某规模化猪场哺乳仔猪流行性腹泻的诊治
2022-03-15李敬涛李孝文李军现金梅林
李敬涛 吴 超 李孝文 李军现 金梅林*
1.山东新希望六和集团有限公司健康管理部,山东青岛266706;2.华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉430070
猪流行性腹泻病毒是造成规模养殖集团经济损失严重的三大疾病之一。猪场一旦受到病原感染,在区域内通过空气传播容易扩散到其他场线,特别是新建场成立之初,猪场员工处置疫情经验不足,容易犯交叉污染的错误,造成该病在猪场内反复发生,影响生产节奏,多批生产母猪的35 d 受胎率及产仔性能下降。
1 临床症状
2020年11月11日,内蒙古某规模化母猪场反馈,产房哺乳仔猪出现呕吐和水样腹泻症状,主要集中在7日龄以内的哺乳仔猪,到笔者接诊时已经发病1 周,期间累积感染105 窝仔猪,共死淘880头,死淘率约69%。临床主要表现为新生仔猪在2~3日龄出现腹泻(图1),部分仔猪先吐奶后腹泻,首窝发病后约24 h 整间产房几乎全部发病,使用pH 试纸测定粪便pH 偏酸性,部分窝仔猪全身被稀粪污染(图2),粪便腥臭味严重。发病仔猪从出现症状到死亡一般2~3 d,死亡仔猪外观消瘦严重,眼球凹陷,肛门和后躯被稀粪污染,体表未见发紫和出血点,未见其他部位外观异常。
图1 仔猪水样腹泻
图2 仔猪扎堆,全身油腻,被粪便污染
2 剖检病变
临床剖检5 头发病仔猪,主要表现小肠壁变薄(图3),肠道内充满水样内容物,肠系膜乳糜管消失;胃内充满乳凝块(图4);肝脏外观赭红色,质地正常,未见明显出血点或坏死点;脾脏轻度肿大,未见明显的出血和梗死;心脏和肾脏等实质脏器未见明显的异常。
图3 小肠壁变薄
图4 胃内充满乳凝块
3 实验室诊断
采集新鲜的肠内容,使用荧光定量PCR 检测,大肠杆菌病原阴性。对腹泻初期6 头仔猪采集肛门拭子,送检猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和轮状病毒,结果显示猪流行性腹泻病毒均为阳性(图5),TGEV 和轮状病毒均为阴性。将PEDV 阳性扩增产物送检测序,测序结果与已知序列进行差异性对比分析。
图5 肛门拭子混样均为PEDV 阳性
4 综合诊断
通过上述综合分析,本次产房单元腹泻诊断为流行性腹泻病毒感染。
5 防控措施
5.1 组织返饲和灭活苗免疫
对于腹泻刚发生6~12 h 的仔猪进行安乐死,取小肠组织后放入自封袋密封,立即放入带冰块的泡沫箱中降温并全程低温保存,对每份小肠取少量内容物逐一用qPCR 方法测定PEDV 的毒量,筛选出强阳性的病料。对PEDV 阳性病料进行合样检测,确保无CSFV、PRV、PRRSV 和PCV2 的污染。
将强阳性的病料低温下匀浆,匀浆过程中打5 s-停10 s-打5 s,让匀浆始终处于低温。每头仔猪病料匀浆后生理盐水定容至200 mL,返饲20 头母猪,匀浆液储存于4 ℃当天使用,返饲前每1 000 mL 返饲液加入5 g 注射用阿莫西林钠粉针剂。
每头母猪逐头饲喂匀浆液,1 个人在前提起料锤,1 个人在后将匀浆液打在饲料顶端,让母猪最先采食。每天记录不食、少食、发热、腹泻的母猪数量。
在返饲3 周后对于全群配怀舍母猪进行灭活疫苗普免。
5.2 环境减毒
对提前断奶的猪舍进行严格洗栏,利用提前断奶的时间充分延长空栏期以灭活PEDV 病原,上床前实验室检测空栏环境样品的PEDV 病原。因猪场天然气锅炉没能及时投入使用,白天空栏后环境温度仅有6~7 ℃,第1 个正常断奶批经洗栏空栏后仍能从环境中检测到PEDv 病原,也间接说明了环境温度对于病原的灭活有至关重要的作用。对清空的产房进行彻底的洗消,根据生产计划尽可能保证空舍7 d。对于不清空的产房在走道撒生石灰,对于有腹泻的产床第一时间用生石灰对稀粪进行覆盖清理。
1)配怀舍减毒。在确认返饲成功后,对限位栏的粪道使用2%烧碱,用塑料喷壶每天2 次喷洒消毒,注意不要喷溅到母猪后躯以免造成灼伤。舍内配种记录表等记录类表格封存,更换新的表格;扫把等不易消毒类物资,全部舍外焚烧;挡板、赶猪器、脚踏盆清洗干净,2%火碱消毒;烯丙孕素、饲喂枪、药品等,采用过硫酸氢钾1∶200 擦拭消毒;仪器表面、配电箱表面,过硫酸氢钾1∶200 擦拭消毒。
2)产房减毒。产房报表封存,换新的表格;文件夹清洗,2%火碱浸泡消毒。门把手/幕帘,擦拭干净,2%火碱喷雾消毒。产房空舍和地沟冲洗,厂长和兽医双方检查合格,PEDV 检测阴性。产房消毒程序:喜多净1∶100+火碱2%,消毒2 次。烤灯过硫酸氢钾1∶200,擦拭消毒。死猪箱、粪铲清洗干净,2%火碱消毒。
3)生活区减毒。床单、被罩、工作服、浴巾,过硫酸氢钾1∶200 清洗,烘干1 h。电子类产品过硫酸氢钾1∶200,擦拭消毒;地面清扫干净,2%火碱消毒;竹制扫把和拖把,舍外焚烧;浴室拆除旧门帘,地毯,舍外焚烧;浴室内外防滑垫,2%火碱浸泡2次,清水过1 遍;衣柜清理干净,2%火碱浸湿消毒30 min;地面清扫干净,钢丝球清理污渍,尤其墙体角落和淋浴间角落;墙体表面、地面,2%火碱消毒,持续3 d。
5.3 其他措施
1)母猪延迟分娩。待产批母猪(14 号预产期)每天提前口服烯丙孕素5 mL/(头·d),最少饲喂5 d,延长孕期至117 d,保证待产批母猪充分建立免疫力保护待出生仔猪,本次收集的数据表明在通过烯丙孕素延长妊娠日龄超过117 d 时会出现死淘率升高的情况,依据延长妊娠日龄的不同会造成1%~4%死胎率的升高(正常死胎率平均基准为4%)。
2)McRebel 管理。返饲后2 周内上床的母猪单元实施McRebel 管理措施,实施分批哺乳管理,保证所有初生仔猪都能喝到初乳,单元内窝间寄养在保证仔猪喝足初乳的前提下于初生后24 h 内完成寄养,后续不再进行调栏,除断尾补铁外所有仔猪操作移至10日龄以后,人员相对隔离,两套水靴制,进出猪舍更换水靴。
3)后备猪病料驯化。选择腹泻发生在24 h 内、5日龄内的仔猪,集中收集病料,每5 份采集1 份拭子样品,标记日期和记录,-20 ℃冰箱冷冻保存,同时进行病原检测。后续再引种后备母猪时,在场外口服免疫,制作方法同上。
4)接产安排。分娩单元安排晚上单元接产,其余单元不要再安排巡栏人员,单栋单人负责。接产时,不进栏操作,多用干燥粉,使用长臂手套做分批哺乳,每栏更换长臂手套,不再做处理脐带、救假死猪等操作。
5)产房整体控温控湿,环境温度提高至24 ℃,控制湿度50%~60%。
5.4 发病原因分析
该场上次PED 疫情结束,发病单元冲栏减毒不干净,没有熟练的冲栏工,冲栏进度缓慢,产房物品未全部消毒,存在残留的病毒,导致病毒始终在猪舍内循环。
产房3、4、5、6、7 单元母猪断奶后未冲栏,母猪未刷洗屁股,产房环境差,产床粪便每日不清理,造成产床病毒量高。
产房管理人员离职,产房人员发现腹泻未及时上报,采样检测,导致各栋舍人员、工具交叉感染。
5.5 早断仔猪护理措施
1)0~3 d 饲养管理。充足饮水,每吨水中添加500 g 阿梅诺。待猪只休息4 h 后,当天给予少量的饲料,粥料,每隔2 h 添加1 次饲料(尽量少食)。让所有小猪能学会采食,60~80 g;第2 天同样饲喂,目标是80 g/(头·d);第3 天饲喂目标是80~100 g,达到采食量标准;根据猪只个体大小添加适量的饲料。
2)4~7 d 饲养管理。正常巡视检查猪舍,观察仔猪的排便是否正常,是否拉稀。如有拉稀适当调整饲喂量,添加粘杆菌素(细菌性)和硫酸安普霉素(病毒性)护理,注射恩诺沙星针剂。逐步添加干料10 g/头猪只饲喂湿拌料为主,给弱小猪勤换湿拌料饲喂,水料比为3∶1 逐步过渡。逐栏巡视,挑出弱小猪单独饲养,对病猪进行治疗。
3)弱猪护理。对于采食过少、体重过小(4.5 kg以下)仔猪:温开水+3%葡萄糖+1%奶粉+多维+饲料调制成糊状的粥料(水和料比例为∶1)进行饲喂,6~7次/d;前7 d 采取7×7 饲喂法,夜晚多增加一些饲料保证晚上采食量,逐渐过渡到自由采食,体重低的仔猪尽可能延长饲喂湿拌料的时间;对少数没有学会吃料或一直不开口的仔猪使用奶瓶灌服奶粉,温开水与奶粉比例为6∶1 稀释后,灌服。
4)8~14 d 饲养管理。逐步过渡干料,保证足够的饲料和干净饮水供给。脑炎、瘸腿病弱猪增多,病弱猪及时挑出、护理:预留足够的病弱猪栏,保持干燥,消毒处理,对腹泻栏进行调换或者病弱猪及时挑出护理。
6 小 结
笔者在本场发病1 周内到场,通过临床症状、剖检病变和实验室检测确诊为流行性腹泻发病。在临床剖检与细菌性疾病鉴别过程中,乳糜管是否有奶线是非常重要的鉴别诊断的依据。流行性腹泻等病毒性腹泻会造成肠绒毛脱落,奶水无法通过肠系膜淋巴管吸收到肠系膜淋巴结,病毒性腹泻属于吸收障碍性腹泻,无法被吸收的乳汁在肠道发酵,可能是导致粪便pH 偏酸性的原因之一。而大肠杆菌引起的腹泻主要与大肠杆菌的毒素造成小肠上皮绒毛细胞分泌氯离子和碳酸氢根等离子有关,属于渗出性腹泻,而小肠绒毛吸收功能仍然存在,所以乳糜管内会有奶线的存在。除此之外,区分哺乳仔猪腹泻属于细菌性还是病毒性感染可以通过粪便的pH值进行细菌性和病毒性腹泻类大体鉴别[1]。但随着集团内标准化实验室的普及,使用荧光定量PCR 更快捷地进行病原检测,基本在4 h 内完成检测。
针对本次流行性腹泻的发病,通过返饲后大约2 周的时间逐步控制发病,在返饲后3 周左右进行灭活苗的加强免疫。虽然在免疫灭活苗前发病已经逐步控制,但灭活苗的免疫对于提高经过活毒暴露的母猪奶水中分泌型IgA 的水平非常有帮助。据报道,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测到的PEDV抗体可持续至少1年。免疫母猪的初乳和乳汁中的特异性IgG 抗体可保护仔猪直至大约2 周龄,以抵抗PEDV,但是免疫力的长短取决于母猪抗体效价。由于猪黏膜免疫系统的特殊性,针对胃肠病原体的血清抗体的存在并不总是与保护相关。相反,对这些抗体的检测仅能证明个体与传染性微生物接触。
初乳IgA 浓度比血清样本的血清中和(SN)滴度更能反映PEDV 感染的保护作用。有规律地吮吸免疫母猪乳汁的仔猪正在不断用乳汁中的IgA 抗体接种其肠腔,这一过程赋予被动免疫力。仔猪通过口腔接触到环境中的病原后,肠腔黏膜上的lgA抗体可以中和病原体,从而保护仔猪。返饲过后评估猪群初乳lgA 抗体的水平,更有利于了解猪群经过返饲策略后是否对仔猪有保护力。