2种杀虫剂对美国白蛾的联合毒力作用研究

孙守慧，高道雄，闫秀英，朱 佳，李 硕，张馨阳

（1.沈阳农业大学林学院，沈阳 110161；2.吉林省四平市城市规划展览馆，吉林 四平 136001；3.南京苏航检测有限公司，南京 210046）

美国白蛾[Hyphantria cunea（Drury）]属于鳞翅目（Lepidoptera）、目夜蛾科（Erebidae），又名秋幕蛾、秋幕毛虫，被列入我国林业和进境植物检疫性有害生物名单[1]。截止到2022年3月，美国白蛾已扩散至吉林、辽宁、内蒙以及湖北等14个省（自治区、直辖市）的611个县级行政区，并存在局部成灾现象，疫情防控形势十分严峻[2]。美国白蛾传入40 多年来，给我国农林业造成了重大损失，严重影响了我国的生态和经济安全。2022 年国家林业和草原局等10 个单位又联合发布了《关于进一步加强美国白蛾防控工作的通知》[3]。在此背景下，研究美国白蛾的有效防控手段具有重要的现实意义。

目前，美国白蛾的防治措施有植物检疫、物理防治、化学防治及生物防治。但综合比较而言，国内外对美国白蛾的防治仍是以化学防治为主，其他防治方法为辅[4]。化学防治是森林有害生物综合治理中不可或缺的一种重要手段，也是制约森林生态系统生物危害因子可持续治理的重要因子。在当今以及可预见的将来，化学防治都是有害生物防治中必用的一种重要措施。随着相关学科的迅速发展，化学防治的概念也在不断外延，朝着高效、环境友好型方向发展，逐渐满足生物安全和生态文明发展的新要求[5]。

农药混剂是将2 种不同成分的药剂进行合理混配从而形成的一种新的制剂，这在有害生物防治中起重要作用。早期人们主要使用单一成分的药剂（以下简称单剂）来防治有害生物，但逐渐发现有害生物的抗药性日益增强，加大药量又会使得环境遭到严重污染，且效果甚微。农药混剂的出现不仅能起到优良的防治效果还能减少用药量，延缓抗药性，延长防治时间，可谓一举多得[6]。前人在对小菜蛾（Plutella xylostella）防治的研究中分别发现高效氯氟氰菊酯与苦参碱水剂以及高效氯氟氰菊酯与伏毛铁棒锤生物碱分别按6∶4和4∶1混配对小菜蛾均表现出良好的防治效果[6-7]。张妍等[8]评价了噻虫胺和高效氯氟氰菊酯混配对瓜蚜（Aphis gossypii）的杀虫活性以及田间防效均有明显增效作用。此外薛超彬[9]还报道了在田间药效试验中每公顷施用60mL 4.65%高氯·氟啶脲乳油对菜青虫（Pieris rapae）防治效果较好，而单独使用氟啶脲乳油或高效氯氰菊酯则效果较差。FAHMY等[10]也曾报道氟啶脲和氟虫脲及吡丙醚混合对小菜蛾的毒性是单独使用氟啶脲的6.9倍和11.1倍。

目前尚未有将氟啶脲和高效氯氟氰菊酯混配用于美国白蛾防治的相关报道，因此，本试验研究氟啶脲、高效氯氟氰菊酯两种药剂混配后对美国白蛾的联合毒力作用，通过配制不同比例的混合药剂分别对美国白蛾进行毒力测定，以期能够找到最优的混配比例，为美国白蛾的化学防治提供新参考。

1 材料与方法

1.1 材料

美国白蛾虫源和人工饲料均购自中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究中心，在温度（26±2）℃、相对湿度65%～80%、光周期L∶D=14h∶10h的条件下饲养，选择3龄幼虫作为本研究的供试昆虫。

供试药剂95%氟啶脲原药、97.5%高效氯氟氰菊酯原药由江苏扬农化工有限公司提供，N-N二甲基甲酰胺（DMF）购买于广东东莞市锦泰化工科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 药剂配置 单剂配置：首先将称取的95%氟啶脲原药（A）、97.5%高效氯氟氰菊酯（B）原药分别用DMF配置成10000mg·L-1的母液。再用蒸馏水将氟啶脲分别稀释成1000，500，100，50，10mg·L-1，将高效氯氟氰菊酯分别稀释成100，50，20，10，5，2，1mg·L-1。

混合药剂配置：以预试验单剂毒力测定结果为依据，按照农药混配的原则进行合理混配。将高效氯氟氰菊酯和氟啶脲按照体积比3∶21，7∶21，10∶21，21∶21，21∶10，21∶7，21∶3 混配，配比是3∶21 的稀释剂量为：500，100，50，20，10，5，2，1，0.1mg·L-1；配比是7∶21，10∶21，21∶21，21∶10，21∶7 和21∶3 的稀释剂量均为：50，20，10，5，2，1，0.1mg·L-1。

1.2.2 美国白蛾生物活性测定 参照NY/T 1154.10-2008 农药室内生物测定试验准则杀虫剂第10部分：人工饲料混药法；和NY/T 1154.7-2006 农药室内生物测定试验准则杀虫剂第6部分：混配药剂的联合测定；将配置好的不同浓度的药剂吸取2mL 药液均匀混入制好的人工饲料中,（有机溶剂的含量不超过1%），趁热分别倒入12 孔板冷却备用，对照组用DMF 稀释液处理，浓度与其它药剂处理的DMF 浓度一致。放置5min 后，将饲料放入养虫盒中[11]，每个浓度重复3 次，每个养虫盒中放入20 头3 龄美国白蛾幼虫，之后将养虫盒放入养虫室内观察美国白蛾死亡情况，可用镊子轻戳美国白蛾，若对外界刺激无反应则视为死亡，96h后统计死亡数，并计算校正死亡率。

通过预试验，确定氟啶脲和高效氯氟氰菊酯混剂在处理后第96h 检查剩余活虫数，统计死亡数。并以96h所计算的共毒系数作为混配药剂毒力的最终评判标准。

1.3 数据处理和分析

试验所得数据结果采用Microsoft Excel 2016软件计算各药剂处理后的死亡率、校正死亡率，混剂理论毒力指数、共毒系数等。采用DPS7.05 软件计算各药剂处理后的LC50、LC90及其95%置信区间。若对照死亡率高于20%，则试验无效需重新设置，反之用Abbort校正公式对死亡率进行校正[12]。计算公式为:

式中：P1为死亡率；K为死亡虫数；N为处理总虫数；P2为校正死亡率；Pt为处理死亡率；P0为空白对照死亡率。

运用孙云沛法（1960）计算共毒系数（CTC）[13]，比较各混剂的杀虫效果，并评价混剂的增效作用。本试验以高效氯氟氰菊酯为标准药剂，标准药剂毒力指数为100，计算公式如下：

式中：AT1 为实际混剂的毒力指数；TT1 为混剂的理论毒力指数；T1A、T1B 分别为氟啶脲与高效氯氟氰菊酯的毒力指数；PA、PB 为氟啶脲与高效氯氟氰菊酯的有效成分含量；CTC 为混剂的共毒系数。CTC＜80 为拮抗作用，CTC＞120 为增效作用，80≤CTC≤120为相加作用。

图1 饲喂高效氯氟氰菊酯和氟啶脲后美国白蛾3龄幼虫的中毒症状Figure 1 The poisoning symptoms of the 3rd instar larvae of the H. cunea after feeding lambda-cyhalothrin and chlorfluazuron

2 结果与分析

2.1 高效氯氟氰菊酯和氟啶脲处理后美国白蛾的中毒症状观察

取食氟啶脲和高效氯氟氰菊酯混制的饲料后美国白蛾幼虫均产生了一定的应激反应（图1），观察发现，高效氯氟氰菊酯比氟啶脲使美国白蛾产生的应激反应时间要短。如：美国白蛾3龄幼虫取食10mg·L-1高效氯氟氰菊酯混制的饲料后，大约5min 后即可产生虫体扭曲，口器吐出液体的症状（图1B）；美国白蛾3 龄幼虫取食1000mg·L-1氟啶脲混制的饲料大约15min 后也产生了虫体扭曲的现象（图1C）。2 种药剂致死的美国白蛾幼虫症状都呈现出虫体皱缩发黑的状态，但高效氯氟氰菊酯皱缩程度更为明显（如图1D）。

2.2 单剂对美国白蛾3龄幼虫毒力

为进一步比较氟啶脲和高效氯氟氰菊酯对美国白蛾3龄幼虫的毒力，运用DPS 7.05数据处理系统对这2种药剂产生的试验数据进行分析(表1)。结果显示氟啶脲处理后96h 对美国白蛾3 龄幼虫的LC50值为134.9767mg·L-1；高效氯氟氰菊酯处理后96h 对美国白蛾3 龄幼虫的LC50值分别为2.4975mg·L-1。设置高效氯氟氰菊酯为标准药剂，相对毒力指数为100，则96h高效氯氟氰菊酯毒力约为氟啶脲的54倍。

表1 氟啶脲和高效氯氟氰菊酯对美国白蛾3龄幼虫的毒力（96h）Table 1 The toxicity of chlorfluazuron and lambda-cyhalothrin to the 3rd instar larvae of the H. cunea

2.3 混剂对美国白蛾3龄幼虫的毒力

氟啶脲与高效氯氟氰菊酯复配对美国白蛾的毒力测定结果表明(表2)，施药后96h，7 个配比的LC50值为2.0701～26.7597mg·L-1，高效氯氟氰菊酯与氟啶脲配比是3∶21，7∶21，10∶21，21∶21 时的LC50值分别为26.7597 12.041，7.8888，3.765mg·L-1，药效活性介于两个单剂之间。配比为21∶3，21∶7，21∶10 时的LC50值分别为2.0701，2.3111，2.4386mg·L-1，药效活性高于两个单剂。说明氟啶脲与高效氯氟氰菊酯复配药剂对美国白蛾的活性较单剂大大增强。

表2 氟啶脲和高效氯氟氰菊酯不同混配比例对美国白蛾3龄幼虫的毒力Table 2 The toxicity of different mixing ratios of chlorfluazuron and lambda-cyhalothrin to the 3rd instar larvae of H. cunea

2.4 配比选择结果

氟啶脲与高效氯氟氰菊酯复配对美国白蛾的共毒系数统计结果表明（表2）：高效氯氟氰菊酯对美国白蛾3龄幼虫具有高活性，氟啶脲对美国白蛾3 龄幼虫活性稍差。当高效氯氟氰菊酯与氟啶脲配比为21∶21，21∶10，21∶7，21∶3时，药后96h，共毒系数为130.26，149.86，143.20，137.52，均表现为增效作用类型；高效氯氟氰菊酯与氟啶脲配比为10∶21 时，共毒系数为94.47，表现为相加作用类型；高效氯氟氰菊酯与氟啶脲配比为7∶21，3∶21时，共毒系数为78.60，66.10，表现为拮抗作用类型。

3 讨论与结论

氟啶脲是一种广谱、低毒、环境友好型的苯甲酰脲类杀虫剂[14]。据报道，它能显著地减少卵的孵化率以及幼虫的化蛹率，并在昆虫体内残留较长时间[15-16]。高效氯氟氰菊酯是一种拟除虫菊酯类杀虫剂，可作用于神经系统，影响钠离子通道，对昆虫有“击倒”的毒性作用，但其不会在生物体的组织中积聚，对后续的发育阶段也不会产生影响[17]。李云[18]曾报道5%氟啶脲对新疆阿勒泰地区的草地螟(Loxostege sticticalis)有较好的防治效果，即使以最低浓度配比施用7d 后，防治效果依然高达97%以上。杨庆等[19]曾评价了氟啶脲对烟草甲(Lasioderma serricome)的防治效果，在食用含4mg·kg-1的烟草甲人工饲料后，烟草甲2 龄幼虫死亡率高达97.33%。刘永强等[20]对美国白蛾3 龄幼虫进行毒力测定时也曾发现，90%氟啶脲对3 龄幼虫有较好的毒杀效果，LC50值为3.13mg·L-1。以上试验结果与本试验结果均有较大差异，可能与氟啶脲的质量浓度、试验时间以及剂型有关。郁晓梅[21]曾在菜青虫和桃蚜(Myzns persicae)的防治研究中发现，高效氯氟氰菊酯对3 龄菜青虫及低龄桃蚜若虫均有较高防治效果，48h的LC50值均小于10.00mg·L-1。李健等[22]曾报道高效氯氟氰菊酯对美国白蛾3龄幼虫亦有较高毒性，LC50值为1.43mg·L-1，这与本试验的结果相似。顾灯安等[23]还曾报道不同剂型的高效氯氟氰菊酯对白蚊伊蚊(Aedes albopictus)有不同的防治效果，3 种试验剂型中微囊悬浮剂效果最佳，普通悬浮剂次之，可湿性粉剂效果最差。有关这2 种药剂的相关混配研究也多有报道，如宋仲容等[24]和吕桂贞等[25]在室内对小菜蛾（Plutella xylostella）进行毒力研究时分别发现，氟啶脲与高效氯氰菊酯、溴虫腈及茚虫威分别按照10∶1，13.20∶1.72，2.20∶3.60混配后增效效果明显，共毒系数分别为178.78，241，142。魏勇等[26]在对茶假眼小绿叶蝉（Empoasca vitis）的防治研究中则发现高效氯氟氰菊酯与啶虫脒按一定比例混配对茶假眼小绿叶蝉的防治有明显增效作用，此外，JOSEPH 等[27]还发现噻虫嗪和高效氯氟氰菊酯混配及吡虫啉和高效氟氯氰菊酯混配对果园蓝蜂（Osmia lignaria）的毒性要高于另外两组杀虫混剂（氯虫酰胺+高效氟氯氰菊酯及甲氧醚酰肼+刺孔虫胺）。

药剂混配不仅能起到互补增效的作用，还能扩大杀虫谱，延缓害虫对单剂抗药性的产生。本试验将氟啶脲和高效氯氟氰菊酯进行混配，研究了两药剂不同比例混配后对美国白蛾3龄幼虫的联合毒力，并找到了增效作用最为明显的配比。氟啶脲和高效氯氟氰菊酯配比为10∶21 时96h 共毒系数达到了149.86，增效作用显著。此次试验拓宽了氟啶脲和高效氯氟氰菊酯的应用范围，为研制美国白蛾杀虫剂的新剂型提供了参考。