肃州区羊布鲁氏杆菌病流行调查及分析

文│马昊杰（甘肃省酒泉市肃州区下河清镇农业农村综合服务中心）

甘肃省酒泉市肃州区畜牧业发展迅速，其中牛羊养殖已成为当地畜牧业支柱性产业，近年来肃州区部分羊场疑似布鲁氏杆菌病感染引发母羊流产的案例逐渐增多，相关部门曾采集血清样品进行检测，发现为布鲁氏杆菌抗体阳性，说明是布鲁氏杆菌病导致该地区母羊流产的原因之一。

布鲁氏杆菌病是由马耳他布鲁氏杆菌（B.melitensis）感染所引起的，马耳他布鲁氏杆菌为重要的人畜共患性病原，可感染多种动物，包括牛、羊和猪等，引发严重的临床症状，其中包括流产不孕、子宫内膜炎和关节炎等，对人畜健康造成较大的威胁。当前，仅加拿大、日本和欧洲部分国家成功净化该病。目前布鲁氏杆菌病仍然在我国呈地方性流行，尤其是在一些牛羊等草食动物养殖业发达的省份或地区。有研究表明，虽然当前我国牛、羊个体布鲁氏杆菌病阳性率分别为3.1%和3.3%，但群体阳性率高达29%和34%，由于羊布鲁氏杆菌是人感染该病的主要来源，因此对布鲁氏杆菌病的防控和净化尤为重要。

当前，对于布鲁氏杆菌病的诊断方法主要包括试管凝集试验、虎红平板凝集试验和补体结合试验等，该类检测方法均存在操作简便和诊断便捷等特点，十分适合临床大规模样品的检测。本研究于2020——2021年从酒泉市肃州区部分羊场采集血清样品1543份，用于布鲁氏杆菌抗体检测，旨在了解近年来羊布鲁氏杆菌病在肃州区的流行情况，以期为该病的防控提供数据参考。

一、材料与方法

1.血清样品采集。2020——2021年从肃州区部分乡镇的18个羊场共采集外表健康羊群血清样品1543份，用于布鲁氏杆菌病抗体检测，其中2020年和2021年采集血清样品数量分别为750份和793份。采血方式为颈静脉采血（3～4毫升/头），室温静置4～6小时取上清，其后经低速（3000转）离心5分钟，取上清置于1.5毫升离心管，标记采样时间、地点等信息，其后将样品保存于4℃待检。

2.检测方法。首先采用虎红平板凝集试验对1543份血清样品进行初步检测，其后将阳性样品再通过试管凝集试验进行复核，以统计被检测样品布鲁氏杆菌病的阳性率。

虎红平板凝集试验：将被检测血清（30微升）和虎红平板凝集抗原（30微升）充分混匀后滴加在灭菌的玻璃板上，同时设置阴性和阳性对照。混匀4分钟内若出现肉眼可见的凝集现象则判定为布鲁氏杆菌抗体阳性，若无凝集现象则为阴性。

试管凝集试验：将虎红平板凝集试验初筛为阳性血清样品，以1∶5、1∶25、1∶50和1∶100梯度稀释后，加入等体积的抗原，并设置阴性和阳性对照。将试验样品、阴性和阳性对照及比浊管置于37℃恒温箱内24小时，参照国家标准GB/T18646/2002动物布鲁氏杆菌诊断技术，根据各试管液体清亮程度判断结果。

二、结果

1.肃州区不同地区羊布鲁氏杆菌病感染情况调查结果。为初步了解肃州区羊布鲁氏杆菌病感染情况，试验从肃州区部分地区18个羊场共采集1543份血清样品用于布鲁氏杆菌抗体检测。结果发现，共37份血清样品为布鲁氏杆菌抗体阳性，平均检出率为2.4%；不同乡镇来源样品布鲁氏杆菌病阳性率存在差异，其中乡镇4来源样品的阳性率最高为3.44%，乡镇1-3阳性率分别为1.42%、2.84%和1.79%（表1）。

表1 肃州区不同地区羊布鲁氏杆菌病感染情况调查结果

2.肃州区不同年份及品种羊布鲁氏杆菌病感染情况调查结果。研究于2020年和2021年采集血清样品数量分别为750份和793份，检测结果发现2020年来源样品布鲁氏杆菌病检出率高于2021年，分别为2.93%和1.89%（表2）；此外，研究采集的780份、320份和443份血清样品分别来自小尾寒羊、湖羊和高山细毛羊，检测结果发现小尾寒羊布鲁氏杆菌检出率最高为3.85%，湖羊和高山细毛羊检出率分别为1.56%和0.45%。

表2 肃州区不同时期羊布鲁氏杆菌病感染情况调查结果

3.不同饲养模式羊群布鲁氏杆菌病感染情况调查结果。如表3所示，试验采集样品来源羊场分为自繁自养和半自繁自养（部分羊群外购），采集样品数量分别为864份和679份，其中分别有10份和27份样品检测为布鲁氏杆菌抗体阳性，其平均阳性率为1.16%和3.98%。此外，部分半自繁自养羊场外购羊群时不检测布鲁氏杆菌抗体，该类羊场来源样品的布鲁氏杆菌抗体阳性率高达5.29（19/359），而外购前检测布鲁氏杆菌抗体羊场来源样品的阳性率稍低，为2.5%（8/320）。

表3 不同饲养模式羊群布鲁氏杆菌病感染情况调查结果

三、讨论

布鲁氏杆菌属于人畜共患性病原，其感染人类后可导致严重的临床症状，其中包括关节炎和繁殖障碍（流产、死胎等）；同时该病原亦可感染多种动物，如牛、羊等。因此，布鲁氏杆菌的流行对畜牧业发展、相关养殖人员和消费者健康均可造成较大的威胁。虽然近年来政府相关部门花费大量人力和物力用于布鲁氏杆菌病的防控或净化，但目前羊布鲁氏杆菌在我国不同地区仍然广泛流行。据相关文献报道，2014年甘肃省羊布鲁氏杆菌病平均检出率为4.13%，其中武威市和张掖市部分地区检出率分别高达11.34%和24.5%；而王耀东等调查结果发现甘肃省临泽县牛羊布鲁氏杆菌病检出率均低于1%。本次研究结果表明，2020——2021年酒泉市肃州区部分羊场布鲁氏杆菌病平均检出率为2.4%（37/1543），其结果高于董新燕于2016——2018年对肃州区羊布鲁氏杆菌病流行情况的调查结果（0.22%，7/3203），这可能与检测样品数量、样品来源等有关，但这也说明近年来肃州区羊布鲁氏杆菌病流行趋势较为严峻，相关养殖户和部门应提高警惕。

经统计发现，被调查的4个乡镇均存在布鲁氏杆菌病阳性羊群，说明该病在肃州区广泛流行，这无疑对肃州区牛羊养殖业和相关从业人员健康可能造成较大的威胁。值得注意的是，2020年样品较2021年样品检出率高，这可能是由于2020年及时对养殖户反馈检测数据，提高了其对该病的防控意识，使得该病在2021年流行率有所降低，但仍然未达到净化的水平。

随着肃州区羊养殖业快速发展，部分养殖场会外购羊群以提高存栏量或进行育肥，但其中个别养殖场在外购羊群时忽略相关疾病的检测，导致病原进入羊场使得疾病迅速流行，给羊场造成巨大的经济损失。本研究结果发现自繁自养养殖场布鲁氏杆菌检出率显著低于外购羊群养殖场，而且外购羊群不进行疾病监测的养殖场样品布鲁氏杆菌病检出率高于进行疾病监测的养殖场；此外，不同品种中以小尾寒羊布鲁氏杆菌病阳性率最高，这可能是由于大部分养殖场外购羊品种为小尾寒羊，而湖羊和高山细毛羊阳性率相对较低，这也再次提示自繁自养可有效防控布鲁氏杆菌病的流行，而且外购羊群前进行疾病监测是十分重要的。