子宫内膜癌中Survivin、TRF1的表达及与预后相关性分析

白雨昕

黑龙江省佳木斯市中心医院妇科 154002

子宫内膜癌是女性生殖道三大恶性肿瘤之一，主要的临床表现为阴道流血、阴道异常流液、疼痛等，且会并发贫血、不孕，严重危及患者生命安全[1]。目前该病的真正发病原因迄今不明，临床研究表明[2]，子宫内膜癌发生、发展与细胞异常凋亡、端粒功能异常相关。存活素(Survivin)是凋亡蛋白抑制剂家族的成员，可抑制凋亡，促进细胞增殖，并诱导或者增强血管发生；端粒重复序列结合因子1(TRF1)能够抑制染色体末端和干扰端粒酶的结合进而调控端粒长度[3]。Survivin、TRF1与子宫内膜癌的发生发展密切相关，本文探讨Survivin、TRF1在子宫内膜癌中的表达意义，分析其与预后的相关性，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018年5月—2019年5月在我院确诊的52例子宫内膜癌患者进行分析。年龄45～70(60.51±8.71)岁；分化程度：高、中、低分别为26、13、13例；临床分期：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期分别为28、15、9例；病理类型：腺癌30例、乳头状癌14例、透明细胞癌8例；形态：弥漫型29例、局灶型23例；淋巴结转移12例、未转移40例；肌层浸润23例、肌层未浸润29例。纳入标准：依据《子宫内膜癌筛查和早期诊断专家共识(草案)》中的诊断标准[4]，经病理学检查诊断为子宫内膜癌患者；预测生存期在3个月以上者；年龄45～70岁者；知情本次研究者。排除标准：不能够与医护人员正常沟通者；经过放化疗治疗者；临床病理和随访资料不完整者；伴有心脑血管疾病，肝肾功能不全者。

1.2 试剂及药品 兔抗人Survivin单抗、TRF1多克隆抗体购于上海碧云天公司；二氨基联苯胺(DBA)显色试剂盒及免疫组织化学试剂盒均购于北京中杉金桥生物公司。

1.3 方法 (1)Survivin、TRF1的表达情况：用10%甲醛固定子宫内膜癌、癌旁组织标本，用石蜡包埋后，切4μm薄片，烘干、脱蜡后滴加兔抗人Survivin单抗、TRF1多克隆抗体，然后进行苏木素染色。以自制磷酸盐缓冲液(PBS)为阴性对照，用已知阳性组织切片为阳性对照。其中Survivin阳性判定标准：阳性细胞——细胞核或细胞质内出现棕黄色、深棕色颗粒。在400倍镜下观察阳性细胞<10%判定为阴性，≥10%判定为阳性。TRF1阳性判定标准：阳性细胞——胞质内出现棕黄色细颗粒。在400倍镜下观察阳性细胞<30%判定为阴性，≥30%判定为阳性[5]。(2)临床特征：统计患者年龄、分化程度、临床分期、病理类型、淋巴结转移情况、肌层浸润情况、形态。(3)生存状况：电话随访2年，统计患者生存状况，并利用Prism绘制生存曲线。

2 结果

2.1 子宫内膜癌和癌旁组织标本Survivin、TRF1的表达情况比较 相比癌旁组织标本，子宫内膜癌组织标本中Survivin、TRF1阳性表达率明显更高(P<0.05)。详见表1。

表1 子宫内膜癌和癌旁组织标本Survivin、TRF1的表达情况比较[n(%)]

2.2 子宫内膜癌组织中Survivin、TRF1的表达与临床特征的关系分析 在子宫内膜癌组织中，Survivin的阳性表达率随着分化程度的降低、临床分期的增加、淋巴结转移、肌层浸润而增高；TRF1的阳性表达率随着肌层浸润而增高(P<0.05)。详见表2。

表2 子宫内膜癌组织中Survivin、TRF1的表达与临床特征的关系分析[n(%)]

2.3 Survivin、TRF1阳性和阴性表达子宫内膜癌患者24个月生存状况比较 子宫内膜癌患者24个月生存率为78.85%(41/52)，其中Survivin阳性表达患者24个月生存率为72.73%(24/33)，低于阴性表达患者的89.47%(17/19)，但差异无统计学意义(χ2=2.027，P=0.155)；TRF1阳性患者24个月生存率为77.08%(37/48)，低于阴性表达患者的100.00%(4/4)，但差异无统计学意义(χ2=1.163，P=0.281>0.05)。

3 讨论

子宫内膜癌病因并不十分清楚，可能与激素分泌有关，也可能与基因突变有关[6]。然而，近年来临床研究表明[7-8]，子宫内膜癌通常是由于细胞异常分化、凋亡造成的，其中细胞异常凋亡是关键，并且端粒是调节细胞增殖与凋亡的重要分子结构之一。Survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成员，与肿瘤细胞的分化增殖及浸润转移密切相关；TRF1是端粒长度的负调控因子，能够导致端粒逐渐和持续性缩短[9-10]。故研究Survivin、TRF1在子宫内膜癌发生、发展、预后中的作用具有重要的意义。本文通过52例子宫内膜癌患者发现，相比癌旁组织标本，子宫内膜癌组织标本中Survivin、TRF1阳性表达率明显更高。分析原因，TRF1能够缩短端粒长度，进而使得细胞增殖与凋亡失衡，并且在高表达情况下保护端粒末端，使得癌细胞具有永生的功能；另外，Survivin是凋亡抑制蛋白，能够抑制癌细胞凋亡，促进癌细胞增殖[11-12]。

同时本文结果显示，在子宫内膜癌组织中，Survivin的阳性表达率随着分化程度的降低、临床分期的增加、淋巴结转移、肌层浸润而增高；TRF1的阳性表达率随着肌层浸润而增高；子宫内膜癌患者24个月生存率为78.85%，其中Survivin阳性表达患者24个月生存率为72.73%，低于阴性表达患者的89.47%；TRF1阳性患者24个月生存率为77.08%，低于阴性表达患者的100.00%。分析原因，Survivin能够抑制子宫内膜癌细胞的凋亡，促进子宫内膜癌增殖，Survivin高表达在子宫内膜癌的发展、预后中起重要的作用；TRF1打破正常细胞增殖和凋亡平衡，在高表达的情况下，抑制子宫内膜癌细胞的凋亡，使得癌细胞数量逐渐增加，组织逐渐增大发展，导致患者预后较差。

综上所述，Survivin、TRF1在子宫内膜癌中均呈现高表达，且与临床特征和患者预后密切相关，可指导临床进行子宫内膜癌诊断与治疗。