红冬蛇菰的化学成分研究*

陈孝礼，江文婧，吴继春，杜 江,2

(1 贵州中医药大学，贵州 贵阳 550025；2 贵州省苗医药重点实验室， 贵州 贵阳 550025)

红冬蛇菰(Balanophoraharlandii Hook.F)，为蛇菰科蛇菰属草本寄生植物，别名为蛇菰、葛蕈、地重楼，苗药名为购俗(ngoub xud)，产于广西、云南、贵州等地，为苗族民间常用草药，具有凉血止血、补益肝肾、清热解毒等功效，民间常用于痔疮、梅毒、小儿阴茎肿、胃痛、咳嗽咳血等病症的治疗[1-3]，从1919年至今，对于蛇菰属植物的研究相对较多，主要含三萜、黄酮、甾体等化学成分，具有抗肿瘤、降血糖、醒酒保肝、抑菌等药理作用[4]。目前关于红冬蛇菰的研究仅报道了37个化合物，滕荣伟等[1]于2000年从云南红冬蛇菰中分离出11个化合物，分别是桐甾醇，桐甾醇-3-O-(6′-O-棕榈酰基)-β-D-葡萄吡喃糖甙，(-)-lariciresinol，(-)-松脂醇[(-pinoresinol]，β-香树脂醇，乙酸蛇麻脂醇酯，棕榈酸，1-O-咖啡酰基-β-D-葡萄吡喃糖，1-O-咖啡酰基-(6-O-没食子酰基)-β-D-葡萄吡喃糖，1-O-咖啡酰基-(4-O-没食子酰基)-β-D-葡萄吡喃糖、没食子酸。杨崇仁等[5]从红冬蛇菰中分离出19个化合物，主要类型为鞣酸、黄酮和酚类物质。范升等人又从广东红冬蛇菰二氯甲烷提取物及其茎部分真菌中出11个化合物，主要类型有三萜、甾体等化学成分[6]。滕荣伟和杨崇仁都分离得到 1-O-咖啡酰基-β-D-葡萄吡喃糖，滕荣伟和范升都分离得到β-香树脂醇、桐甾醇、乙酸蛇麻脂醇酯。。张声源等人在对红冬蛇菰进行资源调查是发现当地群众将其制作成药膳来防治糖尿病及风湿性疾病，且红冬蛇菰具有非常好的抗氧化活性及抑制亚硝化作用[7-8]。目前关于红冬蛇菰的化学成分、药理作用与临床应用研究均较少，课题组后期将对后续红冬蛇菰中分离鉴定出的化学成分进行活性研究。为了明确红冬蛇菰的药效物质基础，本研究在前人研究的基础上对红冬蛇菰化学成分进行研究，以期为该植物的进一步临床应用及开发利用提供参考

1 仪器和试药

数显调温热风枪，宁波得力工具有限公司；Bruker Avance Neo-400 MHz核磁共振波谱仪(TMS为内标)，德国Bruker公司；1000Y西厨多功能粉碎机，永康市铂欧五金制品有限公司；WFH-308B型三色紫外分析仪，上海精科实业有限公司； New Classic MF型电子天平。瑞士Metter-Toledo公司；Buchi 旋转蒸发仪，瑞士步琦有限公司；GF254 薄层硅胶板，青岛海洋化工有限公司；柱层析硅胶(140～160目，200～300目)，青岛海洋化工有限公司；Sephadex LH-20葡聚糖凝胶，美国GE公司。

无水乙醇、石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇(分析纯)，天津市富宇精细化工有限公司，纯净水，华润怡宝饮料有限公司。

实验药材购于贵州省贵阳市万东桥药材市场，由贵州中医药大学江洪副教授鉴定为蛇菰科蛇菰属红冬蛇菰(Balanophoraharlandii Hook. F)的全草。标本存放于贵州省苗医药重点实验室(标本号2018100403)。

2 方法与结果

2.1 实验方法

干燥的红冬蛇菰6 kg，粉碎，95%乙醇冷浸提取3次，每次1天。合并提取液，浓缩得浸膏400 g。浸膏直接经硅胶柱层析(石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱)，得到A～D四个部分。A部分经硅胶柱层析(环己烷洗脱)、凝胶柱层析(二氯甲烷-甲醇 1:1洗脱)得到化合物1(25 mg)；B部分重结晶得到化合物2(135 mg)，母液经硅胶柱层析(石油醚-乙酸乙酯5:1洗脱)、凝胶柱层析(二氯甲烷-甲醇1:1洗脱)、得到化合物3(33 mg)、4(42 mg)；C部分经凝胶柱层析(二氯甲烷-甲醇1:1洗脱)、硅胶柱层析(石油醚-乙酸乙酯7:1洗脱)得到化合物5(23 mg)；D部分经硅胶柱层析(二氯甲烷-甲醇10:1洗脱)、凝胶柱层析(甲醇洗脱)得到化合物6(44 mg)。

2.2 化合物的结构与解析

2.2.1 化合物1：dotriacont-1-ene

无色油状，分子式为C32H64。1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ： 5.81(1H, m, H-2), 4.99(1H, d,J=17.1, H-1a), 4.94(1H, d,J=17.2, H-1b), 2.08～2.00(2H, m, H-3), 0.85～0.80(1H, m, -CH3);13C NMR(100 MHz, CDCl3)δ： 114.0(C-1), 139.3(C-2), 33.83(C-3), 29.0(C-4), 29.2(C-5), 29.5(C-6), 29.7(C-7～C28), 29.4(C-29), 31.9(C-30), 22.7(C-31), 14.1(C-32). 以上数据与文献[9]报道一致，故鉴定该化合物为dotriacont-1-ene。

2.2.2 化合物2：11α, 12α-epoxytaraxer-14-en-3β-yl-acetate

白色结晶。分子式为C32H49O3。1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ： 5.55(1H, dd,J=8.3, 3.3 Hz, H-15), 4.57～4.48(1H, m, H-3), 3.11(1H, t,J=5.1 Hz, H-11), 2.80(1H, d,J=4.6 Hz, H-12), 2.05(3H, s, -COOCH3);13C NMR(100 MHz, CDCl3)δ： 37.9(C-1), 23.2(C-2), 80.7(C-3), 37.7(C-4), 54.7(C-5), 18.8(C-6), 33.2(C-7), 38.9(C-8), 51.8(C-9), 37.5(C-10), 53.5(C-11), 58.2(C-12), 36.5(C-13), 157.1(C-14), 118.9(C-15), 35.3(C-16), 35.4(C-17), 48.2(C-18), 40.3(C-19), 28.7(C-20), 36.6(C-21), 38.2(C-22), 27.9(C-23), 17.0(C-24), 16.6(C-25), 27.0(C-26), 30.2(C-27), 29.9(C-28), 33.7(C-29),19.5(C-30), 170.8(-COOCH3), 21.2(-COOCH3)。以上数据与文献[10]报道一致，故鉴定该化合物为11α, 12α-epoxytaraxer-14-en-3β-yl-acetate。

2.2.3 化合物3：cis-octadec-9-enoic acid

白色膏状。分子式为C18H32O2。1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ： 5.28(2H, m, H-9, 10), 2.27(2H, t,J=7.6 Hz, H-2), 0.81(3H, t,J=6.8 Hz, -CH3);13C NMR(100 MHz, CDCl3)δ： 180.4(C-1), 130.0(C-10), 129.7(C-9), 34.1(C-2), 31.9(C-17), 29.7(C-8), 29.7(C-14), 29.7(C-7), 29.6(C-16), 29.6(C-12), 29.4(C-15), 29.4(C-4), 29.3(C-6), 29.2(C-5), 27.2(C-11), 24.7(C-13), 22.8(C-3), 14.1(C-18)。以上数据与文献[11]报道一致，故鉴定该化合物为cis-octadec-9-enoic acid。

2.2.4 化合物4：二十四烷酸

白色粉末，分子式为C24H48O2。1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ： 2.27(2H, t,J=7.6 Hz, H-2), 1.56(2H, p,J=7.2 Hz, H-3), 1.29～1.11(20H, m, -CH2), 0.85～0.74(3H, m, -CH3);13C NMR(100 MHz, CDCl3)δ： 180.4(C-1), 34.1(C-2), 31.9(C-3), 29.8(C-4), 29.5(C-5), 29.1(C-6), 29.0(C-7～C-20), 27.2(C-23), 24.7(C-24)。以上数据与文献[12]报道一致，故鉴定该化合物为二十四烷酸。

2.2.5 化合物5：β-香树脂醇

白色结晶。分子式为C30H50O。1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ： 5.18(1H, t,J=3.7 Hz, H-12), 3.22(1H, m, H-3), 0.7～1.1(24H, S, 23～30-CH3);13C NMR(100 MHz, CDCl3)δ： 38.9(C-1), 27.3(C-2),79.0(C-3), 38.5(C-4), 55.4(C-5), 18.7(C-6), 32.7(C-7), 39.8(C-8), 47.3(C-9), 37.1(C-10), 23.6(C-11), 121.8(C-12), 145.2(C-13), 41.8(C-14), 26.2(C-15), 27.0(C-16), 32.5(C-17), 47.7(C-18), 46.9(C-19), 31.1(C-20), 34.8(C-21), 37.7(C-22), 28.1(C-23), 15.5(C-24), 15.6(C-25), 16.8(C-26), 26.2(C-27), 28.4(C-28), 33.3(C-29), 23.7(C-30)。以上数据与文献[13]报道一致，故鉴定该化合物为β-香树脂醇。

2.2.6 化合物6：12Z, 15Z-十八碳二烯酸甲酯

白色油状。分子式为C20H34O2。1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ： 5.38～5.19(3H, m, H-10, 12, 13), 4.96～4.80(1H, m, H-9), 0.93～0.81(3H, m, H-18);13C NMR(100 MHz, CDCl3)δ： 174.3(C-1), 34.3(C-2), 24.9(C-3), 27.2(C-4), 129.7(C-5), 130.0(C-6), 27.2(C-7), 27.2(C-8), 130.0(C-9), 128.1(C-10), 25.6(C-11), 127.9(C-12), 130.2(C-13), 27.2(C-14), 29.6(C-15), 31.9(C-16), 22.6(C-17), 14.0(C-18), 62.4(C-1′), 14.1(C-2′)。以上数据与文献[14]报道一致，故鉴定该化合物为12Z, 15Z-十八碳二烯酸甲酯。

3 结 论

红冬蛇菰总浸膏经过硅胶柱层析、凝胶柱层析等分离技术和波谱数据鉴定得到6个化合物，分别是dotriacont-1-ene(1)、11α,12α-epoxytaraxer-14-en-3β-yl-acetate(2)、cis-octadec- 9-enoic acid(3)、二十四烷酸(4)、β-香树脂醇(5)、12Z,15Z-十八碳二烯酸甲酯(6)，化合物1～4、6为首次从该属植物中分离得到，化合物1、3、4、6为脂肪酸类，化合物2、5为三萜类化合物。化合物4具有抗炎及降压作用[15-16]，化合物5在降血糖、降血脂方面均有较好的疗效[17]，高血糖是糖尿病的前兆，现代治疗糖尿病多以降糖的方法，化合物5的降糖作用与红冬蛇菰能够防治糖尿病或许有一定的相关性，红冬蛇菰的其他药理作用有待进一步研究，且所分离鉴定出的化合物的抗炎、降压、降血脂、降血糖作用与蛇菰属植物的部分药理作用相似。蛇菰属药用资源相对丰富，民间药用基础深厚，全世界约有18个属120种，我国2个属20种，广泛分布于台湾、四川、贵州、云南等地。近年来国内外学者对蛇菰属植物研究广泛，但红冬蛇菰的基础研究相对较少，本课题对红冬蛇菰化学成分进行研究，为其开发与利用提供参考。