SOD、DDR1、HIF-1α表达与舌鳞状细胞癌病理特征和预后的关系

王钟华 杨永超 安峰

舌鳞状细胞癌是口腔常见的恶性肿瘤疾病，多见于40 岁以上的男性［1］。该疾病的恶性程度较高，患者预后差，严重威胁患者的身体健康及生命安全。据国内外有关文献报道，超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）、盘状结构域受体1（Disc domain receptor 1，DDR1）和沉默缺氧诱导因子-1α（Silence hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）在鳞状细胞癌组织中呈现高表达，三者与患者疾病的发生发展具有紧密关系［2-3］。本文主要研究SOD、DDR1、HIF-1α表达与舌鳞状细胞癌病理特征、预后的关系，旨在为临床诊疗提供参考。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月至2018年5月河北北方学院附属第一医院收治的118 例舌鳞状细胞癌患者为研究组。纳入标准：①满足舌鳞状细胞癌的诊断标准［4］；②病历资料完整；③术前未行抗肿瘤放化疗等治疗；④肿瘤原发灶蜡块保留完好。排除标准：①有血液或传染性疾病者；②合并其他恶性肿瘤疾病或心、肾等功能异常者；③免疫功能缺陷或精神障碍者；④妊娠期、哺乳期妇女。其中男70 例，女48 例；平均年龄（52.84±6.48）岁；肿瘤TNM 分期：Ⅰ期6例，Ⅱ期36 例，Ⅲ期42 例，Ⅳ期34 例。另选取本院门诊口腔88 例良性疾病患者为对照组，其中男61例，女27 例；平均年龄（51.47±7.12）岁。两组资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经院伦理委员会批准同意，受试者或家属已签署知情同意书。

1.2 SOD、DDR1、HIF-1α 检测方法

兔抗人SOD 抗血清、兔抗人DDR1 多克隆抗体、兔抗人HIF-1α 多克隆抗体、S-P 试剂盒、Trizol试剂（试剂批号：15596-026）、DAB 显色试剂均选自北京中杉金桥生物技术公司。根据S-P 免疫组化染色法对SOD、DDR1、HIF-1α 进行检测，整个实验操作过程严格按照说明进行。

1.3 判定标准

由病理科医师在光学显微镜下随机观察5 个视野，要求每个视野至少计数100 个完整的肿瘤细胞。SOD、DDR1、HIF-1α 阳性判定标准［5-6］：实验结果显示肿瘤细胞细胞质或细胞核中出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性，反之为阴性。阳性细胞比例评分：＜25%为1 分，25%～50%为2 分，＞50%为3分；染色强度评分：未染色为0 分，淡黄色为1 分，棕黄色为2 分，棕褐色为3 分。染色指数=阳性细胞比例评分＋染色强度评分。染色指数＞3 分为阳性；染色指数≤3 分为阴性。阳性率=［阳性例数/总例数］×100%。

1.4 随访

患者出院后均进行为期1年的随访（随访截止时间：2019年5月），随访直至随访期结束，并分析影响患者预后的相关危险因素。

1.5 统计学处理

采用SPSS 22.0 统计软件进行统计分析，计量资料以（±s）表示，采用t检验；计数资料以n（%）表示，采用χ2检验；采用Logistic 回归模型分析影响舌鳞状细胞癌患者预后的相关危险因素；以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组SOD、DDR1、HIF-1α 表达情况比较

研究组SOD、DDR1、HIF-1α 阳性率高于照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1、图1。

图1 不同组织中SOD、DDR1、HIF-1α 表达情况（SP，×400）Figure 1 Expression of SOD，DDR1，and HIF-1α in different tissues（SP，×400）

表1 两组SOD、DDR1、HIF-1α 表达情况比较［n（%）］Table 1 Comparison of SOD，DDR1，and HIF-1α expression between the two groups［n（%）］

2.2 舌鳞状细胞癌组织中SOD、DDR1、HIF-1α 表达与病理特征的关系分析

SOD、DDR1、HIF-1α阳性患者的组织分化程度、瘤体直径、淋巴结转移、TNM 分期、浸润深度均高于阴性患者，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 分析舌鳞状细胞癌组织中SOD、DDR1、HIF-1α 表达与病理特征的关系［n（%）］Table 2 Analysis of the relationship between the expression of SOD，DDR1，and HIF-1α and pathological characteristics in tongue squamous cell carcinoma［n（%）］

2.3 生存组、死亡组SOD、DDR1、HIF-1α 表达情况比较

随访结束，患者存活71 例（60.17%）。死亡组SOD、DDR1、HIF-1α 阳性率较生存组高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 生存组、死亡组SOD、DDR1、HIF-1α 表达情况比较［n（%）］Table 3 Comparison of SOD，DDR1 and HIF-1α expression in survival group and death group［n（%）］

2.4 影响舌鳞状细胞癌患者预后的相关因素分析

组织分化程度、淋巴结转移、TNM 分期、浸润深度及SOD、DDR1、HIF-1α 高表达为影响舌鳞状细胞癌患者预后的相关危险因素（P＜0.05）。见表4。

表4 影响舌鳞状细胞癌患者预后的相关因素分析Table 4 Analysis of related factors affecting the prognosis of patients with tongue squamous cell carcinoma

3 讨论

口腔癌是人类常见癌症之一，其死亡率约占癌症总死亡率的2%，而口腔癌中又以舌鳞状细胞癌发病最高［7］。相关研究发现，舌鳞状细胞癌作为常见的口腔恶性肿瘤，具有发病率高、侵袭能力强的特点，也是导致临床治疗困难，患者预后差的主要原因［8-9］。研究发现，舌鳞状细胞癌的发生、发展是许多蛋白基因及细胞因子共同作用的结果，故开发舌鳞状细胞癌早期诊断的标记物成为目前治疗舌鳞状细胞癌研究的方向［10］。

国内外研究证实，缺氧与舌鳞状细胞癌的生长、侵袭、转移等生物学关系具有紧密联系，其中HIF-1α 作为缺氧应激的关键因子，与肿瘤的发生、发展密切相关［11］。本文研究结果中，舌鳞状细胞癌组织中的HIF-1α 阳性表达率显著高于正常口腔粘膜标本，说明HIF-1α 在舌鳞状细胞癌患者机体中呈现高表达状态，这与既往文献报道结果相一致［12］。同时，本研究结果显示HIF-1α 在死亡组患者的阳性表达率高于生存组患者，说明HIF-1α 的高表达与患者的不良预后有关。

DDR1 作为一种受体型蛋白酪氨酸激酶，广泛存在于人体各大组织器官中。DDR1 通过与胶原基质相互作用进行激活，使自身磷酸化，影响肿瘤细胞的信号传导，参与肿瘤的生长、增殖及转化等［13］。本文结果示，舌鳞状细胞癌中DDR1 的阳性表达率高于正常黏膜组织，死亡组中DDR1 的阳性表达率高于生存组，提示DDR1 的表达与舌鳞状细胞癌的发生、发展存在联系。

相关文献报道，SOD 作为机体内的主要氧自由基清除物，其表达的变化影响着肿瘤内氧自由基的消长，与肿瘤的疾病发生发展及治疗密切相关［14-15］。本文研究结果显示，研究组患者的SOD 阳性表达率高于对照组，说明在舌鳞状细胞癌患者中SOD 水平较高，且通过文中死亡组患者的SOD 阳性表达高于生存组可得知，SOD的表达与患者的预后有关。

本文研究中，SOD、DDR1、HIF-1α 阳性患者的组织分化程度、瘤体直径、淋巴结转移情况、TNM分期、浸润深度均高于SOD、DDR1、HIF-1α 阴性患者。经Logistic回归模型分析得出组织分化程度、淋巴结转移、TNM 分期、浸润深度及SOD、DDR1、HIF-1α 高表达为影响舌鳞状细胞癌患者预后的相关危险因素，提示临床治疗中需加强对伴随高危因素患者的干预，在治疗后进行针对性预防有利于改善患者预后，提高患者生存时限。

综上所述，SOD、DDR1、HIF-1α 三者在舌鳞状细胞癌中的阳性表达率高于正常口腔粘膜，可为作为舌鳞状细胞癌患者病情预后有效评估指标。