CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Treg比率与艾滋病伴继发性肺结核经HRZE/4HR抗结核疗效的相关性分析

方亚琼 张环环

（河南科技大学第一附属医院 感染科 河南洛阳 471000）

目前在全球范围内艾滋病的患病率与死亡人数逐年增加，严重威胁人类的生命健康[1]。艾滋病一旦合并双重感染，会增加了临床诊治难度，患者病情会迅速恶化，预后不理想。CD4 +（Cluster of differentiation 4）淋巴细胞为人体免疫系统中极为重要的淋巴，在机体获得性免疫系统出现反应之前，可对机体进行保护，并分泌众多细胞因子，来诱导和调节机体获得性免疫功能。辅助性T 细胞17（T helper cell 17，Th17）/调节性T细胞（Regulatory cells，Treg）细胞在自身免疫性疾病、感染、肿瘤等疾病中发挥着重要作用。本研究重点分析，CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Treg比率与艾滋病伴继发性肺结核经HRZE/4HR抗结核疗效的相关性。现研究报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2016年3月至2018年3月本院收治的艾滋病伴继发性肺结核患者的临床资料进行分析。纳入标准：（1）经实验室检查确诊，具有抗人类免疫缺陷病毒阳性，符合我国《艾滋病诊疗指南（2018版）》中的标准[2]。（2）均经CT检查确诊为继发性肺结核；（3）均在入院后采用HRZE/4HR方案进行抗结核治疗。排除标准：（1）合并恶性肿瘤及肝、肾、心等重要器官严重疾病者；（2）精神障碍者、化疗不耐受者；（3）妊娠期、哺乳期女性；（4）真菌感染及巨细胞病毒感染者。根据纳入排除标准，本研究最终纳入符合标准的92患者，根据治疗疗效差异分为有效组45例、无效组47例。有效组男21例、女24例；年龄37～78岁，平均年龄55.47S4.29岁。无效组男22例、女25例；年龄39～79岁，平均年龄55.81S4.57岁。两组患者一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。本研究患者均已签署知情同意书，且经医学伦理委员会批准。

1.2 方法

CD4+ T淋巴细胞检测：采集研究对象外周静脉血5ml。CD4+ T淋巴细胞绝对计数取10 μl CD4 - FITC/CD8 - PE/CD3 - Percp单克隆抗体加人流式上样试管中，加入50 μl全血，振荡混匀，避光10min，溶血，于室温放置10 min，检测CD4+ T淋巴细胞情况。 Th17/Treg比率检测：Treg、Th17 均采用聚蔗糖密度梯度离心法检测。经过取细胞悬液、避光孵育、离心洗涤等步骤，上流式细胞仪检测。计算Treg/Th17 。[流式细胞仪生产厂家：美国BD（Becton Dickinson）公司；型号：FACSALOBUR]。

1.3 观察指标

1.3.1 临床疗效判定标准

同时满足以下3个标准即为有效[3]：（1）痰菌转阴；（2）X现胸片显示肺部病灶吸收或钙化，或阴影较前吸收；（3）发热、咳嗽等情况好转。未达到上述标准即为治疗无效。

1.3.2 两组CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Treg比较

比较两组治疗前后CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Treg变化情况。

1.3.3 影响治疗疗效的相关因素分析

收集患者的一般资料，包括性别、年龄、合并疾病、是否为初次治疗、影像学检查结果等。

1.4 统计学处

本研究数据均采用SPSS22.0软件进行统计分析，计量资料通过差（XSS）描述，采用t检验；计数资料通过（%）描述，并采用χ2检验；采用Logistic回归分析分析影响治疗疗效的相关危险因素；以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 患者的一般资料分析

有效组合并糖尿病例15例，合并高血压21例，使用二线抗结核药物12例；无效组合并糖尿病18例，合并高血压19例，使用二线抗结核药物11例。

2.2 两组CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Treg比较

治疗前两组CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Treg比较差异无统计学意义（P>0.05），治疗后两组CD4 +淋巴细胞计数升高，Th17/Tre降低，但有效组CD4 +淋巴细胞计数高于无效组，Th17/Tre低于无效组，比较差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 两组CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Treg比较（±SD）

表1 两组CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Treg比较（±SD）

注：与治疗前比较，aP<0.05；治疗后，与对照组比较，bP<0.05。

组别 CD4 +淋巴细胞计数（μl -1） Th17/Tre 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 有效组（n=45） 78.33±20.14 433.75±63.26 78.33±20.14 10.45±2.13 无效组（n=47） 78.12±19.88 185.72±30.26 20.54±3.81 17.86±3.10

2.3 影响治疗疗效的相关因素分析

年龄、合并糖尿病、合并高血压非影响艾滋病伴继发性肺结核经HRZE/4HR抗结核疗效的相关因素（P>0.05）；复治、影像学示病灶未好转、CD4 +淋巴细胞计数<200μl、Th17/Tre≧10为影响艾滋病伴继发性肺结核患者经HRZE/4HR抗结核治疗疗效的的相关危险因素（P<0.05），见表2。

表2 影响治疗疗效的相关因素分析[n（%）]

2.4 影响治疗疗效的独立危险因素分析

Logistic回归分析显示：复治、影像学示病灶未好转、CD4 +淋巴细胞计数<200 μL-1、Th17/Tre≧10为影响艾滋病伴继发性肺结核患者经HRZE/4HR抗结核治疗疗效的独立危险因素（P<0.05），见表3。

表3 影响治疗疗效的独立危险因素分析

3 讨论

对艾滋病患者而言，结核分枝杆菌感染是最常见的一种感染，艾滋病感染会增加结核病的发病率。及时评估艾滋病伴继发性肺结核患者抗结核治疗疗效，并针对个体化差异调整治疗方案，是提高治疗疗效，改善预后的关键。

当机体遭受艾滋病感染后，人类免疫缺陷病毒会侵袭CD4 +淋巴细胞，导致CD4 +淋巴细胞数量急剧下降。当艾滋病患者机体出现结核分支杆菌时，巨噬细胞大量减少，促使结合杆菌大量繁殖，因而导致继发性肺结核发生。既往研究发现，CD4 +淋巴细胞计数可以有效的反映艾滋病伴继发性肺结核患者身体中的免疫状态的情况，在患者进行抗结核治疗时，加强检测CD4 +淋巴细胞计数，有助于临床评估抗结核治疗疗效[4]。健康者体内Thl7和Treg在分化和成熟方面互相制约，二者保质平衡状态，并可通过某些细胞因子实施细胞转化，若体内细胞环境改变，CD4 +淋巴细胞会促使Treg分化，并抑制Thl7产生。因此可以推测Th17/Treg比率与细胞免疫失衡、病情进展密切相关。本研究结果显示：治疗后两组CD4 +淋巴细胞计数升高，Th17/Tre降低，但有效组CD4 +淋巴细胞计数高于无效组，Th17/Tre低于无效组，与既往文献所得结果相符[5]。可见在患者进行抗结核治疗时，加强检测CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Tre，可帮助临床评估抗结核治疗疗效。

本研究经Logistic回归分析得出：复治、影像学示病灶未好转、CD4 +淋巴细胞计数<200μl、Th17/Tre≧10为影响艾滋病伴继发性肺结核患者经HRZE/4HR抗结核治疗疗效的独立危险因素，进一步证实CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Tre与抗结核治疗疗效密切相关。临床可通过对艾滋病伴继发性肺结核患者抗结核治疗时期加强CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Treg检测，评估患者治疗疗效，控制病情恶化。

综上所述，影响艾滋病伴继发性肺结核患者抗结核治疗疗效的相关因素较多，加强对患者进行CD4 +淋巴细胞计数、Th17/Treg监测，有助于实时掌握患者治疗疗效情况，尽早对治疗方案做出调整，以达到最佳治疗效果。

Visualizing in deceased COVID-19 patients how SARS-CoV-2 attacks the respiratory and olfactory mucosae but spares the olfactory bulb

Mona Khan, et al.

Anosmia, the loss of smell, is a common and often the sole symptom of COVID-19. The onset of the sequence of pathobiological events leading to olfactory dysfunction remains obscure. Here, we have developed a postmortem bedside surgical procedure to harvest endoscopically samples of respiratory and olfactory mucosae and whole olfactory bulbs. Our cohort of 85 cases included COVID-19 patients who died a few days after infection with SARS-CoV-2, enabling us to catch the virus while it was still replicating. We found that sustentacular cells are the major target cell type in the olfactory mucosa. We failed to find evidence for infection of olfactory sensory neurons, and the parenchyma of the olfactory bulb is spared as well. Thus, SARS-CoV-2 does not appear to be a neurotropic virus. We postulate that transient insufficient support from sustentacular cells triggers transient olfactory dysfunction in COVID-19. Olfactory sensory neurons would become affected without getting infected.

Cell. 2021 Nov 3;184(24):5932-5949.e15. doi: 10.1016/j.cell.2021.10.027.