饲粮添加共轭亚油酸对湖羊屠宰性能及胃肠器官指数的影响

范慧玉，徐建风，王 静，张振东，张建军，沈振峰，张 帆，刘 婷，郑 琛

（甘肃农业大学动物科学技术学院, 甘肃 兰州 730070）

共轭亚油酸(conjugated linoleic acid, CLA)由十八碳二烯酸(C18 : 2)共轭双键的多种位置和几何异构体构成，是人和动物自身无法合成但又不可缺少的新型功能性多不饱和脂肪酸[1]，主要存在于反刍动物的肉类和乳制品中[2-3]。其中，乳制品中共轭亚油酸含量为0.34%～1.07%，牛肉中0.12%～0.68%[4]。在动物饲粮中添加富含共轭亚油酸或亚油酸(linoleic acid, LA)的油脂类饲料能增加动物机体内合成共轭亚油酸的底物量，是提高畜产品中共轭亚油酸含量的重要措施[5]。尽管饲草中共轭亚油酸含量非常少，特别是具有生物活性的c-9 和t-11 异构体，但反刍动物肠道中厌氧的溶纤维丁酸弧菌亚油酸异构酶能使饲料中的亚油酸转化成共轭亚油酸，并以具有其活性c-9 和t-11 异构体形式存在，具有改善动物机体脂肪沉积及提高生产性能等生理功能[6]。Pachikian 等[7]研究发现，肝组织中存在的反-11，反-13 CLA 和顺-9，顺-11 共轭亚油酸与甘油三酯含量的增加和脂肪生成基因的表达有关。研究发现，反-10，顺-12 共轭亚油酸通过下调脂肪生成相关基因和转录因子的表达，从而引起乳脂抑制[8]。顺-9，反-11 共轭亚油酸和顺-10，反-12 共轭亚油酸异构体均可以降低小鼠体重、体增重、机体脂肪比例及血清甘油三酯含量，增加肌肉比例[9]。前期研究证实，羊肉中CLA 含量受到饲粮组成的影响[10]。在研究添加不同水平共轭亚油酸对淘汰母牛生产性能的影响中发现，随着共轭亚油酸添加量的增加，淘汰母牛的胴体重和屠宰率均有上升趋势，以1.5%添加量提高最为明显[11]。添加2%～3%的大豆油+亚麻籽油可以改善断奶羔羊的生产性能[12]。张俊丽等[13]在共轭亚油酸对滩羊二毛羔羊胴体品质及脂肪酸含量的影响中发现，基础日粮+ 2% 共轭亚油酸可以改善滩羊二毛羔羊的屠宰性能。基于以上研究发现，共轭亚油酸对湖羊胃肠形态学的研究还鲜有报道。因此，本研究探讨饲粮添加2% 共轭亚油酸对其湖羊屠宰性能以及胃肠器官发育指数的影响，以期为共轭亚油酸在反刍动物中的应用提供一定的科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计及试验动物

采用配对试验设计。从金昌中天羊业有限公司选择30 只体况良好、遗传背景一致、体重相近[(31.19 ± 0.53) kg]的湖羊公羔，按照同质性原则随机分为2 个处理组(对照组和共轭亚油酸组)，每组15 只，每只为1 个重复。参照《中华人民共和国农业行业标准-肉羊饲养标准》(NY/T816-2004)进行饲粮配制。营养标准配制对照组试验羊全混合基础饲粮，用2%共轭亚油酸替代糖蜜配制与对照组同一营养水平的共轭亚油酸组全混合饲粮(表1)。其中，共轭亚油酸购于陕西林州生物有限公司，该品为白色粉末，分子式为C18H32O2，规格≥ 98%。饲粮制作成全混合颗粒料，其颗粒料直径约3.5 mm，长度1～2 cm。试验预饲期10 d，正试期为60 d，于饲养试验结束后进行屠宰。

表1 试验饲粮组成及营养水平(干物质基础)Table 1 Composition and nutrient level of experiment diets(dry matter basis)

1.2 饲养管理

试验羊全部舍饲，单栏饲养，编号入栏。每个单栏均设有单独的喂料槽和饮水器，每天投料两次(08:00 和18:00)，确保自由采食(以每天采食后料槽的剩料为准)与饮水。试验期间保持舍内温度一致(20～25 ℃)，观察所有羊只的健康与采食情况。按照羊场标准化免疫程序进行免疫(所有试验羊均注射口蹄疫、驱虫、羊痘疫苗，并做布病检测)，定期清除粪便并消毒，保持舍内外卫生干净。

1.3 样品采集与测定

1.3.1 湖羊生产性能测定

式中：ADG为平均日增重；BWt为试验末体重；BW0为试验初体重；Dt为饲喂天数；ADFI为平均日采食量；Ft为每日投喂量；F0为剩余量；N为每组动物数；F/I为料重比。

1.3.2 屠宰指标及胃肠器官指数测定

试验结束时，30 只湖羊全部静脉放血屠宰，称取并记录皮、头、蹄、内脏器官及胴体重量。参照纪博心[16]的方法计算湖羊屠宰率，公式如下：

式中：Cr为屠宰率；CW为胴体重；LW为宰前活重。

试验羊屠宰后分离4 个胃室、小肠和大肠并清除其内容物，用生理盐水冲洗干净，使用无菌纱布擦干后，参照郑琛等[17]采用的方法测定各胃肠道长度和重量，并计算其器官指数(占宰前活重的百分比)。

1.3.3 胃肠组织形态测定

试验羊屠宰后快速截取瘤胃、皱胃、十二指肠、空肠和回肠中部约2 cm2区段，先用生理盐水冲洗除去肠道内容物，再置于多聚甲醛固定液中避光保存48 h 以上。

午收过后，埇桥区皖神面制品有限公司的加工车间，运送面粉的货车往来穿梭，数十个面粉加工点每天运来数百吨面粉。这些面粉有的被制成面条供应大型超市，有的被深加工成谷朊粉、淀粉、乙醇等化工产品出口创汇。

石蜡切片制作委托湖南志凡生物有限公司完成。运用Olympus-DP71 显微照相系统(奥林巴斯有限责任公司，日本)观察羔羊瘤胃、皱胃、十二指肠、空肠和回肠黏膜组织形态并拍照。用Image 6.0 图像处理软件测定瘤胃乳头长度、宽度与肌层厚度，皱胃黏膜层厚度和肌层厚度，以及十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度和宽度、隐窝深度、肌层厚度。每张切片选取8～10 个典型视野，每个视野测定3 组数据，并计算绒毛长度/隐窝深度(villus length/crypt depth, V/C)的值。

1.4 数据统计与分析

利用SPSS 25.0 统计分析软件对数据进行独立样本T检验，以P＜ 0.05 表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 共轭亚油酸对湖羊生产性能的影响

由表2 可知，添加共轭亚油酸对湖羊各个时期的生产性能均无显著影响(P＞ 0.05)。

表2 共轭亚油酸对湖羊生产性能的影响Table 2 Effects of CLA on growth performance of Hu sheep

2.2 共轭亚油酸对湖羊屠宰性能的影响

添加共轭亚油酸可以显著提高共轭亚油酸组湖羊的胴体重(P= 0.027)和屠宰率(P= 0.017)，对其他屠宰性能均无显著影响(P＞ 0.05) (表3)。

表3 共轭亚油酸对湖羊屠宰性能的影响Table 3 Effects of CLA on the slaughter performance of Hu sheep

2.3 共轭亚油酸对湖羊胃肠道的影响

2.3.1 共轭亚油酸对湖羊胃肠指数的影响

共轭亚油酸组湖羊盲肠占全肠重量的百分比与占全胃肠重量的百分比显著低于对照组(P= 0.020，P= 0.033)，皱胃占全胃重量的百分比显著高于对照组湖羊(P= 0.017)。共轭亚油酸对湖羊胃室和其他肠段指数均未产生显著影响(P＞ 0.05) (表4)。

表4 共轭亚油酸对湖羊胃肠指数的影响Table 4 Effect of CLA on relative weight of gastrointestinal tract of Hu sheep

2.3.2 共轭亚油酸对湖羊胃肠道长度的影响

共轭亚油酸对湖羊胃肠道长度和相对长度(占全肠长度的百分比)在各肠段均未产生显著影响(P＞ 0.05) (表5)。

表5 共轭亚油酸对湖羊胃肠道长度和相对长度的影响Table 5 Effects of CLA on gastrointestinal length and relative length of Hu sheep

2.4 共轭亚油酸对湖羊胃肠道形态的影响

饲粮中添加共轭亚油酸时湖羊空肠绒毛长度和宽度、回肠绒毛长度和肌层厚度显著低于对照组(P= 0.026,P= 0.034,P= 0.013,P= 0.005)，共轭亚油酸对湖羊其他胃肠形态无显著影响(P＞ 0.05) (表6)。

表6 共轭亚油酸对湖羊瘤胃、皱胃及小肠组织形态的影响Table 6 Effects of CLA on rumen, abomasum and small intestine morphology of Hu sheep

3 讨论

3.1 饲粮中添加共轭亚油酸对湖羊生产性能的影响

本研究中，添加2%剂量的共轭亚油酸对湖羊各阶段的平均日增重、平均日采食量和料重比均未产生显著影响。Sharifi 等[19]、Wynn 等[20]和Gillis等[21]在饲粮中添加共轭亚油酸对绵羊生产性能影响的研究中也得到了相同的结果。与之相似，在生长猪的试验中，添加共轭亚油酸显著降低猪采食量，增加瘦肉率，但对平均日增重无显著性影响[22]；Suksombat 等[23]在研究饲粮中添加亚麻籽油对奶牛生产性能和牛奶品质影响的试验中发现，亚麻籽油能显著提高牛奶营养价值，但对其牛奶成分和奶牛的生产性能不会造成影响。前期大量研究证实，饲粮中添加共轭亚油酸可以明显降低动物机体对脂肪的沉积率，从而改善机体的饲料转化，提高其瘦肉率[24-26]。这可能是因为饲料中添加共轭亚油酸能够引起动物体对所吸收的养分进行重新分配，但不能达到影响动物生产性能的水平。

3.2 饲粮中添加共轭亚油酸对湖羊屠宰性能的影响

屠宰性能作为评价肉品生产中一项重要的指标，可以直接地反映动物的经济价值。 Poorghasemi等[27]和Nobakht 等[28]试验证实，饲粮中添加植物油脂能够改善动物的屠宰率。Nguyen 等[29]研究发现，补充含有菜籽油或亚麻籽油颗粒料可以显著提高澳大利亚优质羔羊的胴体重和屠宰率。张元可等[30]研究发现，在饲粮中添加包被肉桂油可以显著提高肉鸡的胴体重。初汉平[31]和姜辉等[32]在牛至油对青山羊和河西绒山羊屠宰性能影响的研究中发现，牛至油可以明显地增加青山羊和河西绒山羊的屠宰率和胴体重。马吉锋等[33]研究发现，在滩湖羔羊饲料中添加共轭亚油酸可提高屠宰性能。本研究结果表明，饲粮中添加共轭亚油酸能够显著提高湖羊胴体重与屠宰率，与前人研究结果一致。这可能是因为共轭亚油酸也具有类似牛至油的特性，可刺激其体内消化道黏膜上的感受器官，从而激活体内消化酶的活性，促进营养物质的消化及吸收，进而提高增重和饲料的吸收利用率，使得机体肌肉迅速积累；也可能是因为共轭亚油酸能够增强反刍动物机体内机体免疫，改善骨组织代谢和肌肉生长[34]，影响绵羊肌肉代谢。然而，共轭亚油酸对反刍动物骨骼肌代谢影响的研究甚少，有待进一步研究。

动物器官指数在一定程度上能够反映动物机体的机能状况，对于理论研究和生产实践均有重要意义[35]。Andrade 等[36]研究发现，优质的亚油酸可促进萨能奶山羊机体内脏器官系统的发育。但在本研究中，添加共轭亚油酸对器官指数除皱胃(占全胃重量百分比)以外，均未产生积极的显著性影响。这可能是因为动物品种和年龄的不同。然而值得注意的是，本研究饲粮中添加共轭亚油酸的试验羊，整个育肥过程中均未出现任何不良反应及死亡现象，由此证实，共轭亚油酸不会影响育肥期湖羊正常的生理机能。

3.3 饲粮中添加共轭亚油酸对湖羊胃肠道相对重量和长度的影响

动物机体胃肠道的重量和长度能够反映机体的养分利用状况及生长情况[37]。大量研究报道，在饲粮中添加共轭亚油酸可以使反刍动物瘤胃内环境发生改变，造成前消化道瘤胃微生物活性增强，对营养物质消化吸收较好[38-41]。本研究中，共轭亚油酸组湖羊的盲肠相对重量显著低于对照组盲肠相对重量，推测这可能是因为共轭亚油酸可以增强反刍动物瘤胃中微生物的活性，进而增加试验羊小肠段对营养物质的吸收，从而降低盲肠对后肠段食糜的降解，使得其相对质量减小。本研究中，共轭亚油酸组湖羊皱胃的相对重量显著增加。由此可推断，饲粮添加共轭亚油酸能够刺激试验羊皱胃消化酶和胃酸的分泌，从而引起皱胃相对重量的增加，甚至可以促进其对食糜的消化；另外，皱胃消化功能的提高也能够验证盲肠质量减轻的试验结果。但此推论尚待进一步的研究。

3.4 饲粮中添加共轭亚油酸对湖羊胃肠组织形态的影响

反刍动物前胃(瘤胃、网胃和瓣胃)的黏膜上没有腺体，不分泌胃液，含有密集分布的乳头，主要功能是储存、发酵饲料和分解纤维素[42-43]。而瘤胃上皮细胞的良好发育有助于瘤胃对营养物质的吸收，尤其瘤胃乳头长度是影响营养物质消化吸收最重要的评价指标，乳头越长，与食糜接触更充分，消化吸收也就越充分，其次则是乳头宽度和瘤胃壁厚度[44]。本研究中，饲粮中添加共轭亚油酸对试验羊瘤胃形态相关指标未产生显著性影响。这主要是因为饲料结构、来源和粒度是影响瘤胃形态和功能的重要因素[45]。本研究中，两个处理组的饲粮具有相同的来源、粒度和水平，这可能是造成瘤胃形态学未表现出差异的主要原因。

反刍动物肠道内共轭亚油酸水溶性差、氧化敏感度高，是其主要的吸收部位[46-47]。肠道对营养物质的吸收能力与其绒毛高度、隐窝深度及黏膜厚度均呈正相关关系，绒毛越长则对养分的吸收越好[48]。小肠的黏膜结构，特别是绒毛和隐窝的结构是判断小肠吸收营养物质能力的重要指标之一[49]。隐窝深，说明肠绒毛萎缩使得其吸收能力减弱[50]。葛晓可[51]在日粮中添加油脂对肉鸡生长性能、肉品质和脂代谢的影响研究中发现，油脂可以提高肉鸡前期空肠和回肠脂肪酶的活性。Liermann 等[52]试验证明，共轭亚油酸有降低哺乳期小牛空肠固有层CD2 + T 免疫细胞亚群的趋势。本研究中，饲料中添加共轭亚油酸后显著降低了湖羊空肠绒毛长度和宽度、回肠的绒毛长度和肌层厚度，且小肠隐窝深度均小于对照组湖羊。这可能是因为共轭亚油酸提高了湖羊小肠段酶活性，加速肠道上皮细胞代谢，使肠道上皮细胞更新速度加快并降低绒毛高度，但可提高养分的消化吸收，具体原理还有待进一步研究。

4 结论

小肠是营养物质主要的消化吸收部位。在本试验条件下，共轭亚油酸调控瘤胃微生物菌群，改善瘤胃发酵，继而改善瘤胃食糜组成并提高皱胃消化功能，引起皱胃相对质量的增加。此外，共轭亚油酸可通过降低空肠和回肠黏膜隐窝深度增进小肠上皮细胞更新与成熟，提高养分吸收能力，进而减少盲肠食糜流通并降低盲肠相对质量。由此可推断，饲粮添加2%共轭亚油酸可刺激湖羊小肠部位对饲料营养物质的吸收，提高湖羊的屠宰性能。