通州区妇女高危型HPV感染率及相关因素分析

马俊凤 张然 焦明远

宫颈癌是女性第二常见的恶性肿瘤，发病率仅次于乳腺癌，呈逐年上升并年轻化的趋势。我国宫颈癌每年新发病例13 万多人，约占世界宫颈癌新发病例的1/4，病死率为我国妇女恶性肿瘤首位［1］。因此加强宫颈癌和癌前病变筛查对于降低发病率和改善预后具有重要的临床意义［2］。

多项研究均证实，人乳头状瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）与宫颈癌的病因学联系［3］。目前已发现的HPV 类型约有200 种，其中可感染生殖道约40 种，HPV 分为低危型和高危型，每一型又包含多种HPV 基因型，低危型主要与尖锐湿疣密切相关，高危型主要与宫颈癌前病变及宫颈癌密切相关［4］。近几年有多项针对中国女性HPV 感染的研究［5-7］一致认为，HPV 16、58、52、18、33 为国人常见的高危型别，其中HPV 16 为最常见的感染型别，其他型别在不同人群中的分布有一定差异。

HPV 的流行率及基因型别的分布有地域性差异。有研究显示，中国妇女HPV 感染率为16.1%［8］。北京市2015年的一项报道显示，妇科门诊就诊女性高危型HPV感染率为37.4%，感染的优势基因型别依次为58型（10.5%）、16型（9.2%）、52型（8.2%）［9］。

本研究分析本地区人群高危HPV 的感染率、感染亚型，以及感染的相关危险因素，为本地区女性宫颈病变、宫颈癌的早期筛查及防治提供理论依据。

1 临床资料与方法

1.1 研究对象

本研究选择2017年1月至2018年12月期间在北京市通州区妇幼保健院接受宫颈癌前病变检查的受试者6 103 例，平均年龄为（38.72±12.35）岁。其中5 974 例受试者的问卷为有效问卷，平均年龄为（39.87±10.32）岁。纳入标准：①自愿签署知情同意书；②HPV 分型检测以及TCT 均在本院进行；③无宫颈癌史、子宫切除史及HPV 感染治疗史；④有一个或多个性伴侣，近一年内有性生活史；⑤无糖尿病、自身免疫性疾病、感染性疾病史。排除标准：①病例资料完整度低于85%；②月经期、精神疾病或无法配合完成调查的患者；③有子宫切除史、HPV 感染治疗史；④标本不合格者。本研究经院伦理委员会批准同意。

1.2 研究方法

1.2.1 问卷调查

内容包括但不限于年龄、民族、籍贯、受教育程度、家庭人均收入、饮食习惯、吸烟史、饮酒史、性生活史（是否有避孕措施、性伴侣数量、初次性生活年龄）、分娩次数、阴道感染史、宫颈手术史、性伴侣生殖道感染史、宫颈癌家族遗传史等［10］。

1.2.2 HPV 和液基细胞学检查（thinprep cytology test，TCT）

①标本采集：用无菌棉拭子将宫颈口轻轻擦拭干净，将宫颈刷置于宫颈口轻轻顺时针旋转3～5 周，随后放入已加有细胞保存液的采样管内，拧紧管盖放入4℃冰箱保存。②HPV DNA 提取：按照试剂盒提供的说明书进行。取细胞保存液1 000 μL 于离心管中，转速13 000 r/min，离心半径10 cm，离心5 min。弃掉上清液，于沉淀中加入1 000 μL 生理盐水，振荡混匀，转速13 000 r/min，离心半径10 cm，离心5 min，弃掉上清。于沉淀中加入100 μL 裂解液，振荡混匀，100℃加热10 min，转速13 000 r/min，离心半径10 cm，离心10 min，上清液即为提取完成的核酸。③HPV 荧光PCR 扩增；按照试剂盒说明书配置PCR 反应混合液，将配好的反应液放入荧光PCR 仪中进行扩增。实验室筛查的HPV 基因型有15 种高危型HPV-DNA：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、82 型，和2 种低危型HPVDNA：6+11 型（注：无法单独分型）。液基薄层涂片，烘干、固定，进行巴氏染色，最后封片、送检［10］。

1.3 结果判断

1.3.1 HPV 检测

根据试剂盒操作说明书，Ct 值＜38 为结果阳性，38≤Ct 值＜40 需进行复检，其中至少1 次Ct 值＜40 为结果阳性，Ct 值≥40 为阴性。

1.3.2 宫颈液基细胞学检查

根据宫颈细胞学贝塞斯达报告系统（The Bethesda system，TBS）（2001 修订版）［10-11］进行阴道细胞学分类，见图1。将①或炎症反应判定为阴性；将②③判定为阳性。

图1 依据TBS 进行的阴道细胞学分类Figure 1 Vaginal cytological classification according to TBS

1.4 统计学处理

采用SPSS 26.0 统计软件包进行统计学处理；计数资料以n（%）表示，采用卡方检验；多因素分析采用Logistic回归分析；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV 分型检测结果

2.1.1 不同HPV 亚型感染率

5 974 例受试者中，未感染HPV 者4 024 例（67.36%），感染HPV者1 950例（32.64%），其中1 658例（27.75%）受试者为高危型HPV 感染，292 例（4.89%）受试者为低危型HPV 感染，有202 例受试者为混合型感染。其中感染率较高的亚型包括HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV39、HPV58。见表1。

表1 HPV 亚型检出情况Table 1 Detection of HPV subtypes

2.1.2 高危型HPV 感染相关因素分析

2.1.2.1 高危型HPV 感染与TCT 诊断结果的相关性 经TCT 检查，1 658 例高危型HPV 阳性者中，78.11%诊断为无上皮内病变或恶性病变（NILM），而4 221 例高危型HPV 阴性者中，这一比例达97.80%，两组人群NILM 结果比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。高危型HPV 阳性者中，非典型鳞状细胞异常（ASC，包括ASC-US 和ASC-H）的发生率为15.02%，鳞状上皮内低度病变（LSIL）的发生率为4.22%，鳞状上皮内高度病变（HSIL）的发生率为2.65%，高于高危型HPV 阴性者中的1.90%、0.19%、0.12%，两组人群ASC、LSIL、HSIL 的发生率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 高危型HPV 感染与TCT 诊断结果的相关性［n（%）］Table 2 Relativity of high risk HPV and TCT diagnosis［n（%）］

2.1.2.2 高危型HPV 感染危险因素分析年龄≤35 岁的人群高危型HPV 的感染率明显高于年龄＞35 岁人群，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。受教育程度低的人群感染率高于学历更高的人群，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。随着家庭人均收入的增高，高危型HPV 的感染率有逐渐降低的趋势，三组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。长期食辛辣食物、有吸烟饮酒史、性伴侣数量≥2 个、无避孕措施、有宫颈手术史、阴道感染史以及性伴侣有生殖器感染史的人群，感染高危型HPV 的概率高于未存在这些情况者，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 高危型HPV 感染的危险因素分析［n（%）］Table 3 Analysis of risk factors of high risk HPV infection［n（%）］

2.1.2.3 高危型HPV 感染的多因素Logistic 回归分析 将上述差异有统计学意义（P＜0.05）的因素，作为自变量进行多因素Logistic 回归分析。结果显示，年龄≤35 岁、初中及以下受教育程度，以及阴道感染史是高危型HPV 感染的独立危险因素（P＜0.05）。见表4。

表4 高危型HPV 感染的多因素Logistic 回归分析Table 4 Multivariate logistic regression analysis of high risk HPV infection

3 讨论

宫颈癌是目前威胁我国女性生命健康最主要的恶性病变之一，虽然诊断率和治愈率相较于其他大多数恶性肿瘤较高，但是其发病率和致死率仍然高居妇科恶性肿瘤的前两位［12］。由于宫颈癌的发生和发展是一个由量变到质变的渐变过程，癌变的潜伏期较长，因此提高宫颈癌前病变的筛查率对于降低宫颈癌变的风险具有重要的预防价值［13］。

已有多篇文献报道，HPV 的流行率及基因型别的分布有地域性的差异。北京市2015年的一项报道显示，妇科门诊就诊女性高危型HPV 感染率为37.4%，感染的优势基因型别依次为58 型（10.5%）、16 型（9.2%）、52 型（8.2%）［9］。山东省青岛市的HPV 感染率则为18.90%，主要型别依次为16、52、58、18、31 型［14］。甘肃省妇科门诊就诊女性HPV 感染率为32.75%，其中16、58、52、53 为优势基因型［15］。梁开如等［16］对四川省的一项研究显示，HPV 的感染率为17.27%，感染型别最多的依次是52、16、58 型。而王芬萍等［17］的研究报道认为，上海妇科门诊就诊女性的HPV 感染率为22.45%，以16、52、58、56 基因型为主。

本研究中，高危型HPV感染率为27.75%，排名前六位的基因型分别是HPV16、18、31、33、39、58 型。HPV 感染率及感染的优势基因型出现地域性差异的原因，除样本数量以及调查人群年龄构成的差异外，还可能与不同地区人群的种族遗传特点、生活习惯，以及人口迁移等因素有关。因此，在研究和开发国产HPV 疫苗时，应考虑到目标人群的HPV优势基因型，有针对性地进行疫苗的研制。

多项研究已证实，不同HPV 的型别，其致病能力不同，高危型的HPV 感染甚至影响女性人群的生命安全。梁海燕等［18］的研究显示，在宫颈癌的发生发展中，持续感染高危型HPV 是一个非常重要的作用因素。本研究显示，感染高危型HPV 者，宫颈病变的发生率高于未感染高危型HPV 者。

本研究认为年龄≤35岁、初中及以下受教育程度以及有阴道感染史是感染高危型HPV的独立危险因素（P＜0.05）。年龄≤35岁的女性高感染率或与性行为活跃度高、性伴侣不固定等不良性行为有关。初中及以下受教育程度人群，对HPV 感染缺乏一定的认知，对宫颈癌筛查不够重视，因此感染率更高。存在阴道感染史的人群，阴道内微环境的平衡状态遭到破坏，导致宫颈上皮受损，为HPV 的感染创造有利条件。

综上，本研究通过分析北京市通州区女性人群感染高危型HPV 的情况，建立了本地区女性高危型HPV 感染的分子流行病学资料库，为本地区女性宫颈病变、宫颈癌的早期筛查、诊断及防治提供理论依据，并为选择中国人群（尤其是北京地区）常见高危型HPV 亚型的多价疫苗提供了有效证据。