改良豆粕对婺农土鸡生长及抗氧化性能的影响

朱单瓅，娄赛炜，梁嘉怡，唐星宇，费 丝，方幽文，叶雨蒙，张培云，刘 鹏，邢承华

(1.金华职业技术学院 农学院，浙江 金华 321017；2.浙江师范大学 植物学实验室，浙江 金华 321004)

0 引言

【研究意义】土鸡又称柴鸡，常放养于山野林间并加以粗饲喂养，具有较高的营养和食用价值，广受消费者欢迎[1]。然而，我国土鸡养殖存在技术体系不完善、饲料营养配比缺乏标准等问题，其肉营养及适口性欠佳，鸡肉品质及经济价值仍具较大发展空间[2]。豆粕作为我国传统土鸡饲料的主要成分，其活性物质大豆异黄酮(Soybean Isoflavone，SI)多以结合态存在[3]，在肠道消化过程中无法被直接吸收，而β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase)是一种能够将结合态SI转化为具有生理活性的游离型苷元的水解酶，可提高SI的利用率[4]。大豆异黄酮具有抗氧化、促进动物生长等多种营养生理功能。因此，研究豆粕对土鸡生长性能及抗氧化性能的影响，对土鸡功能饲料的开发与应用具有重要意义。【前人研究进展】王锦湘[5]研究表明，饲粮中添加SI可提高生长猪15～28 d的平均日增重，降低血浆丙二醛(MDA)含量水平，提高过氧化氢酶(CAT)活性并改善血清免疫指标。胡胜兰等[6]研究发现，添加SI可提高体外氧化应激仔猪肠上皮细胞的抗氧化能力，并可通过调控相关信号通路抑制氧化应激诱导细胞炎症应答。田何芳等[7]研究表明，在京粉1号蛋鸡基础饲粮的基础上添加SI(10 mg/kg)，可提高鸡蛋的蛋壳厚度和强度，并显著增加鸡血浆中的钙、磷和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量。MORVARIDZADEH等[8]报道，采用β-葡萄糖苷酶处理豆粕有望提高畜禽对饲料的吸收率，激活生理代谢，促进其生长。【研究切入点】鲜见关于β-葡萄糖苷酶水解改良豆粕对土鸡生长性能及抗氧化性能影响的研究报道。【拟解决的关键问题】选择婺农土鸡为研究对象，探明β-葡萄糖苷酶水解豆粕替换原豆粕不同比例饲喂婺农土鸡的生产性能、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化，以期为功能饲料的开发与应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 土鸡 选取体型适中、性状优良、健康无病的婺农土鸡鸡仔32只，由金华职业技术学院动物养护疾病诊治实训中心提供。

1.1.2 豆粕与试剂 豆粕，购自浙江金华；β-葡萄糖苷酶，购自上海源叶生物科技有限公司；丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒，来自南京建成生物工程研究所。

1.1.3 仪器 离心机，购自上海凌仪生物科技有限公司；酶标仪，购自帝肯(上海)贸易有限公司；恒温水浴箱，购自上海一恒科学仪器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 饲料原料预处理 豆粕与酶比例为0.7 g∶4.0 mg，将酶溶于适量水中制成稀酶液，倒入豆粕中搅拌均匀，室温下放置2 h后进行水解，烘箱烘干，阴凉避光处贮存备用。

1.2.2 试验设计 试验于2021年5-7月在金华职业技术学院动物养护疾病诊治实训中心进行，试验期42 d。选择体重与发育时间一致且公母各半的婺农土鸡为研究对象，采用单因子分组设计，β-葡萄糖苷酶水解豆粕替换未水解豆粕(以下简称水解豆粕替换未水解豆粕)的比例共设4个处理，4次重复。CK，饲喂玉米-豆粕型基础日粮(即不替换未水解豆粕)；T1，1/3替换未水解豆粕；T2，2/3替换未水解豆粕；T3，全部替换未水解豆粕。

1.2.3 饲养管理 对放养鸡舍、鸡笼、采食及饮水设备进行清洗、消毒，按常规管理方法做好免疫工作。每日7:00喂料1次，自由采食、饮水，根据林草和昆虫资源情况制订合理的人工补饲次数和数量，傍晚补饲。

1.2.4 指标测定 分别于试验开始前和试验结束时于早饲前空腹称重婺农土鸡始重(g)和终重(g)，计算统计期内的日增重(ADG，g)、日采食量(ADFI，g)和料重比(F/G)。21 d和42 d时采用普通采血管翅静脉采血5 mL，血清样本于4℃保温箱静置，用于测定各组婺农土鸡血清生化指标。参照文献[9]的方法，采用丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒测定婺农土鸡血清的MDA含量和SOD活性。

1.3 数据处理与分析

采用SPSS 22.0对数据进行处理与分析，以单因素方差分析法和Duncan法进行显著性差异分析(P<0.05)，用Origin 2021制图。

2 结果与分析

2.1 不同处理婺农土鸡的生长性能

从表1可知，改良豆粕不同处理婺农土鸡始重、终重和日增重等生长性能存在差异。始重：各处理为386.09～386.72 g,处理间差异不显著。终重：各处理为1 162.54～1 258.75 g，T2显著大于CK，T1、T2、T3间和CK、T1、T3间差异不显著。日增重：各处理为18.49～20.78 g,T2较CK显著增重12.39%，T1、T2、T3间和CK、T1、T3间差异不显著。日采食量：各处理为59.87～61.13 g,处理间差异不显著。料重比：各处理为2.88～3.31,依次为CK>T1>T3>T2，处理间差异不显著，T2较CK降低12.99%。表明，在婺农土鸡始重及日采食量基本相同的情况下，T2日增重最大，且效用优于T1和T3。

表1 不同处理婺农土鸡的生长性能

2.2 不同处理婺农土鸡血清的抗氧化性能

从图1看出，改良豆粕不同处理婺农土鸡血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化。

注：相同时间各处理不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

2.2.1 超氧化物歧化酶(SOD)活性 21 d时，T2最大，为199.35 U/mL，CK最小，为167.12 U/mL；T2较CK显著提高19.29%，T1、T2、T3间和CK、T1、T3间差异不显著。42 d时，T2最大，为213.49 U/mL，CK最小，为179.03 U/mL；T2显著大于其余处理，其余处理间差异不显著。

2.2.2 丙二醛(MDA)含量 21 d时，各处理为3.51～4.01 μmol/L，T2较CK降低12.47%，各处理间差异不显著。42 d时，各处理为3.36～3.92 μmol/L，T2较CK降低14.29%，CK显著大于T2，T1、T2、T3间和CK、T1、T3间差异不显著。

3 讨论

大豆异黄酮(SI)是存在于豆科植物的一类多酚化合物，具有抗氧化、促进动物生长、增强机体免疫力及提高蛋白质合成效率等多种营养生理功能，用作饲料添加剂能够对禽畜的生产、生理性能产生积极影响[10-11]。豆粕中的结合型大豆异黄酮可在β-葡萄糖苷酶的作用下水解成游离型苷元[12]，从而提高其利用率。王一冰等[13]研究表明，基础日粮中添加大豆异黄酮300 mg/kg饲喂110～140 日龄文昌鸡，试验组生长末重与平均日增重较对照组均显著增加，料重比降低。林厦菁等[14]研究发现，添加大豆异黄酮能够显著提高断奶仔猪的采食量和饲料转化率，其后期作用更为明显。周铃铃等[15]报道，用含8%高活性大豆异黄酮发酵豆粕替代普通豆粕，断奶仔猪的增重及采食量显著提高。研究结果表明，β-葡萄糖苷酶水解豆粕替换原豆粕不同比例处理中，各处理组婺农土鸡的生长性能均有提升，2/3替换未水解豆粕农土鸡日增重最大和料重比最小，分别较CK提高12.39%和降低12.99%，与林厦菁等[14-15]的研究结果一致。表明，β-葡萄糖苷酶能够通过水解豆粕中的结合型大豆异黄酮转化为游离态的大豆异黄酮，促进婺农土鸡吸收豆粕中的营养成分；充分发挥大豆异黄酮具有的弱雌激素活性，一定程度上影响婺农土鸡内分泌系统，推动其垂体生长素(GH)和睾酮生成释放[16]，激发肌肉蛋白合成，协调脂肪蛋白比例[17]，最终表现为生长速度加快[18]。

SOD参与平衡机体内氧化与抗氧化过程，能快速清除细胞内的氧自由基并修复受损的细胞组织，在机体氧化与抗氧化平衡中具有至关重要的作用[19]。MDA是氧自由基攻击脂类物质分解后的产物之一，其含量可反映机体脂质过氧化的程度[20]。王一冰等[21]研究发现，1～30日龄的清远麻鸡饲粮中添加大豆异黄酮，仔鸡血浆和空肠中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著增加，MDA含量明显降低。刘思彤等[22]研究大豆异黄酮对衰老小鼠肝脏抗氧化能力的作用发现，小鼠肝组织中相关抗氧化酶活性均明显上升，MDA含量显著降低。林厦菁等[23]研究大豆异黄酮对文昌鸡血浆抗氧化指标的影响表明，SI组的MDA浓度平均较CK降低12.3%。研究结果表明，β-葡萄糖苷酶水解豆粕替换原豆粕不同比例处理中，2/3替换未水解豆粕婺农土鸡血清SOD活性最高和MDA含量最低，分别较CK提高19.29%和降低14.29%，与王一冰等[21-23]的研究结果相近。因此，使用β-葡萄糖苷酶水解豆粕得到具有游离活性的大豆异黄酮，能够促进婺农土鸡对豆粕饲料营养的吸收，提高SOD活性，缓解自由基通过夺取细胞和细胞膜上电子发生的氧化反应，并细胞膜脂过氧化程度，减少MDA的积累量，以缓解蛋白质和核酸等生命大分子的交联毒性，最终达到维持机体营养平衡的效果。

4 结论

日粮中添加β-葡萄糖苷酶饲喂婺农土鸡，不同替换比例处理其生长性能及抗氧化性能指标呈正向响应，2/3替换未水解豆粕婺农土鸡的平均日增重和血清SOD活性最高，分别较CK提高12.39%和19.29%，MDA含量最低，较CK降低14.29%。说明，饲喂改良豆粕对促进婺农土鸡生长、提高其抗氧化能力具有一定的促进作用，可作为一种功能饲料饲养婺农土鸡。