微柱凝胶法与凝聚胺法及盐水法在交叉配血中的应用效果

傅萍燕，赖婷婷，曾志

龙岩人民医院 (福建龙岩 364000)

输血是临床抢救患者的重要方法之一，适用于急救及改善患者健康状况。由于人体血液中的抗体、抗原较为复杂，输血时机体可能产生排异反应，导致受血者出现溶血性输血反应[1]，故在输血前进行交叉配血试验尤为重要。交叉配血的主要目的是检查供血者与受血者之间血液的相容性，以保证输血过程中受血者的人身安全[2]。目前，临床进行交叉配血试验的方法繁多，其中，盐水法、凝聚胺法(moditying polybrene test，MPT)及微柱凝胶法(microtubes gel test，MGT)是3种常用的试验方法，但采用不同的试验方法进行交叉配血的效果不尽相同[3]。鉴于此，本研究探讨MGT、MPT及盐水法在交叉配血中的应用效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年2月至2020年2月我院收治的200例需进行交叉配血的患者为研究对象，其中，男115例，女85例；年龄46～72岁，平均(59.23±3.28)岁；既往有输血史65例，妊娠史77例。

1.2 方法

所有患者均以MGT、MPT和盐水法进行交叉配血试验，采集受血者、供血者(本研究以龙岩市中心血站提供的成分血为供血者)3 ml的抗凝静脉血，采用台式离心机(南京贝登医疗股份有限公司，型号 L530)以3 000 r/min离心1 min后，分离血浆；用0.9%氯化钠注射液与受血者、供血者的红细胞配成1%和5%的红细胞悬液备用。

采用MGT进行交叉配血试验：试剂为低离子抗人球蛋白卡[伯乐生命医学产品(上海)有限公司]，标记主次侧卡片，于次侧加50 μl受血者1%红细胞悬液及50 μl供血者血浆，主侧加50 μl供血者1%红细胞悬液及50 μl受血者血浆；在37 ℃下孵育15 min后，将卡片放在专用离心机[伯乐生命医学产品(上海)有限公司，ID-Centrifuge型]中以2 000 r/min离心10 min，观察结果，若离心后红细胞全部下沉到微管底部，说明未发生抗原抗体反应，交叉配血结果相合，若微管中的红细胞产生凝集，离心后未能全部下沉到底部，表示配血结果不合。

采用MPT进行交叉配血试验：试剂为凝聚胺介质(珠海贝索生物技术有限公司)，在两支试管上注明主次侧，于次侧加100 μl供血者血浆及50 μl受血者5%红细胞悬液，主侧加100 μl受血者血浆及50 μl供血者5%红细胞悬液，再将0.65 ml低离子溶液分别加入两管中，混合均匀后，再分别向两管中加入2滴凝聚胺溶液，再次混匀，然后用低速离心机(珠海贝索生物技术有限公司，型号 BASO2005-1型)以3 400 r/min离心10 s，去除上清液，留取管底0.1 ml液体，观察红细胞在管底有无发生凝集情况，若未发生凝聚，则需重新检测；最后，将2滴悬浮液加入两管中，轻摇试管，使液体混匀，若60 s内凝集散开，说明悬浮液所导致的非特异性凝聚，交叉配血结果相合，若凝集不散开，表示配血结果不合。

采用盐水法进行交叉配血试验：标记主次侧试管，于主侧加50 μl供血者5%红细胞悬液及100 μl受血者血浆，次侧加100 μl供血者血浆和50 μl受血者5%红细胞悬液，用低速离心机以1 000 r/min离心1 min，观察试管中的上清液有无溶血，并将试管轻轻旋转或轻弹，对试管底反应物凝集情况进行仔细观察，若发现溶血或凝集现象，表示配血结果不合，若未发现溶血或凝集现象，表示交叉配血结果相合。

1.3 评价指标

观察记录3种试验方法的配血时间，比较3种试验方法的配血结果，并分析配血结果不合的原因。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 配血时间

MGT的配血时间为(34.56±4.68)min，MPT的配血时间为(13.15±2.45)min，盐水法的配血时间为(21.32±3.41)min，MPT、盐水法、MGT 3种试验方法的配血时间依次延长，差异有统计学意义(F=1 771.772，P<0.05)。

2.2 配血结果

MGT的配血不合率高于MPT及盐水法，差异有统计学意义(P<0.05)；MPT与盐水法的配血不合率比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 3种试验方法的配血结果比较(200例)

2.3 配血结果不合原因

3种试验方法配血结果不合的原因中，血液病为主要原因，见表2。

表2 3种试验方法配血结果不合的原因比较(例)

3 讨论

输血虽然能够帮助患者改善自身病情，但也存在一定的风险，如输血过程中人体免疫系统可损伤抗原细胞，从而引发严重不良反应[4]。而交叉配血试验是患者输血前必不可少的步骤，旨在保证输血安全。交叉配血试验通常需进行主次侧试验，若主侧试验出现凝聚，表示不能输血，若次侧试验出现凝聚，表示虽可输血但需减少输血[5]。现阶段，随着医疗检测技术的不断发展，MGT、MPT和盐水法等方法被广泛用于临床交叉配血试验中。因此，积极探寻不同试验方式的优缺点，对今后临床选择适合的试验方式尤为重要。

本研究结果显示，MPT、盐水法、MGT 3种试验方法的配血时间依次延长，差异有统计学意义(P<0.05)；MGT的配血不合率高于MPT及盐水法，差异有统计学意义(P<0.05)。经分析，其原因在于，MGT是集生物化学凝胶过滤技术、离心技术和特性免疫技术反应于一体的新技术，通过在微柱中进行抗原抗体反应，再借助凝胶微小的过滤网分开凝集、游离红细胞，可判断出抗人球蛋白补体成分是否为致敏的红细胞，该方法灵敏度较高，易检测出微弱凝聚和不规则抗体，且可降低人为误差率，试验结果更为准确，更能保证患者的用血安全[6-7]；但其检测成本较高，且需一定的检测时间，可能耽误急诊重症患者的抢救时机。MPT通过凝聚胺溶解后，会释放大量正电荷，使红细胞表面的负电荷被中和，进而缩短红细胞间距，使正常红细胞间出现可逆非特异性凝集，当与抗体致敏红细胞凝集时，可出现不可逆凝集，从而判断配血结果的相合情况[3，8]，此外，MPT可在15 min内完成检测，具有快速、操作简便的优势；但MPT易受人为因素、温度、药物等的影响，当患者存在自身免疫性溶血性贫血、输血妊娠史等情况时，其红细胞上的抗原较弱，易出现漏检。盐水法对检测设备的要求低，且成本低廉、耗时较短，可有效检出IgM类血型抗体，且在检测ABO弱抗原抗体反应能力方面的灵敏度较高，可在一定程度上弥补MPT存在的不足，但由于IgG在盐水介质中无法与相应抗体的红细胞进行凝集，故盐水法对人体血液中IgG抗体的检测能力不佳，灵敏度不高[9]。本研究结果还显示，3种试验方法配血结果不合的原因中，血液病为主要原因。经分析，其原因可能为，血液病多为反复输血产生免疫性抗体，可凝集自身和其他所有人的红细胞，增加交叉配血不合率。对此，建议针对常规输血时间较充裕的患者，可选用MGT进行交叉配血，以提高输血安全性；针对急诊抢救患者，可先采用盐水法配合MPT进行交叉配血，再采用MGT进行交叉配血复查，不仅可保证输血的及时性，还可减少输血反应的发生。

综上所述，采用MGT、MPT及盐水法进行交叉配血试验各有优缺点；相较于MPT及盐水法，采用MGT进行交叉配血可提高试验的安全性，但耗时较长。临床可根据实际情况灵活选用合适的试验方法，以提高交叉配血的试验效率及输血的安全性。