扫描，确定检测波长为335 nm.

2.3 工作曲线的绘制

配置一系列不同质量分数的硒标准溶液，按照1.4.3步骤依次进行显色，测其吸光度，绘制标准曲线，如图1所示.回归方程为A=0.143 1C+0.004 7，r=0.996 1，线性范围为2.0～12.0 μg·g-1.

图1 硒元素标准曲线

2.4 精密度实验

取9份相同质量分数的硒标准溶液10 mL，按照1.4.3步骤进行显色，于335 nm处测定吸光度，计算仪器精密度，得相对标准偏差RSD=1.67%，表明仪器精密度良好，详见表1.

表1 精密度实验

2.5 稳定性实验

取一份样品溶液，按照1.4.3步骤依次进行显色，于335 nm处每隔10 min测定一次吸光度，结果表明该体系在1 h 内稳定性较好.

2.6 加标回收率

准确称取1 g(精确至0.000 1 g)富硒大米3份，加入梯度量的硒溶液，按照1.4.3步骤进行处理并测定，实验结果表明加标回收率在96.40%～97.20%之间，详见表2.

表2 加标回收率试验

2.7 样品测定结果

对样品进行测定，结果如表3所示.

表3 样品中硒的含量

3 结论

本文采用消解法处理样品，利用紫外分光光度计对富硒农产品中硒的含量进行测定，与其他分析方法相比较，具有结果可靠、成本低廉、应用性强等优点.不足之处是样品消解前处理时间较长、操作过程不便.