临床联合检测降钙素原于白细胞总数在小儿肺炎诊断中的应用价值

柳建强 张敏强

山东省平度市第五人民医院，山东 青岛 266742

小儿肺炎是我国婴幼儿常见的呼吸道疾病之一，多发生于冬春寒冷季节及气候骤变时，但夏季并不例外。甚至有些华南地区反而在夏天发病较多。患病后免疫力不持久，容易再受感染。引起小儿肺炎的病原体主要有细菌、病毒和肺炎支原体，按病理形态的改变可分为一般支气管肺炎和间质性支气管肺炎两类。前者多由细菌所致，后者则以病毒为主，临床上常笼统地诊断为支气管肺炎。近年来确定病原体的可能性日渐增加，不同病原体的临床表现也各有其特点。随着人员流动性加强，抗生素滥用等诸多因素，近年来小儿肺炎发病率有不断增高的趋势，是发展中国家尤其是相对贫穷的国家或地区小儿死亡的主要原因。另外，在治疗上，引起小儿肺炎的病原体不同，对药物的敏感性也截然不同。因此，准确及时辨别患儿肺炎的类型，对指导临床医生正确及时选择用药至关重要，这将直接影响到患儿的治疗效果，尤其是对重症支气管肺炎应争取做出病原体诊断，及时合理应用抗生素，有效降低病死率，同时，也能有效防范滥用抗生素。我们观察我院在2018年10月至2019年10月一年内收治的184例小儿肺炎患者检测降钙素原和白细胞总数的数据，提示检测血浆降钙素原浓度结合白细胞总数水平，能帮助儿科临床医生对小儿肺炎患者病情作出准确及时诊断。现将分析结果报道如下。

1 资料和方法

1.1 临床资料 通过收集2018年10月－2019年10月期间我院收治婴幼儿并且最终确诊为小儿肺炎264例，其中确诊为细菌性肺炎102例，男孩54例，女孩48例，月龄1～32个月不等，住院日期4～10天不等；最终确诊支原体肺炎52例，男孩27例，女孩25例，月龄1～33个月不等，住院日期3～8天不等；最终确诊病毒性肺炎患儿110例，男孩56例，女孩54例，月龄1～31个月不等，住院日期2～9天不等。所有患儿相关诊断大部分符合参考文献的标准，其中发热者189例，伴有咳嗽者162例，有气促症状者75例，呼吸困难者26例，重症者5例。以上患儿采集末梢血104例，采集静脉血160例。

其中大部分细菌性肺炎患儿痰培养或支气管分泌物培养致病菌呈阳性；诊断为支原体肺炎患儿其肺炎支原体抗体(胶体金法)均呈阳性；而诊断为病毒性肺炎患儿血浆学检查以及病毒抗原检测均为阳性。本研究所选择的健康对照群体80例，均取自我院同时期儿保科免费体检婴幼儿，其中男孩38例，女孩42例，月龄1～30个月不等，考虑家长可接受情况，健康查体幼儿均采集末梢血。以上各群组在性别与年龄构成比较均无明显统计学意义上的差异(P＞0.05)。

1.2 方法 所有住院患儿采集清晨空腹末梢静脉血0.5毫升或者清晨空腹静脉血2毫升，健康对照组则采随机末梢血0.5毫升，采血过程严格按照采血规范执行。冬季气温较低时，嘱患儿保暖后采末梢血。采血部位优先选择左手中指或无名指指端内侧，婴幼儿也可选大母趾及足底内外侧缘，使用专用采血针，穿刺深度2～3毫米，切忌用力挤压[2]，末梢血采血后立即打入EDTA抗凝管并轻轻敲击管壁混匀6～8次。静脉采血通常采用肘部静脉，婴幼儿可以采用颈外静脉，使用EDTA真空管准确吸取静脉血2毫升，采血后立即颠倒混匀6～8次。血液样本在采血后2小时内完成检测。

实验检测顺序如下:首先混匀检测白细胞计数，然后将剩余标本3000转每分钟进行高速离心得到血浆，用血浆检测降钙素原浓度。

测定白细胞总数采用日本Sysmex公司的XN－550全自动五分类血细胞分析仪，使用原装配套试剂测定，该设备在检测白细胞通道中使用半导体激光得到侧向荧光和侧向散射光来对白细胞进行五分类，在试剂中的表面活性剂可溶解或破坏红细胞和血小板，并在白细胞的细胞膜上打出小孔，使得试剂中的聚次甲基染料可以进入白细胞内与核酸及细胞器结合，经633纳米的激光照射，所产生的荧光强度与细胞核酸含量成一定比例。该设备是目前对白细胞计数最先进的方法之一，同时为了保证检测数据的准确性，我们每天坚持做室内质控，所有室内质控均在控。婴幼儿白细胞总数正常值上限为12×109/L，白细胞总数超过12×109/L被认为阳性。

降钙素原检测采用胶体金免疫层析法，应用北京乐普全自动免疫层析分析仪，所用试剂由北京乐普医疗科技有限责任公司提供，检测试纸采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术，将定量测试标本滴入试剂盒加样空，样本中的降钙素原与预先包被在聚氨酯膜上的荧光标记的降钙素原单克隆抗体结合，结合物在毛细效应下向上层析，随后与被固定在膜上的测试区降钙素原的单克隆抗体结合捕获，从而在测试区右荧光物质聚集。通过仪器可以检测出荧光强度，其荧光强度与血浆降钙素原浓度成正比。该设备运行稳定，测试试纸自带质控区，结果可靠。婴幼儿降钙素原正常值上限为2ng/m L，血浆降钙素原超过2ng/m L被认为阳性。

另外，静脉血和末梢血在同一个体采血可能检测结果存在差异，但是这种差异不影响个体间的检测结果比较。所以我们在研究过程中没有对静脉血和末梢血的结果进行单独评价。

1.3 统计学方法 本研究的实验数据采用SPSS 13.0统计软件来分析，比较方法采用t检验，以P＜0.05考虑差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组降钙素原检测结果和白细胞总数比较 经过对各患儿组的检测结果进行比较，我们发现临床诊断为细菌性肺炎的患儿其降钙素原水平及白细胞总数明显高于临床诊断为支原体肺炎和病毒性肺炎的患儿以及儿保科健康查体的婴幼儿对照组，(P＜0.05)其差异均有统计学意义。而临床诊断为支原体肺炎患儿降钙素原水平也明显高于诊断为病毒性肺炎患儿和儿保科健康查体婴幼儿，(P＜0.05)其差异具有统计学意义。而白细胞总数在诊断为病毒性肺炎患儿和同期儿保科健康查体婴幼儿对照之间比较(P＞0.05)差异无统计学意义。见表格1。

表1 各组降钙素原检测结果与白细胞总数比较(±s)

表1 各组降钙素原检测结果与白细胞总数比较(±s)

注:与儿保科健康查体比较，a P＜0.05；与病毒性肺炎患儿比较，b P＜0.05；与支原体肺炎患儿比较，c P＜0.05。

组别 例数 降钙素原(ng/m L) 白细胞总数(×109/L)健康查体幼儿 80 4.51±1.89 8.96±3.85细菌性肺炎患儿 102 2.56±1.52 14.25±4.17支原体肺炎患儿 52 1.86±1.02 9.25±4.28病毒性肺炎患儿 110 1.06±0.62 8.87±4.19

2.2 各组降钙素原阳性率及白细胞总数阳性率比较经过对各患儿组的检测结果进行比较，我们发现临床诊断为细菌性肺炎的患儿降钙素原和白细胞总数阳性率均显著高于诊断为病毒性肺炎和支原体肺炎的患儿以及儿保科健康查体婴幼儿，认为差异(P＜0.05)均具有统计学意义。而诊断为支原体肺炎患儿降钙素原阳性率明显高于诊断为病毒性肺炎患儿及儿保科健康查体对照组。而在白细胞总数阳性率方面，诊断为病毒性肺炎和支原体肺炎患儿及儿保科健康查体婴幼儿相比较，其差异(P＞0.05)均无统计学意义。见表格2。

表2 各组白细胞总数和降钙素原阳性率比较[例(%)]

3 讨 论

血浆降钙素原是一种脓毒症诱导蛋白，它是无激素活性的降钙素前肽物质，由116个氨基酸组成，分子量约为12.7k D.降钙素原由神经内分泌细胞(包括甲状腺，肺和胰腺组织的C细胞)表达，它可被特殊的蛋白酶分解成3部分。羧基末端21个氨基酸多肽的抗钙素，位于中央的33个氨基酸多肽的非成熟降钙素和1个氨基末端的57个氨基酸多肽的降钙素。降钙素原的血浆浓度在健康个体非常低，半衰期为25～30h，在体内外稳定性很好。由于其在体外拥有良好的稳定性，因此极便于检测。血浆降钙素原主要是由甲状腺C细胞进行分泌的，因为其在正常的情况下不会释放进人体的血液中，因此在健康人的血浆中降钙素原的含量非常小，一般是低于0.1ug/ml，所以一般是不会被检验出来的。在细菌性感染时，细菌内部的毒素正是诱导血浆降钙素原产生的最主要的刺激因子，只要人体中有细菌内毒素的释放，则必然导致血液中血浆降钙素原的浓度升高。降钙素原选择性升高，并与感染的严重程度成正比；而在病毒性肺炎时，则保持较低水平。

据研究国内外大量的临床资料显示，血浆降钙素原在人体全身发生炎症早期的2小时左右就会升高，因此为早期的诊断能够提供可靠、有效的帮助[3]。并且在病毒性的感染、慢性非特异性炎症、自身免疫性疾病发生时，统计的结果是血浆降钙素原的浓度不会增加或者是轻微的增加，这说明只有当细菌内的毒素释放引起了感染后血浆降钙素原的浓度才会增加。

血常规检测中的白细胞总数是临床上判断细菌性感染存在的传统指标，但是其易受日间变化、年龄、性别、药物治疗等因素的影响[4]。有专业人士观察研究[5][6]白细胞总数检测在诊断小儿肺炎中的应用价值，作者指出支原体肺炎患儿白细胞总数升高变化不大，但是单核细胞及中性粒细胞的比例和绝对值有所升高而淋巴相对降低，提示这种变化应该有助于临床医师对患儿支原体肺炎的诊断。对比本次研究结果提示，在白细胞总数方面细菌性肺炎患儿组明显高于其他各患儿组，其差异(P＜0.05)具有统计学意义，而观察比较其他各组的白细胞总数水平其差异(P＞0.05)均提示无统计学意义。

通过观察本次研究结果，诊断为细菌性肺炎患儿的降钙素原浓度水平和阳性率明显高于诊断为病毒性肺炎、支原体肺炎的患儿及儿保科健康查体对照，其差异(P＜0.05)均具有统计学意义；而诊断为支原体肺炎患儿的降钙素原浓度水平均略高于诊断为病毒性肺炎患儿及儿保科健康查体婴幼儿对照(P＜0.05)，提示通过对降钙素原的检测结果结合白细胞总数检测综合分析能够帮助对小儿细菌性肺炎、病毒性肺炎、支原体肺炎进一步做出鉴别诊断。

综上所述，通过对降钙素原及白细胞总数检测有助于临床医生对小儿肺炎作出早诊断诊断、早治疗，合理选择抗生素，有利于患儿早日康复，同时能有效减少滥用抗生素，降低细菌耐药性的发生。