饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪生长性能、血液生化指标及抗氧化能力的影响

高 阳,杜 鑫,李冰绡,李嘉滢,李继龙,秦 华,张婷婷,黄孜豪,周业勋 （.白城师范学院生命科学学院,吉林 白城 37000；2.中国农业科学院 北京畜牧兽医研究所 动物营养学国家重点实验室,北京 0093）

在集约化的养猪生产中,早期断奶技术成为加快猪场周转和改善母猪利用率的关键。但早期断奶会加重仔猪应激,影响仔猪的生长性能,继而影响猪场效益[1-2]。角鲨烯（squalene）是一种天然的多不饱和三萜,广泛存在于动物肝脏和植物籽实中。众多研究表明,角鲨烯在调节机体抗氧化、免疫、抗炎和心血管保护等方面发挥重要作用[3-5]。然而,角鲨烯作为畜禽饲料添加剂的研究鲜有报道,尤其是早期断奶仔猪方面。本试验使用角鲨烯作为饲料添加剂,探究其对早期断奶仔猪生长性能、血液生化指标及抗氧化力的影响,为角鲨烯在断奶仔猪生产中的应用提供实践依据。

1 材料与方法

1.1试验材料角鲨烯购自宜春大海龟生命科学有限公司,纯度约为92%。抗氧指标化试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.2试验动物分组与设计试验选择30头胎次相近、体质量（5.33±0.24）kg、健康的21日龄断奶的三元杂交猪（杜×长×大）,均为去势雄性。试验采用单因子随机区组设计,将动物随机分为3个处理,每个处理5重复,每个重复2头仔猪。各处理饲粮中分别添加0（对照组）、125 mg/kg（Ⅰ组）和250 mg/kg（Ⅱ组）角鲨烯。预饲期3 d,试验期21 d,所有仔猪自由饮水和采食,每日记录采食量和剩料量。饲养试验于2020年9月在吉林省四平市梨树市四棵树乡养殖合作社进行。

1.3试验饲粮基础日粮营养水平参考NRC（2012）和《动物营养参数及饲养标准》（2010版）设计,基础日粮组成和营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成和营养水平 %

1.4测定指标及方法试验开始和结束时,仔猪空腹过夜,逐个称体质量。试验期内,每日统计采食量、饲料损耗和仔猪腹泻情况。试验结束,计算仔猪平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G）及腹泻指数。

试验结束时,所有仔猪前腔静脉采血,分离血清,分装于冻存管中,干冰预冷后转至120℃冻存。血液常规指标由金域医学检测中心完成。使用南京建成生物工程研究所试剂盒测定血清抗氧化指标水平,如:超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化力（TAOC）和丙二醛（MDA）。

1.5统计分析使用SPSS 22.0软件中的One-Way ANOVA进行数据分析,采用Duncun’s多重比较进行差异显著性检验,以P＜0.05作为差异显著性判断标准,试验数据均以±s表示。

2 结果

2.1饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪生长性能的影响由表2可知,与对照组相比,Ⅱ组早期断奶仔猪FBW、ADG和ADFI显著提高,F/G显著降低（P＜0.05）。Ⅰ组和Ⅱ组早期断奶仔猪的腹泻指数显著改善（P＜0.05）,且Ⅱ组腹泻改善作用显著高于Ⅰ组（P＜0.05）。

表2 饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪生长性能的影响

2.2饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪血液生化指标的影响由表3可知,饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪血清中TP水平的影响差异不显著（P＞0.05）。与对照组相比,Ⅰ组和Ⅱ组早期断奶仔猪血清中ALB水平显著提高（P＜0.05）,但2组间差异不显著（P＞0.05）。与对照组相比,Ⅱ组早期断奶仔猪血清中ALT和AST水平显著降低（P＜0.05）。对比3组仔猪血清中AKP发现,AKP水平随饲粮中角鲨水平升高而升高,且各处理间差异显著（P＜0.05）。

表3 饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪血液生化指标的影响

2.3饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪血清炎性因子水平的影响由表4可知,与对照组相比,Ⅰ组和Ⅱ组早期断奶仔猪血清中TNF-α和IL-6水平显著降低（P＜0.05）,而IL-10和IFN-γ水平显著提高（P＜0.05）；与对照组相比,Ⅱ组早期断奶仔猪血清中TGF-β水平显著提高（P＜0.05）。

表4 饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪血清炎症因子水平的影响 ng/L

2.4饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪血清抗氧化性能的影响由表5可知,Ⅰ组和Ⅱ组早期断奶仔猪血清中SOD、GSH-Px、CAT和T-AOC水平显著提高（P＜0.05）,并显著降低MDA水平（P＜0.05）。Ⅱ组早期断奶仔猪血清抗氧化性能的改善显著高于Ⅰ组（P＜0.05）。

表5 饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪血清抗氧化指标的影响

3 讨论

3.1饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪生长性能的影响一般情况下,仔猪的断奶日龄多为28～35 d,早期断奶为21 d前后。早期断奶能够提高母猪的周转率和产房利用率,降低哺乳期仔猪的生产成本,有利于生物安全防控[1,6-7]。然而,早期断奶会导致更严重的应激,进而影响断奶仔猪生长性能与健康[1-2]。研究表明,口服角鲨烯能改善环磷酰胺对Wistar大鼠生长性能的影响[8]。CHEN等[9]的研究表明,白羽肉鸡饲粮中添加角鲨烯250～2 000 mg/kg能够线性改善其ADG和F/G。本试验结果表明,饲粮添加250 mg/kg角鲨烯可显著改善早期断奶仔猪生长性能,与前述研究结果相符。同时,早期断奶仔猪饲粮中添加角鲨烯能显著缓解腹泻。其原因可能如下:角鲨烯独特的全反式6双键结构使其具有极佳的流动性,能穿过器官的膜结构并实现均匀分布。一方面,填补早期断奶造成的应激损伤；另一方面,改善抗氧化酶活性,缓解氧化应激与炎症[4,9-10]。本试验的后续结果也验证了角鲨烯在改善代谢和抗氧化方面的作用。

3.2饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪血液生化指标的影响本试验结果表明,饲粮中添加角鲨烯显著提高早期断奶仔猪血清中ALB水平。ALB由动物肝脏合成,与猪的第一限制性氨基酸赖氨酸（Lys）密切相关[11-12]。因此ALB水平即能直接反应动物的营养状况,又能间接反应动物肝脏功能。本试验结果表明,饲粮添加125 mg/kg和250 mg/kg角鲨烯能显著降低早期断奶仔猪血清中ALT与AST活性,其机制可能是角鲨烯通过改善动物采食量,保证心脏与肝脏的营养供给；同时,角鲨烯发挥抗氧化功能,提高机体抗氧化酶活性,并参与捕获活性氧（ROS）[9,13],从而保护细胞膜完整性,减少ALT与AST从组织细胞溢出到血液中[10,13]。本试验结果表明,饲粮添加角鲨烯能显著提高早期断奶仔猪血清中AKP水平,尤其是250 mg/kg的角鲨烯添加量。其机制可能是角鲨烯通过抗氧化作用,维持了早期断奶仔猪的肝脏功能,使肝细胞产生适宜水平的AKP,进而调控骨骼生长和物质转运[14]。早期断奶仔猪的应激和环境细菌是诱发炎症的重要因素,常以血清中炎症因子水平经行衡量。一般认为,TNF-α和IL-6为促炎因子,在促进急性炎症的发生中扮演重要角色；TGF-β、IL-10和IFN-γ为抗炎因子。本试验结果表明,饲粮中添加角鲨烯可显著降低早期断奶仔猪血清中的炎症因子水平,并提高抗炎因子水平,与有关的研究结论相符[10,15]。

3.3饲粮添加角鲨烯对早期断奶仔猪抗氧化能力的影响仔猪断奶后的营养源从母乳变为饲料,肠道发育尚不健全,免疫与防御能力较弱,易引起不同程度的氧化应激[1,16-18]。血清中的抗氧化酶活性和MDA水平能够反映早期断奶仔猪细胞氧化损伤的程度[10,18]。研究表明,肉鸡饲粮中添加角鲨烯,能够提高血清中SOD和GSH-Px活性,进而降低MDA在外周循环中的积累[9,19]。本试验结果表明,饲粮添加125 mg/kg和250 mg/kg角鲨烯能显著降低早期断奶仔猪血清中MDA水平并显著提高抗氧化指标水平,如:SOD、GSH-Px、CAT和T-AOC。这一结果,与SENTHILKUMAR等[8]的研究结果一致。一方面,角鲨烯通过调控机体多种抗氧化酶活性,实现机体的自由基清除[20]；另一方面,角鲨烯可通过维持三羧酸循环酶和呼吸标记酶活性,以此改善能量状态并增强线粒体的抗氧化力[21]。

饲粮中添加角鲨烯可提高早期断奶仔猪的生长性能,改善血液中ALB和AKP水平,并增强仔猪的抗氧化能力,对仔猪肝脏功能有一定的维持作用。初步确定,早期断奶仔猪饲粮中角鲨烯的适宜添加量为250 mg/kg。