六种杀菌剂对哈茨木霉菌丝生长影响研究

曹秀荣 董照锋 任岗 熊潇垚 鹏 徐艳

摘   要   哈茨木霉极易侵染香菇、平菇、双孢菇、杏鲍菇、茶树菇、毛木耳、灵芝等多种食用菌的培养基质、菌种、菌丝和子实体，造成减产甚至绝收。采用菌丝生长速率法分别测定戊唑醇、枯草芽孢杆菌、四霉素、春雷霉素、多抗霉素、多菌灵对哈茨木霉菌丝的抑制作用。结果表明，戊唑醇抑制作用最强，其次是枯草芽孢杆菌、多菌灵和四霉素，春雷霉素和多抗霉素抑制作用相对较弱。故而戊唑醇和枯草芽孢杆菌不能与哈茨木霉混合使用，多菌灵和四霉素不建议与哈茨木霉混合使用，春雷霉素和多抗霉素可与哈茨木霉联合使用以增强防效。戊唑醇、枯草芽孢杆菌、多菌灵和四霉素对哈茨木霉抑制作用明显，可就其对木霉病害防治展开进一步研究。

关键词   杀菌剂;哈茨木霉;抑菌率

木霉（Trichoderma spp.） 是广泛分布于土壤、植物殘体、植物根围和叶围、海洋以及空气等环境中的一类真菌，对多种细菌和病原真菌有拮抗作用，已被作为生防制剂广泛应用于农业生产。但木霉也因具有适应性强、繁殖速度快、为害期长等特性，极易侵染香菇、平菇、双孢菇、杏鲍菇、茶树菇、毛木耳和灵芝等多种食用菌的培养基质、菌种、菌丝和子实体，造成减产甚至绝收，为食用菌生产中的第一大竞争性杂菌。其中，绿色木霉（Trichoderma viride）与哈茨木霉（Trichoderma harzianum）是相对优势菌种。

我们研究了戊唑醇、枯草芽孢杆菌、四霉素、春雷霉素、多抗霉素、多菌灵6种杀菌剂对哈茨木霉菌丝生长的影响，以期为哈茨木霉作为生防菌应用于农业生产时如何协调与生物防治、化学防治的矛盾，以及其作为食用菌生产中的竞争性杂菌时如何选择防治药剂提供 参考。

1   材料与方法

1.1   试验材料

1）供试药剂。430 g/L戊唑醇悬浮剂，盐城利民农化有限公司生产;100亿芽孢/g枯草芽孢杆菌粉剂，陕西绿顿作物科技有限公司生产;0.15%四霉素水剂，辽宁微科生物工程股份有限公司生产;2%春雷霉素水剂，绩溪农华生物科技有限公司生产;3%多抗霉素水剂，绩溪农华生物科技有限公司生产;40%多菌灵悬浮剂，江苏剑牌农化股份有限公司。以上材料均为市售。

2）供试培养基。马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：无菌水1 000 mL，马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂15 g。

3）供试菌种。供试的哈茨木霉菌株（Trichoderma harzianum），来源于2021年3月3日从商洛盛泽农林科技发展有限公司香菇基地采回的染病香菇菌棒，经实验室分离鉴定后，接种到PDA试管斜面培养基，于4 ℃条件下保存。

1.2   试验方法

1）试验设计。采用菌丝生长速率法，测定6种供试药剂对哈茨木霉菌丝的抑制作用。试验设7个处理，每个处理4次重复，各处理浓度依据使用说明推荐用量确定，无菌水作对照。如表1所示。

2）含药PDA平板制备。将供试药剂用灭菌水稀释至设计浓度的10倍，编号后备用。取6 mL稀释好的药液注入100 mL经过灭菌处理的烧杯中，再加入经高压蒸汽灭菌并冷却至50 ℃左右的PDA培养基54 mL，充分混匀，制成60 mL设计浓度的含药培养基（为防止培养基过快冷凝而影响试验进程，每个处理多配制20 mL），然后取10 mL注入经过灭菌处理的9 cm培养皿中，制成试验设计浓度的PDA平板。以无菌水替代药液，同上述方法制作空白对照。

3）菌丝接种。将哈茨木霉菌接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基，在温度28 ℃、湿度90%条件下培养4天，活化菌种。在一培养皿内菌落生长均匀、旺盛的同一半径处用打孔器制作直径6 mm的菌饼，用接种针挑取菌饼正面向下转接种到各处理PDA平板培养基中心位置，置于温度28 ℃、湿度90%条件下培养，分别于48小时、72小时、96小时用十字交叉法测量各皿菌落直径，并按下试计算菌丝生长抑制率：

2   结果与分析

从表2、图1可知：依据使用说明推荐的田间剂量浓度下，6种杀菌剂对哈茨木霉菌丝96小时抑制率由大到小排序为：戊唑醇>枯草芽孢杆菌>四霉素>多菌灵>春雷霉素>多抗霉素。戊唑醇抑制效果最好，48小时、72小时、96小时抑制率均达到98%以上，呈逐渐增大趋势;枯草芽孢杆菌抑制率略低于戊唑醇，48小时、72小时、96小时抑制率均达到92%以上，72小时达到最高，72～96小时基本稳定;春雷霉素和多抗霉素48小时、72小时、96小时抑制率均低于20%，96小时抑制率分别为6.3%和4.4%;多菌灵和四霉素抑制率处于中等水平，96小时抑制率分别为58.4%和50.1%。

3   小结与讨论

试验结果表明，在推荐的田间剂量下，春雷霉素和多抗霉素对哈茨木霉菌菌丝生长抑制作用较小，96小时抑制率分别为6.3%、4.4%;四霉素和多菌灵对哈茨木霉菌丝96小时抑制率分别为58.4%、50.1%，抑制作用明显;戊唑醇和枯草芽孢杆菌对哈茨木霉菌丝有显著的抑制作用，96小时抑制率分别达到99.4%、94.6%。

由以上结果得出，6种杀菌剂中，能与哈茨木霉配伍，增强防治效果的药剂为春雷霉素和多抗霉素，不建议与哈茨木霉配伍的药剂为四霉素和多菌灵，坚决禁止与哈茨木霉配伍的药剂为戊唑醇和枯草芽孢杆菌。由于戊唑醇和枯草芽孢杆菌对哈茨木霉抑制作用显著，可在进一步研究其对食用菌菌丝生长影响的基础上，确定其可否适用于食用菌木霉病害防治。

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