经典名方半夏泻心汤炮制考察

朱维龙，季宏宇，闫丽莉,田 明

(黑龙江中医药大学 研究生院，哈尔滨 150040 )

通过查阅东汉、唐、金、明、清代著名本草文献[1]，有关半夏泻心汤基本方药历代本草演变不大，都遵从了原方的药味、炮制及剂量[2].半夏泻心汤来源于东汉张仲景所著《伤寒论》.在《伤寒论》中的记载为：半夏(半升，洗)，黄芩，干姜，人参，甘草(炙)(各三两)，黄连(一两)，大枣(十二枚，擘) 右七味，以水一斗，煮取六升，去滓，再煎取三升.温服一升，日三服[3].

经典名方物质基准的制备开发，关键在于现代生产工艺与传统工艺保持“基本一致”，即投料用饮片质量一致，生产工艺条件一致.因此，需要对药材、饮片、中间体及物质基准进行质量控制[4].根据现行2020《中国药典》一部所载中药规范名称，处方中半夏、黄芩、干姜、人参、甘草、黄连、大枣七味药材均为正品名称.原文记载炮制的药材有：半夏(洗)，甘草(炙)[5].

半夏由于具有一定毒性，因此使用前都需要经过炮制[6].《伤寒论》 中半夏无论入汤剂还是散剂，使用之前都标记“洗”.半夏经过洗熟之后，毒性减弱，可以入药使用.现代沿用的炮制方法主要有白矾制、姜制、石灰制等[7]，半夏经炮制后，能降低毒性，缓和药性，消除副作用.经白矾水浸漂或煮后，长于化痰，以燥湿化痰为主；用于湿痰咳嗽，痰热内结，风痰吐逆，痰涎凝聚，咯吐不出等.经生姜制后，善于止呕，以温中化痰，降逆止呕为主，用于痰饮呕吐，胃脘痞满，喉痹、瘰疬等证[8].综上所述所以姜半夏更符合本方之功效主治症.

在历代本草中，有关甘草炮制方法记载内容较多，历史上有多种记载: 剉、炒、酥炙、酒蒸、浆水炙、粳米拌炒、蜜水炙、盐水炙、猪胆汁浸等.目前，甘草的炮制方法主要为蜜制[9]，蜜制方法最早出现在《肘后备急方》中治疗男子阴疮损烂.现代2020版《中国药典》中炙甘草炮制要求为蜜炙[10].生甘草味甘偏凉，长于清热解毒，祛痰止咳，蜜甘草味甘偏温，以补脾和胃，益气复脉力胜.而炙甘草长于补脾和胃，益气复脉，用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心动悸，脉结代[11].所以炙甘草更符合本方之功效主治症.

1 仪 器

1.1 仪器

紫外透射反射分析仪(ZF型，上海康华生化仪器制造有限公司)；电子分析天平(ME155DU梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)；粉碎机(200T，永康市铂欧五金制品有限公司)；电热恒温水浴锅(HH-S，巩义市予华仪器有限责任公司)；电热鼓风干燥箱(DNP-9052，上海精宏实验设备有限公司)；硅胶G薄层板(浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂出品)；定量点样毛细管(华西医科大学仪器厂生产)；电子天平(JD1000-2，沈阳龙腾电子称量仪器有限公司)；高效液相色谱仪(UltiMate 3000，Thermo scientific)

1.2 试药

干姜对照药材(批号：120942-201510，中国食品药品鉴定研究所);半夏对照药材(批号：D17110401，Nanjing Dilger Medical tecnnology CovLtd);甘草酸铵(批号：110731-200615)中国药品生物制品检定所; 正丁醇、冰醋酸、石油醚(60～90 ℃)、甲酸、冰醋酸、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、甲酸、甲醇、正丁醇、盐酸、磷酸、乙醇均为分析醇，纯净水，喷以茚三酮试液，10%硫酸乙醇溶液、乙醇均为分析纯(天津市永大化学试剂有限公司)； 氢氧化钠、硅胶G薄层板、乙腈为色谱纯(DIKMA TECHNOLOGES INC.)；半夏：贵州省赫章县1-5批(批号：YL108-181123; YL108-181124; YL108-181125; YL108-181126; 108-181127)；甘肃省西和县6-10批(批号：YL108-181128; YL108-181129; YL108-181130; YL108-181201;YL108-181202)；甘肃省西和县11-15批(批号：YL108-181203; YL108-181204; YL108-181205;YL108-181206;YL108-181207);甘草：内蒙古赤峰市1-5批(批号：YL105-181122; YL105-181123; YL105-181124; YL105-181125; YL105-181126)；甘肃省岷县6-10批(批号：YL105-181127; YL105-181128;YL105-181129;YL105-181130;YL105-181201)；甘肃省陇西县11-115批(批号：YL105-181202;YL105-181203;YL105-181204;YL105-181205; YL105-181206)

2 实验方法

2.1 姜半夏的炮制

2.1.1 半夏水浸泡时间及吸水量考察

以大约直径1.2 cm为标准大小分开,分别称取5批大小粒分开的半夏各50 g，共10份，分别加水500 mL浸泡，每5 h取出3粒，切开，检查是否泡透、浸泡至内无干心时，计录时间，取出，淋干，称重，计算吸水量 .

2.1.2 生姜煎煮时间考察

取生姜12.5 g，置于1 500 mL圆底烧瓶中，加水1 000 mL，加热回流提取，每10 min吸取提取液0.2 mL，用水性微孔滤膜过滤，取续滤液于微量比色皿中，采用紫外分光光度计检测光谱图，在最高峰216 nm处测定吸光度值，共采集10份(100 min)[12].

2.1.3 半夏煎煮时间考察

分别取2.1.1项的5批泡至无干心的大小半夏50 g，共10批.分别加入到生姜片煎煮液1 000 mL的生姜水中，加白矾6.25 g，共煮，每10 min取出3粒，检测是否煮透(无硬心)，记录煮透时间，取出，淋干，称重，计算出率[13].

2.1.4 半夏薄层鉴别

按照姜半夏2020版《中国药典》鉴别(2)制备供试品溶液，对照品溶液及鉴别方法.

2.2 炙甘草的炮制

2.2.1 传统净洗、浸润时间、吸水量及切制考察

取除杂后的5批次净甘草药材各100 g，分别置于网筛中，枪洗，然后置于方盘中，用湿棉巾覆盖，适当淋水，0.5 h检测是否润透，计录润透时间，称重，计算吸水量率.润透后用铡刀切2～4 mm片，收集切片，均匀分摊于方盘上，置于鼓风干燥箱中，80 ℃烘干，称重，即得.

2.2.2 炼蜜配制体积分数及用量考察

取净甘草片100 g，共10批，取炼蜜25 g，6份，分别加水配制成0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50(g/mL)，溶液体积分别为150、125、108、96、87、81、75、70、67、63 mL.取净甘草片100 g，10份，分别淋入甘草片中，拌匀，闷润透.计录闷润结果.置炒锅内，用文火炒至黄色至深黄色，不粘手时取出，记录炒制时间，放凉，称重，计算成品出率[9].

3 实验结果

3.1 姜半夏炮制结果

3.1.1 半夏水浸泡时间及吸水量

见表1.

表1 半夏药材清水浸泡时间及吸水量考察结果Table 1 Investigation results of Pinellia medicinal materials soaking time and water absorption in clear water

结果分析：大粒半夏在60～70 h浸泡至无干心，平均吸水率为96.7%，小粒半夏在50～55 h浸泡至无干心，平均吸水率为94.1%.为了使半夏完全浸泡至无干心，确定大粒半夏的浸泡时间为70 h，小粒半夏的浸泡时间为55 h.

3.1.2 生姜煎煮时间

如表2和图1所示.

表2 生姜片煎煮时间考察结果Table 2 Investigation results of ginger slice decoction time

图1 生姜片煎汤液紫外吸光度折线图Figure 1 Line graph of UV absorbance of ginger slice decoction liquid

结果分析：由表2生姜片煎煮时间考察结果和图1生姜片煎汤液紫外吸光度折线图分析，在60 min后生姜片煎汤液的吸光度趋于平衡，吸光度的变异系数为2.4%，继续煎煮对其成分不具有显著影响.因此，确定生姜片的煎煮时间为60 min[13].

3.1.3 姜半夏半夏煎煮时间考察结果

如表3所示.

表3 半夏煎煮时间考察结果表Table 3 Investigation results of Pinellia decocting time

结果分析：为了保证半夏与白矾完全煮透，确定大粒半夏煎煮时间为90 min，小粒半夏煎煮时间为70 min.因此确定姜半夏制法为取净半夏，以直径约为1.2 cm标准大小分开，用10倍量的水分别浸泡大粒半夏70 h，小粒半夏55 h至内无干心取出；另取生姜切片煎煮60 min，加白矾共煮，大粒半夏煎煮90 min、小粒半夏煎煮70 min煮透至内无硬心，取出，切薄片，60 ℃烘干.

用量：每10 kg净半夏，用生姜25 kg，白矾12.5 kg.

3.1.4 半夏的TLC定性鉴别结果

如图2示.结果分析：15批次供试品色谱中，在与半夏对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，在与干姜对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点.与药典中姜半夏的TLC鉴别方法一致，表明此结果参考意义较高，15批姜半夏饮片TLC鉴别均符合药典标准[14].

1～15—15批次姜半夏饮片供试品； 16—半夏对照药材； 17—干姜对照药材图2 15批姜半夏饮片TLC鉴别图谱Figure 2 TLC identification map of 15 batches of ginger pinellia decoction pieces

3.2 炙甘草炮制参数的确定

3.2.1 传统净洗、浸润时间、吸水量结果

见表4.

表4 甘草药材切制实验结果表Table 4 Table of results of cutting experiment of licorice herbs

结果分析：由表4数据可知，甘草的入药部位为干燥根和根茎，由于药材产地不同及根粗细差距，所以将甘草药材浸润时间有一定的差异，根据以上实验结果，药材润透时间可确定为8 h，吸水率为87%以上，出成品率84%以上.

3.2.2 蜜炙甘草炮制研究

炼蜜配制体积分数结果见表5.

结果分析：确定100 g净甘草加炼蜜质量浓度为0.25 g/mL，即炼蜜25 g加沸水至100 mL,浸泡70 min左右至完全润透.因此炙甘草制法为取甘草净药材，抢水洗，闷润8 h至内无白心，切薄片，80 ℃烘干.取净甘草片加炼蜜质量浓度0.25 g/mL，即炼蜜25 g加沸水至100 mL,浸泡70 min左右至完全润透，置炒锅內，用文火炒至黃色至深黃色，不粘手时取出,即得，用量：用炼蜜，每100炮炙品用炼蜜25 kg.

表5 炼蜜配制体积分数及润透结果Table 5 The volume fraction of condensed honey and the results of wetting through

3.2.3 炙甘草的TLC定性鉴别

按照甘草2020版《中国药典》鉴别(2)项制备供试品溶液，对照品溶液及鉴别方法.结果如图3显示.

1～15—甘草；15—批供试品；16—甘草酸单铵盐对照； 17—甘草对照药材图3 15批炙甘草饮片TLC鉴别图谱Figure 3 TLC identification map of 15 batches of roasted licorice pieces

结果分析：色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的颜色的荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的颜色荧光斑点.此方法与2020版《中国药典》中甘草的TLC鉴别方法一致，表明此结果参考意义较高，即十五批炙甘草饮片TLC鉴别均合格.

3.2.4 色谱条件与系统适用性试验

参照药典并查阅文献，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.05%磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱(0～8 min，19%A；8～35 min， 19%→50%A；35～36 min，50%→100%A；36～40 min，100%→19%A；40～50 min， 19%A)，检测波长为 237 nm，柱温：30℃，流速：1.0 mL/min，进样量 10 μL；理论板数按甘草苷峰计算应不低于5 000[15].

1)对照品溶液的制备

取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品适量，精密称定，加70%乙醇分别制成每l mL含甘草苷20 μg、甘草酸铵0.2 mg的溶液，即得(甘草酸质量=甘草酸铵质量/1.020 7).

2)供试品溶液的制备

取本品粉(过三号筛)约0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇100 mL，密塞，称定质量，超声处理(功率250 W，频率40 kHz)30 min，冷却，再称定质量，用70%乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得.

3)测定法

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得[11].15批次炙甘草饮片的测定结果见表6.

表6 炙甘草饮片测定表Table 6 Determination of the content of roasted licorice pieces

结果分析：2020版《中国药典》规定，本品按干燥品计算，含甘草苷(C21H22O9)不得少于0.50%；甘草酸(C42H62O16)不得少于1.0%.由表6数据可知，炙甘草中甘草苷及甘草酸的百分含量均符合标准.

4 讨 论

本实验通过对古代本草文献查阅以及2020版《中国药典》的要求，对经典名方《半夏泻心汤》中半夏和甘草的炮制方法确定.本文通过古本草确定了药物的炮制方法，按照药典要求，对姜半夏和炙甘草的详细参数进行了考证，从而保证经典名方的质量，提高疗效.本实验还有一些不足之处：1)未做大批量实验来验证结果的准确性，在大生产过程中可能有一些出入；2)由于姜半夏未在《中国药典》查询到有效成分含量方法，所以未做含量检测，可能影响实验结果.