冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清白细胞衍生趋化因子2水平及影响因素分析*

刘雪梅，夏 伟

1.四川省医学科学院·四川省人民医院 门诊部(成都 610072)；2.四川省医学科学院·四川省人民医院 内分泌科(成都 610072)

冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease，CHD)是一种常见的慢性进展性疾病，病理生理基础为血管内皮功能受损、脂质沉积、血小板黏附和聚集，导致冠状动脉粥样硬化及管腔狭窄或闭塞，死亡风险大[1]。CHD患者体内为慢性低度炎症状态[2]，常伴有糖脂代谢紊乱[3]。目前大量研究[4-6]表明，遗传、吸烟、年龄、血脂异常、高血压、高血糖、慢性炎症为CHD的主要危险因素，但具体发病机制尚不完全清楚。白细胞衍生趋化因子2(leukocyte cell-derived chemotaxin 2，LECT2)是新近发现的一种细胞因子，主要在肝脏分泌及表达[7]。既往有关LECT2的研究[8-10]主要集中在肿瘤和免疫反应方面；近年研究[11-12]表明，LECT2还在糖脂代谢调节及内皮细胞炎症因子的表达中扮演重要角色。因此，推测LECT2可能参与了CHD的发生发展。目前国内外尚无LECT2在CHD患者中发挥作用的相关研究报道。本研究旨在分析CHD患者血清LECT2水平的变化及其影响因素，并探讨LECT2在CHD发生中的病理生理意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2019年5月至2020年5月就诊于四川省人民医院的100例CHD患者为CHD组。纳入标准：符合CHD诊断[13]，即冠状动脉造影发现心外膜下的冠状动脉直径狭窄程度>50%，或无创性检查提示存在心肌缺血。选取同期66例年龄和性别与CHD组匹配的健康体检者为对照组。排除标准：1)近1个月内有胸痛发作或在胸痛发作期；2)合并传染性疾病、自身免疫性疾病、糖尿病、严重肝肾功能或心功能不全；3)近期有急性感染、手术、创伤等应激情况或使用糖皮质激素、非甾体类抗炎药。本研究得到四川省人民医院临床试验伦理委员会批准，研究对象均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 基本资料收集 采集研究对象现病史、既往史和近期用药情况，清晨空腹下测量身高、体重、血压，计算体重指数(body mass index,BMI)。

1.2.2 生化指标测定 采集研究对象空腹静脉血样，常温下以3 000 r/min，离心10 min，离心半径10 cm，分离上层血清保存于-80 ℃冰箱待用。应用己糖激酶法测定空腹血糖(FPG)；酶学法测定空腹血脂，包括甘油三脂(TG)、总胆固醇 (TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)；化学发光法测定空腹胰岛素(FINS)；散射比浊法测定超敏C反应蛋白(hs-CRP)。血清LECT2的检测采用酶联免疫吸附试验，试剂盒来源于日本MBL公司，实验各步骤严格按照说明书进行。利用稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA2-IR)计算软件(https://www.dtu.ox.ac.uk/homacalculator/ download.php)计算HOMA2-IR(评价胰岛素抵抗程度优于HOMA-IR)。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0统计软件进行数据分析。定性资料采用例数(%)表示，组间比较采用2检验。定量资料如符合正态分布，以表示，组间比较采用t检验；如不符合正态分布(TG、hs-CRP、HOMA2-IR)，则以M(P25,P75)表示，统计分析前需进行对数转换。采用Spearman相关、偏相关和逐步多元线性回归分析LECT2的影响因素。检验水准α除特别说明外均设定为0.05。

2 结果

2.1 两组临床资料及代谢特征比较

两组年龄和性别构成比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。CHD组LECT2、BMI、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、FPG、FINS、TC、TG、LDL-c、hs-CRP和HOMA2-IR均高于对照组(P<0.05)；HDL-c水平则低于对照组(P<0.05)(表1)。

表1 两组临床资料及代谢特征比较

2.2 CHD组血清LECT2与其他指标简单相关分析

Spearman相关分析提示，CHD组血清LECT2与BMI(r=0.313)、SBP(r=0.279)、FPG(r=0.208)、FINS(r=0.318)、TG(r=0.263)、LDL-c(r=0.232)、hs-CRP(r=0.388)和HOMA2-IR(r=0.425)呈正相关(P<0.05)；与HDL-c呈负相关(r=-0.453，P<0.05)；LECT2与年龄、性别、DBP和TC比较，差异无统计学意义(P>0.05)。偏相关分析显示，在进一步校正年龄、性别和BMI的影响后，CHD组血清LECT2仍与SBP(r=0.221)、FINS(r=0.261)、hs-CRP(r=0.276)、HOMA2-IR(r=0.302)呈正相关，与HDL-c呈负相关(r=-0.335，P<0.05)(表2)。

表2 CHD组以LECT2为自变量进行Spearman相关分析

2.3 CHD组血清LECT2多元线性回归分析

以LECT2为应变量，以表2相关变量中BMI、SBP、FPG、FIN、TG、HDL-c、LDL-c、hs-CRP、HOMA2-IR为自变量进行逐步多元线性回归分析。结果显示，BMI、HDL-c、hs-CRP和HOMA2-IR是LECT2的独立影响因素(R2=0.384，P<0.05)，回归方程为：YLECT2=0.633XBMI-4.316XHDL-c+1.204Xhs-CRP+4.612XHOMA2-IR+10.165(表3)。

表3 CHD组LECT2的逐步线性回归分析

3 讨论

CHD是一种代谢性疾病，常伴有血糖、血脂和体脂分布异常[3]。以上异常代谢指标会直接或间接破坏血管内皮细胞功能和完整性，促进内膜脂质沉积，导致冠状动脉粥样硬化及管腔狭窄或闭塞，是CHD发生和发展的重要危险因素[4-5]。本研究中，与正常对照组比较，CHD患者BMI更高，并存在FPG、TC、TG、LDL-c、HDL-c紊乱和胰岛素抵抗，符合一般CHD人群的代谢特征。

LECT2最早是从植物血球凝集素激活的人类T细胞白血病SKW3细胞培养液中分离出来的一种蛋白，对中性粒细胞具有趋化作用[14]。既往对LECT2研究[8-10]主要集中在肿瘤和免疫方面，近年来发现LECT2是一种肝脏因子，主要由肝细胞分泌[7]，与肥胖、脂肪肝、糖尿病等代谢性疾病关系密切。Okumura[15]在日本人群中发现，血清LECT2是一种肥胖相关蛋白，在肥胖和脂肪肝患者中明显升高。曾惠娴等[16]研究提示，初诊2型糖尿病血浆LECT2水平较正常人高，合并脂肪肝时更为明显，且与BMI、TG、HOMA-IR呈正相关；与HDL-c、HOMA-β(评估胰岛β细胞功能的指标)呈负相关。本研究发现，CHD组LECT2水平较对照组明显升高，且与BMI、HDL-c和HOMA2-IR独立相关。这与Okumura[15]和曾惠娴等[16]的临床研究结果基本一致，说明LECT2与CHD患者的糖脂代谢异常关系密切。

目前，尚不清楚LECT2与CHD患者糖脂代谢异常的因果关系，但可从一些基础研究中得到启示。高脂喂养的肥胖大鼠模型血浆LECT2升高，而减轻体重后LECT2降低[17]。在C2C12肌管中，LECT2可激活c-Jun氨基末端激酶和干扰胰岛素信号的传导，进而降低骨骼肌胰岛素敏感性；而敲除LECT2基因后，小鼠骨骼肌的胰岛素抵抗明显改善[11,18]。此外，LECT2还可诱导雷帕霉素靶点(mTOR)磷酸化，促进固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)分裂，导致肝脏和循环中的脂质异常增多[12]。以上研究提示，LECT2在CHD的糖脂代谢紊乱中可能起到了重要作用。

CHD患者体内为慢性低度炎症状态。慢性炎症也是CHD的危险因素之一，可通过氧化应激和炎症反应，损伤血管内皮细胞，促进动脉粥样硬化的进程[19]，但具体机制尚不完全清楚。近年研究[12]发现，LECT2具有一定的促炎作用。LECT2可提髙内皮细胞和巨噬细胞中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β)的表达，而LECT2敲除可减轻脂多糖诱导的小鼠肝脏炎症反应，降低TNF-α和γ-干扰素的产生。hs-CRP也是一种重要的炎性因子，主要在肝脏产生，CHD、糖尿病、感染性疾病、自身免疫性疾病等患者血清中hs-CRP会有不同程度升高[2,20-22]。正常人群LECT2与hs-CRP水平呈正相关[15]，脓毒血症患者血清LECT2水平升高，并与机体炎症反应程度有关[23]，但在糖尿病和肥胖患者中并未发现二者相关关系，可能与不同种族、年龄和样本量大小有关[16]。本研究为避免对CHD慢性炎症的干扰，故排除合并感染、自身免疫性疾病、应激状态和使用抗炎药物的CHD患者。本研究发现，CHD患者血清hs-CRP水平明显升高，且为LECT2的独立影响因素。因而，推测LECT2可能参与了CHD的冠状动脉粥样硬化炎症作用过程。 但本研究尚存在一定局限性：1)样本量偏小，结果可能存在偏倚，今后将扩大样本量进一步验证；2)只检测炎症因子hs-CRP，未评估LECT2与其他炎症指标如TNF-α、IL-1β的相关关系；3)为观察性研究，无法得出LECT2与其他影响因素的因果关系。

综上所述，本研究发现CHD患者血清LECT2水平升高，且与CHD的危险因素如糖脂代谢紊乱、慢性炎症密切相关，提示LECT2可能参与了CHD发生发展的病理生理过程。更多的基础和临床干预研究证据将有助于进一步了解CHD患者LECT2升高的临床意义，并为CHD的治疗提供新的方向。