水栀子醋酸乙酯部位化学成分研究

曹彦刚，任英杰，郝志友，

张艳丽1,2，刘晏灵1,2，王梦娜1,2，郑晓珂1,2，冯卫生1,2*

1河南中医药大学药学院；2河南省中药开发工程技术研究中心，郑州 450046

茜草科Rubiaceae栀子属Gardenia植物全球约有250种，广泛分布于东半球的热带和亚热带地区[1]。水栀子Gardeniajasminoidesvar.radicans为多年生灌木，主要分布于我国江西、河南、湖南、湖北等省区[2]。水栀子又名伏尸栀子，因其含有大量的栀子黄色素而常被作为提取色素的原料，在民间，其根、果实可以入药，外用可以治疗跌打扭伤，内服具有清热凉血、镇静止痛、疏风解湿的功效[3]。目前，对于水栀子化学成分及其药理活性报道较少，现有研究表明，水栀子主要含有环烯醚萜苷类、三萜类、二萜类、香豆素类等化学成分[3,4]。为进一步探寻水栀子中所含的活性成分，为开发利用其植物资源奠定基础，本课题对水栀子醋酸乙酯部位进行了系统地化学成分研究，并从中分离得到17个化合物，其中包括黄酮类化合物6个，木脂素类化合物4个，简单苯丙素类化合物4个，其它类化合物3个。查阅文献发现，栀子提取物及其有效成分具有较好的降糖活性[5,6]，而水栀子作为栀子的变种，其在遗传多样性、化学成分及药理活性方面与栀子差异不大[3]。因此，本研究采用体外α-葡萄糖苷酶抑制活性实验对所得化合物进行降糖活性筛选，以期阐明水栀子降糖活性的药效物质基础，为进一步开发利用其药用价值提供理论支撑。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

Bruker AVANCE Ⅲ 500型核磁共振仪(德国Bruker公司)；N-1100型旋转蒸发仪、A-1000S型水流抽气机、CA-1116A型冷却水循环装置(上海爱朗仪器有限公司)；赛谱锐思LC50型高压制备液相色谱仪(赛谱锐思北京科技有限公司)；YMC-Pack ODS-A色谱柱(250 mm×10 mm，5 μm)(日本YMC有限公司)；柱层析填料MCI gel CHP-20(日本Mitsubishi公司)；Sephadex LH-20(瑞典Parmacia Biotech公司)；柱层析硅胶H(160～200目)、薄层层析硅胶(颗粒范围10～40 μm)(青岛海洋化工厂)；色谱甲醇(天津四友精细化学品有限公司)；色谱乙腈(美国天地公司)；其它试剂均为分析纯或优级纯；α-葡萄糖苷酶、4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷、阿卡波糖(上海源叶生物科技有限公司)；PBS缓冲液(北京索莱宝科技有限公司)。

水栀子于2016年1月采自河南省唐河县，并经河南中医药大学陈随清教授鉴定为茜草科水栀子(Gardeniajasminoidesvar.radicans)的干燥成熟果实，药材标本(编号：20160109)存放于河南中医药大学中药化学实验室。

1.2 提取与分离

水栀子(9.8 kg)粉碎后用50%含水丙酮组织破碎提取三次，过滤，合并提取液，45 ℃减压浓缩得到总浸膏2.3 kg。浸膏加8 L水混悬，依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯、水饱和的正丁醇萃取5次，分别回收溶剂后得到石油醚部位(104.8 g)，乙酸乙酯部位(199.1 g)，正丁醇部位(650.2 g)。乙酸乙酯部位经硅胶柱，二氯甲烷-甲醇(100∶0～0∶100)梯度洗脱，薄层检识合并后得到8个流分A1～A8。

A3(34.2 g)经硅胶柱，石油醚-丙酮(100∶1→1∶1)梯度洗脱，得到10个流分段A3-1～A3-10。A3-3(120.5 mg)经制备液相(63%甲醇-水)纯化后得化合物15(34.2 mg，tR=19.5 min)。A3-9(1.3 g)经Toyopearl HW-40C柱(甲醇)得到5个流分A3-9-1～A3-9-5。A3-9-5(40.1 mg)经制备液相(35%甲醇-水)纯化后得到化合物10(4.67 mg，tR=23.6 min)。A3-10(3.7 g)经Sephadex LH-20柱(70%甲醇-水)得到4个流分A3-10-1～A3-10-4。A3-10-2(38.8 mg)经制备液相(50%甲醇-水)纯化得到化合物9(2.6 mg，tR=28.7 min)。A3-10-3(71.3 mg)经制备液相(48%甲醇-水)纯化得到化合物2(6.6 mg，tR=20.3 min)。A3-10-4(204.9 mg)经制备液相(45%甲醇-水)纯化得到化合物7(4.4 mg，tR=37.9 min)、8(3.5 mg，tR=29.8 min)。

A4(21.0 g)经MCI gel CHP-20柱，甲醇-水(10∶90→100∶0)梯度洗脱得到6个流分A4-1～A4-6。A4-1(12.6 g)经ODS中压柱，甲醇-水(30%→100%)梯度洗脱，得到4个流分A4-1-1～A4-1-4。A4-1-1(7.5 g)再经ODS中压柱，甲醇-水(10%→100%)梯度洗脱，得到15个流分A4-1-1-1～A4-1-1-15。A4-1-1-5(213.1 mg)经Toyopearl HW-40C柱(30%甲醇-水)得到7个流分A4-1-1-5-1～A4-1-1-5-7。A4-1-1-5-4(16.7 mg)经制备液相(30%甲醇-水)得到化合物16(5.5 mg，tR=23.0 min)。A4-2(2.1 g)经ODS中压柱，甲醇-水(10%→100%)梯度洗脱，得到12个流分A4-2-1～A4-2-12。A4-2-7(225.5 mg)经制备液相(32%乙腈-水)得到化合物1(14.6 mg，tR=28.6 min)。A4-2-9(262.5 mg)经硅胶柱(二氯甲烷-甲醇32∶1)得到化合物3(4.6 mg)。

A6(69.3 g)经MCI gel CHP-20柱，甲醇-水(10%→100%)梯度洗脱得到5个流分A6-1～A6-5。A6-2(4.9 g)经ODS中压柱，甲醇-水(10%→100%)梯度洗脱，得到7个流分A6-2-1～A6-2-7。A6-2-3(730.5 mg)经Sephadex LH-20柱(70%甲醇-水)得到2个流分A6-2-3-1和A6-2-3-2。A6-2-3-1(308.3 mg)经制备液相(35%甲醇-水)纯化后得到化合物14(2.7 mg，tR=12.8 min)。A6-2-3-2(139.6 mg)经制备液相(35%甲醇-水)纯化后得到化合物13(2.2 mg，tR=18.6 min)。A6-2-6(940.9 mg)经硅胶柱(二氯甲烷-甲醇12∶1)得到4个流分A6-2-6-1～A6-2-6-4。A6-2-6-4(53.5 mg)经制备液相(44%甲醇-水)纯化后得到化合物4(8.4 mg，tR=23.4 min)。A6-3(10.6 g)经ODS中压柱，甲醇-水(10%→100%)梯度洗脱，得到9个流分A6-3-1～A6-3-9。A6-3-3(6.6 g)经硅胶柱，二氯甲烷-甲醇(32∶1～1∶1)梯度洗脱，得到5个流分A6-3-3-1～A6-3-3-5。A6-3-3-1(99.6 mg)经制备液相(45%甲醇-水)得到化合物12(3.5 mg，tR=18.6 min)。A6-3-6(2.3 g)经硅胶柱，二氯甲烷-甲醇(12∶1→6∶1)梯度洗脱，得到4个流分A6-3-6-1～A6-3-6-4。A6-3-6-1(130.3 mg)经Sephadex LH-20柱(70%甲醇-水)得到4个流分A6-3-6-1-1～A6-3-6-1-4。A6-3-6-1-1(25.8 mg)经制备液相(50%甲醇-水)纯化得到化合物11(4.2 mg，tR=20.2 min)。A6-3-6-1-3(12.8 mg)经制备液相(32%乙腈-水)纯化得到化合物17(4.0 mg，tR=18.8 min)。

A7(31.5 g)经MCI gel CHP-20柱，甲醇-水(10%→100%)梯度洗脱得到13个流分A7-1～A7-13。A7-7(2.3 g)经硅胶柱，二氯甲烷-甲醇(32∶1～1∶1)梯度洗脱，得到4个流分A7-7-1～A7-7-4。A7-7-3(1.7 g)经硅胶柱，二氯甲烷-甲醇(10∶1～1∶1)梯度洗脱，得到7个流分A7-7-3-1～A7-7-3-7。A7-7-3-4(324.5 mg)经Sephadex LH-20柱(70%甲醇-水)得到4个流分A7-7-3-4-1～A7-7-3-4-4。A7-7-3-4-3(15.1 mg)经制备液相(50%甲醇-水)得到化合物5(4.0 mg，tR=22.1 min)、6(2.2 mg，tR=24.0 min)。

1.3 α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选

按照参考文献[7]中α-葡萄糖苷酶抑制活性测定方法并作适当修改。用PBS缓冲液(0.01 M，pH 6.8)将α-葡萄糖苷酶配成0.5 U/mL的α-葡萄糖苷酶溶液，将4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)配制成5.0 mM的pNPG溶液，现用现配。在96孔板中加入60 μL的PBS缓冲液、20 μL的α-葡萄糖苷酶溶液和20 μL的待测样品溶液，在37 °C的恒温水浴锅中孵育10 min，再加入20 μL的pNPG溶液，在37 °C的恒温水浴锅中继续孵育20 min，在酶标仪405 nm的检测波长下测定OD值，每个待测样品溶液均做3次平行重复。同时用阿卡波糖作阳性对照。

2 实验结果

2.1 结构鉴定

化合物1黄色粉末；ESI-MS：m/z383 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.82(1H，s，5-OH)，9.58(2H，s，3′，5′-OH)，7.00(2H，s，H-2′，6′)，6.85(1H，s，H-8)，6.67(1H，s，H-3)，3.93(3H，s，OCH3)，3.75(3H，s，OCH3)，3.72(3H,s，OCH3)；13C NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：182.2(C-4)，163.8(C-2)，158.8(C-7)，152.7(C-9)，152.1(C-5)，151.2(C-3′，5′)，139.1(C-4′)，132.0(C-6)，125.6(C-1′)，105.9(C-2′，6′)，105.2(C-10)，104.1(C-3)，91.5(C-8)，60.1(OCH3)，60.0(OCH3)，56.5(OCH3)。以上波谱数据与文献报道基本一致[8]，故鉴定化合物1为5，3′，5′-三羟基-6，7，4′-三甲氧基黄酮。

化合物2黄色粉末；ESI-MS：m/z383 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.97(1H，s，5-OH)，7.15(2H，br s，H-2′，6′)，6.90(1H，s，H-3)，6.58(1H，s，H-8)，3.87(3H，s，OCH3)，3.74(3H，s，OCH3)，3.73(3H，s，OCH3)；13C NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：182.2(C-4)，163.2(C-2)，157.5(C-7)，153.6(C-9)，152.7(C-5)，152.5(C-5′)，150.9(C-3′)，139.6(C-4′)，131.4(C-6)，125.9(C-1′)，107.7(C-3)，104.2(C-10，2′)，102.1(C-6′)，94.3(C-8)，60.1(5′-OCH3)，59.9(4′-OCH3)，56.2(6-OCH3)。以上波谱数据与文献报道基本一致[9]，故鉴定化合物2为5，7，3′-三羟基-6，4′，5′-三甲氧基黄酮。

化合物3黄色粉末；ESI-MS：m/z383 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：13.07(1H，s，5-OH)，7.32(2H，br s，H-2′，6′)，6.97(1H，s，H-3)，6.66(1H，s，H-8)，3.87(6H，s，3′，5′-OCH3)，3.75(3H，s，6-OCH3)；13C NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：182.2(C-4)，163.8(C-2)，157.3(C-7)，152.7(C-5)，152.4(C-9)，148.2(C-3′，5′)，139.8(C-4′)，131.3(C-6)，120.4(C-1′)，104.3(C-2′，6′)，104.1(C-10)，103.1(C-3)，94.5(C-8)，60.0(6-OCH3)，56.4(3′,5′-OCH3)。以上波谱数据与文献报道基本一致[10]，故鉴定化合物3为5，7，4′-三羟基-6，3′，5′-三甲氧基黄酮。

化合物4黄色粉末；ESI-MS：m/z449 [M+H]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：8.05(2H，d，J=8.8 Hz，H-2′，6′)，6.88(2H，J=8.8 Hz，H-3′，5′)，6.39(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，6.20(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，5.24(1H，d，J=7.3 Hz，H-1′′)，3.68(1H，dd，J=11.8，2.2 Hz，H-6′′a)，3.52(1H，dd，J=11.8，5.5 Hz，H-6′′b)，3.42(2H，m，H-4′′，5′′)，3.20(2H，m，H-2′′，3′′)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：179.5(C-4)，166.0(C-7)，163.1(C-5)，161.6(C-4′)，159.0(C-2)，158.5(C-9)，135.4(C-3)，132.3(C-2′，6′)，122.8(C-1′)，116.1(C-3′，5′)，105.7(C-10)，104.0(Glc-C-1)，99.9(C-6)，94.7(C-8)，78.4(Glc-C-5)，78.0(Glc-C-3)，75.7(Glc-C-2)，71.3(Glc-C-4)，62.6(Glc-C-6)。以上波谱数据与文献报道基本一致[11]，故鉴定化合物4为黄芪苷。

化合物5黄色粉末；ESI-MS：m/z617 [M+ Na]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：8.06(2H，d，J=8.8 Hz，H-2′，6′)，6.89(2H，J=8.8 Hz，H-3′，5′)，6.40(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，6.21(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，5.12(1H，d，J=7.2 Hz，Glc-H-1)，4.51(1H，d，J=1.3 Hz，Rha-H-1)，1.11(3H，d，J=6.2 Hz，Rha-H-6)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：179.4(C-4)，166.0(C-7)，163.0(C-5)，161.5(C-4′)，159.4(C-9)，158.6(C-2)，135.5(C-3)，132.4(C-2′，6′)，122.7(C-1′)，116.1(C-3′，5′)，105.7(C-10)，104.6(Glc-C-1)，102.4(Rha-C-1)，99.9(C-6)，94.9(C-8)，78.1(Glc-C-3)，77.2(Glc-C-5)，75.7(Glc-C-2)，73.9(Rha-C-4)，72.3(Glc-C-4)，72.1(Rha-C-3)，71.4(Rha-C-2)，69.7(Rha-C-5)，68.5(Glc-C-6)，17.9(Rha-C-6)。以上波谱数据与文献报道基本一致[12]，故鉴定化合物5为山奈酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物6黄色粉末；ESI-MS：m/z617 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：8.09(2H，d，J=8.8 Hz，H-2′，6′)，6.88(2H，J=8.8 Hz，H-3′，5′)，6.41(1H，d，J=1.6 Hz，H-8)，6.21(1H，d，J=1.6 Hz，H-6)，5.04(1H，d，J=7.8 Hz，Gal-H-1)，4.51(1H，br s，Rha-H-1)，3.71(1H，dd，J=10.2，5.6 Hz，Gal-H-6a)，3.38(1H，dd，J=10.2，6.8 Hz，Gal-H-6b)，1.17(3H，d，J=6.2 Hz，Rha-H-6)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：179.6(C-4)，166.1(C-7)，163.0(C-5)，161.6(C-4′)，159.4(C-9)，158.6(C-2)，135.7(C-3)，132.5(C-2′，6′)，122.6(C-1′)，116.1(C-3′，5′)，105.6(C-10)，105.5(Gal-C-1)，101.9(Rha-C-1)，100.0(C-6)，94.9(C-8)，75.4(Gal-C-5)，75.1(Gal-C-3)，73.9(Rha-C-4)，73.0(Rha-C-2)，72.3(Rha-C-3)，72.1(Gal-C-2)，70.1(Gal-C-4)，69.7(Rha-C-5)，67.4(Gal-C-6)，18.0(Rha-C-6)。以上波谱数据与文献报道基本一致[13]，故鉴定化合物6为山奈酚-3-O-洋槐糖苷。

化合物7无色蜡状固体；ESI-MS：m/z419 [M+H]+；1H NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：6.60(2H，br s，H-2′，6′)，6.58(2H，br s，H-2，6)，4.75(1H，d，J=5.9 Hz，H-7′)，4.31(1H，d，J=6.9 Hz，H-7)，4.08(1H，d，J=9.2 Hz，H-9′a)，3.76(1H，overlap，H-9′b)，3.75(1H，overlap，H-9a)，3.74(12H，s，3，5，3′，5′-OCH3)，3.35(1H，overlap，H-9b)，3.09(1H，t，J=8.6 Hz，H-8)，2.82(1H，m，H-8′)；13C NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：147.9(C-3，5)，147.8(C-3′，5′)，134.8(C-4)，134.2(C-4′)，131.5(C-1)，128.8(C-1′)，103.5(C-2，6)，102.9(C-2′，6′)，87.1(C-7)，81.4(C-7′)，70.2(C-9)，68.9(C-9′)，56.0(3，5，3′，5′-OCH3)，53.9(C-8)，49.3(C-8′)。以上波谱数据与文献报道基本一致[14]，故鉴定化合物7为表丁香树脂酚。

化合物8无色蜡状固体；ESI-MS：m/z411 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：6.94(1H，d，J=1.6 Hz，H-2′)，6.80(1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-6′)，6.76(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.65(2H，br s，H-2，6)，4.71(2H，d，J=4.1 Hz，H-7，7′)，4.24(2H，m，H-9a，9′a)，3.85(2H，overlap，H-9b，9′b)，3.85(3H，s，3′-OCH3)，3.84(6H，s，3，5,-OCH3)，3.14(1H，m，H-8，8′)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：149.4(C-3，5)，149.1(C-3′)，147.3(C-4′)，136.2(C-4)，133.8(C-1′)，133.1(C-1)，120.1(C-6′)，116.1(C-5′)，111.0(C-2′)，104.5(C-2，6)，87.7(C-7′)，87.5(C-7)，72.7(C-9)，72.6(C-9′)，56.8(3，5-OCH3)，56.4(3′-OCH3)，55.6(C-8)，55.3(C-8′)。以上波谱数据与文献报道基本一致[15]，故鉴定化合物8为medioresinol。

化合物9白色无定形粉末；ESI-MS：m/z303 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，(CD3)2CO)δ：6.72(2H，br s，H-2′，6′)，4.66(1H，d，J=6.5 Hz，H-2)，4.52(1H，dd，J=9.6，6.8 Hz，H-8a)，4.37(1H，dd，J=9.6，2.0 Hz，H-8b)，4.28(1H，t，J=9.0 Hz，H-4a)，4.07(1H，dd，J=9.0，3.3 Hz，H-4b)，3.82(6H，s，3′，5′-OCH3)，3.52(1H，m，H-5)，3.22(1H，m，H-1)；13C NMR(125 MHz，(CD3)2CO)δ：179.0(C-6)，148.8(C-3′，5′)，136.6(C-4′)，131.6(C-1′)，104.5(C-2′，6′)，87.2(C-2)，70.8(C-8)，70.7(C-4)，56.6(3′，5′-OCH3)，49.2(C-5)，46.8(C-1)。以上波谱数据与文献报道基本一致[16]，故鉴定化合物9为浙贝素。

化合物10白色无定形粉末；ESI-MS：m/z273 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：6.95(1H，d，J=1.8 Hz，H-5)，6.82(1H，dd，J=8.1，1.8 Hz，H-8)，6.77(1H，d，J=8.1 Hz，H-9)，4.65(1H，d，J=6.6 Hz，H-3)，4.53(1H，dd，J=9.6，6.9 Hz，H-1a)，4.35(1H，dd，J=9.6，2.0 Hz，H-1b)，4.28(1H，t，J=8.8 Hz，H-1′a)，4.07(1H，dd，J=8.8，3.4 Hz，H-1′b)，3.85(3H，s，6-OCH3)，3.54(1H，td，J=8.8，3.4 Hz，H-2′)，3.20(1H，m，H-2)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：181.1(C-3′)，149.2(C-6)，147.7(C-7)，132.3(C-4)，120.2(C-9)，116.2(C-8)，111.0(C-5)，87.8(C-3)，71.8(C-1)，70.9(C-1′)，56.4(6-OCH3)，49.4(C-2)，47.6(C-2′)。以上波谱数据与文献报道基本一致[17]，故鉴定化合物10为salicifoliol。

化合物11白色针晶；ESI-MS：m/z239 [M+H]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.60(1H，d，J=15.9 Hz，H-7)，6.90(2H，br s，H-2，6)，6.38(1H，d，J=15.9 Hz，H-8)，3.87(6H，s，3，5-OCH3)，3.76(3H，s，4-OCH3)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：169.6(C-9)，149.5(C-3，5)，147.0(C-7)，139.6(C-4)，126.6(C-1)，115.7(C-8)，106.9(C-2，6)，56.8(3，5-OCH3)，52.0(4-OCH3)。以上波谱数据与文献报道基本一致[18]，故鉴定化合物11为芥子酸甲酯。

化合物12白色无定形粉末；ESI-MS：m/z263 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：6.47(2H，br s，H-2，6)，3.81(6H，s，3，5-OCH3)，3.64(3H，s，4-OCH3)，2.83(2H，t，J=7.6 Hz，H-8)，2.60(2H，t，J=7.6 Hz，H-7)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：175.3(C-9)，149.2(C-3，5)，135.0(C-4)，132.8(C-1)，106.9(C-2，6)，56.7(3，5-OCH3)，52.0(4-OCH3)，37.0(C-7)，32.1(C-8)。以上波谱数据与文献报道基本一致[19]，故鉴定化合物12为methyl 4-hydroxy-3,5-dimethoxybenzenepropanoate。

化合物13白色针晶；ESI-MS：m/z379 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.72(1H，d，J=15.9 Hz，H-7)，7.19(1H，d，J=1.7 Hz，H-2)，7.09(1H，dd，J=8.2，1.7 Hz，H-6)，6.81(1H，d，J=8.2 Hz，H-5)，6.39(1H，d，J=15.9 Hz，H-8)，5.56(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，3.88(3H，s，3-OCH3)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：167.7(C-9)，151.0(C-4)，149.4(C-3)，148.2(C-7)，127.6(C-1)，124.4(C-6)，116.6(C-5)，114.8(C-8)，111.9(C-2)，95.8(C-1′)，78.8(C-5′)，78.1(C-3′)，74.1(C-2′)，71.2(C-4′)，62.4(C-6′)，56.5(3-OCH3)。以上波谱数据与文献报道基本一致[20]，故鉴定化合物13为4-羟基-3-甲氧基桂皮酰基-β-D-葡萄糖苷。

化合物14白色无定形粉；ESI-MS：m/z409 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.72(1H，d，J=15.8 Hz，H-3)，6.93(2H，br s，H-5，9)，6.43(1H，d，J=15.8 Hz，H-2)，5.57(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，3.89(6H，s，5，9-OCH3)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：167.6(C-1)，149.5(C-6，8)，148.4(C-3)，140.0(C-7)，126.5(C-4)，115.3(C-2)，107.2(C-5，9)，95.9(C-1′)，78.9(C-5′)，78.1(C-3′)，74.1(C-2′)，71.2(C-4′)，62.4(C-6′)，56.9(6，8-OCH3)。以上波谱数据与文献报道基本一致[21]，故鉴定化合物14为1-芥子酰基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物15无色蜡状固体；ESI-MS：m/z395 [M+H]+；1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：7.52(2H，d，J=8.6 Hz，H-6，6′)，7.34(2H，d，J=2.0 Hz，H-3，3′)，7.11(2H，dd，J=8.6，2.0 Hz，H-5，5′)，1.32(18H，s，H-12，13，14，12′，13′，14′)，1.27(18H，s，H-8，9，10，8′，9′，10′)；13C NMR(125 MHz，CDCl3)δ：147.6(C-2，2′)，147.1(C-1，1′)，138.5(C-4，4′)，124.4(C-3，3′)，124.0(C-5，5′)，119.1(C-6，6′)，34.9(C-7，7′)，34.5(C-11，11′)，31.4(C-8，9，10，8′，9′，10′)，30.2(C-12，13，14，12′，13′，14′)。以上波谱数据与文献报道基本一致[22]，故鉴定化合物15为2,2′-oxybis(1,4-di-tert-butylbenzene)。

化合物16白色针状结晶；ESI-MS：m/z151 [M - H]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.08(2H，d，J=8.6 Hz，H-2，6)，6.71(2H，d，J=8.6 Hz，H-3，5)，3.47(2H，s，H-7)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：176.2(C-8)，157.4(C-4)，131.3(C-2，6)，126.8(C-1)，116.2(C-3，5)，41.1(C-7)。以上波谱数据与文献报道基本一致[23]，故鉴定化合物16为对羟基苯乙酸。

化合物17白色无定形粉末；ESI-MS：m/z353 [M+Na]+；1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.63(1H，dd，J=8.3，1.9 Hz，H-6′)，7.60(1H，d，J=1.9 Hz，H-2′)，6.85(1H，d，J=8.3 Hz，H-5′)，5.67(1H，d，J=7.8 Hz，H-1)，3.90(3H，s，3′-OCH3)，3.85(1H，dd，J=12.0，1.8 Hz，H-6a)，3.69(1H，dd，J=12.0，4.5 Hz，H-6b)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：166.8(C-7′)，153.4(C-4′)，148.8(C-3′)，125.7(C-6′)，121.9(C-1′)，116.0(C-5′)，113.9(C-2′)，96.1(C-1)，78.9(C-3)，78.1(C-5)，74.1(C-2)，71.1(C-4)，62.3(C-6)，56.5(3′-OCH3)。以上波谱数据与文献报道基本一致[24]，故鉴定化合物17为1-O-香草酰基-β-D-葡萄糖。

2.2 α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选结果

本实验以阿卡波糖(acarbose)为阳性对照，对水栀子中分离所得含量较大的14个化合物(1～8、10～13、15和16)进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果如表1所示，当浓度为100 μM时，化合物1、2、4～7、12、13和16具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性。

表1 化合物1、2、4～7、12、13和16的α-葡萄糖苷酶抑制活性Table 1 The α-glucosidase inhibitory activity of compounds 1,2,4-7,12,13 and

3 讨论与结论

水栀子作为栀子的变种，在我国有着广泛的分布，植物资源非常丰富。本实验采用现代色谱技术对水栀子50%丙酮提取物的醋酸乙酯部位进行了化学成分研究，从中分离得到17个化合物，化合物1～6为黄酮类化合物，化合物7～10为木脂素类化合物，化合物11～14为简单苯丙素类化合物，其中，化合物1、3、7、9～15、17为首次从栀子属中分离得到，剩余化合物均为首次从该植物中分离得到。此外，还对所得的部分化合物进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选，从结果来看，所得化合物对α-葡萄糖苷酶表的抑制活性较弱，但这并不能得出水栀子中的化学成分无α-葡萄糖苷酶抑制活性。根据文献报道，目前关于栀子降血糖活性成分的报道主要集中于为环烯醚萜类成分[5,25,26]，为进一步寻求其降糖活性的物质基础，我们还将继续研究其化学成分，并重点关注环烯醚萜类成分，以期获得具有较好α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物。本研究内容丰富了水栀子的化学成分信息，也在一定程度上为进一步开发其药用价值提供了物质基础和科学依据。