壮阳类中成药及保健食品中非法添加物的分析调查

王仕平，邓杰华，谢婷，黄炳泉，周云峰

1.宜春市食品药品检验所，江西 宜春 336000；2.宜春市人民医院，江西 宜春 336000

随着社会快速发展，生活压力逐渐增大，阳痿、早泄等性功能障碍男科疾病已成为威胁男性健康的频发疾病。该病呈年轻化趋势发展，发病率为32%～80%，患病人数逐年增长［1-2］。中成药类及保健品具有改善男性性功能障碍的效果，功效较为温和，不良反应较少，受到广大男性患者的青睐。但一些不法商家为了追求利益最大化，会私自在中成药或保健品中添加非标明成分5 型磷酸二酯酶（PDE5）抑制剂［3-4］，增强补肾壮阳效果，达到畅销目的。PDE5 抑制剂及其制剂壮阳补肾效果显著，但不良反应居多，需按医嘱服用，患者在不知情的情况下服用，易产生安全风险［5］。基于此，本研究拟调查市售壮阳类中成药及保健食品的质量状况，采用超高效液相色谱-质谱联用法建立PDE5抑制剂定性分析方法，对市售壮阳类中成药及保健食品进行非法添加物快速筛查，对其安全风险、质量水平及现状进行分析，为壮阳类中成药及保健食品非法添加物检验检测方法的建立及打击非法行为提供实验参考和思路。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

Waters Acquity UPLC H-class/xevo TQD 液相色谱质谱联用仪（美国Waters 公司）；TLE 204E 万分之一电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）；MS205DU 十万之一电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）。

补肾样品（市售37 批，保健食品32 批，中成药5 批）；那红地那非（批号：520039-201902，纯度：98.5%）、红地那非（批号：520047-201802，纯度：99.9%）、伐地那非（批号：510169-202001，纯度：99.7%）、枸橼酸羟基豪莫西地那非（批号：510032-201301，纯度：98.8%）、西地那非（批号：510068-201401，纯度：99.9%）、豪莫西地那非（批号：520046-201401，纯度：99.6%）、氨基他达拉非（批号：520042-202002，纯度：99.5%）、他达拉非（批号：510170-202001，纯度：99.7%）、硫代艾地那非（批号：520048-201401，纯度：99.5%）、伪伐地那非（批号：520041-201401，纯度：99.0%）、那莫西地那非（批号：520040-201401，纯度：99.5%）均购于中国食品药品检定研究院；甲醇、乙腈购于默克股份两合公司（德国）；乙酸、乙酸铵：赛默飞世尔科技（中国）有限公司；水为摩尔一级水。

1.2 仪器参数

1.2.1 色谱条件 色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH C18（1.7 μm,2.1 mm）×100 mm）；流速：0.4 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：5 μL；流动相：A 甲醇，B 乙腈，C 含0.1%乙酸的0.02 mol/L 乙酸铵溶液，梯度洗脱（0～0.8 min、11.0%A、9.0%B，0.8 min～1.30 min、38.5%A、31.5%B，1.30 min～3.00 min、38.5%A、31.5%B，3.00 min～3.50 min、53.9%A、44.1%B，3.50 min～5.00 min、53.9%A、44.1%B，5.00 min～5.10 min、11.0%A、9.0%B，5.10 min～7.50 min、11.0%A、9.0%B）。

1.2.2 质谱条件离子源 电喷雾离子源（ESI），正离子扫描模式；扫描方式：多反应监测（MRM）、子离子扫描（Daughter Scan）；毛细管电压：3.00 kV；脱溶剂气温度600 ℃；脱溶剂气流量：1 000 L/h；锥孔气流量：50 L/h，其他参数见表1。

表1 多反应监测质谱参数

1.3 溶液的制备

1.3.1 标准溶液 标准储备溶液：精密称取羟基豪莫西地那非、硫代艾地那非、伐地那非、豪莫西地那非、西地那非、红地那非、那红地那非、那莫西地那非、伪伐地那非、氨基他达拉非、他达拉非各约10 mg，置同一100 mL 量瓶中，用适量乙腈溶解并定容至刻度，摇匀，作为标准储备液。

混合标准筛查溶液：精密量取上述混合标准储备溶液0.5 mL，置100 mL 量瓶中，加50%乙腈稀释至刻度，摇匀，作为混合标准筛查溶液。

1.3.2 供试品溶液 供试品若为固体剂型，取一次服用量，研细，置50 mL 量瓶中，加乙腈约40 mL，超声处理15 min，冷至室温，用乙腈定容至刻度，摇匀，滤过；供试品若为液体制剂，取一次服用量，置50 mL 量瓶中，加乙腈约40 mL，振摇3 min，用乙腈定容至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液0.5 mL，至100 mL 量瓶中，加50%乙腈稀释至刻度，摇匀，滤过，滤液经0.22 μm 微孔滤膜过滤，即得。

1.3.3 阴性样品溶液 取不含有11 种目标化合物的样品，按供试品溶液制备项下操作，制成阴性样品溶液。

1.3.4 阳性样品溶液 取不含有11 种目标化合物的样品,加11 种目标对照品适量，按供试品溶液制备项下操作,制成与混合标准筛查溶液浓度大致一致的阳性样品溶液。

1.4 样品测定

按上述色谱和质谱条件分别对混合标准筛查溶液和样品溶液进行分析。分别吸取混合标准筛查溶液、供试品溶液、阴性样品溶液和阳性样品溶液各5 μL，注入液质联用仪，记录离子对色谱图和一级、二级质谱图。

2 结果

2.1 混合标准筛查溶液结果

对混合标准筛查溶液进行LC-MS/MS 分析，得到11 种目标化合物的离子对色谱图（图1），每种化合物的离子对色谱图均具有较高响应。需注意的是，有少量化合物的单个离子对出现两个峰，这是因为混合标准筛查溶液具有结构相似，分子量相近的物质，易在相近的时间出峰。

图1 对照品离子对色谱图

2.2 检测限

以信噪比为3∶1 时的对照品浓度作为仪器检测限，羟基豪莫西地那非、硫代艾地那非、伐地那非、豪莫西地那非、西地那非、红地那非、那红地那非、那莫西地那非、伪伐地那非、氨基他达拉非、他达拉非的检出限分别为0.47、0.52、0.30、0.90、0.17、0.22、0.11、0.15、0.27、0.23、0.10 ng/mL。

2.3 样品结果

分别对空白溶剂、阴性样品、阳性样品和供试品溶液进行分析，结果表明，空白溶剂及阴性样品未出现与对照品离子对保留时间一致的色谱峰，空白溶剂及阴性样品中成分对测定无干扰，阳性样品出现与11 种目标化合物离子对保留时间一致的色谱峰，质谱响应良好。所抽取的37 批样品有5 批中成药，32 批保健食品，主要有片剂、丸剂、胶囊剂和合剂等剂型，5 批中成药均未检出西地那非，32 批保健食品中有31 批样品中出现与西地那非离子对保留时间一致的色谱峰，为进一步确认，对西地那非对照品溶液和31 批供试品溶液进行子离子扫描质谱分析，结果发现，西地那非对照品溶液和供试品溶液的一级质谱准分子离子峰均为475，对照品西地那非的主要碎片离子为377、311、283、100、58，样品溶液均出现上述离子碎片，基本可以判定32 批保健食品中有31 批检出西地那非，检出率96.9%。

对被检出西地那非的样品进行分析，发现被检出西地那非的样品工艺粗制滥造，处方中多种成分混合不均匀，胶囊剂掰开及片剂、丸剂研细可明显看到亮白色结晶。其使用说明书宣称处方含有名贵的动植物药材，如玛咖、淫羊藿、鹿鞭及虎鞭等，但通过显微鉴别、化学鉴别、薄层色谱、液相色谱等技术手段发现，大多数样品的主要成分为蔗糖、淀粉、糊精、食用色素及价格低廉的中药材，质量水平较低。

3 讨论

3.1 风险评估

中成药及保健食品中禁止非法添加化学药物。西地那非商品名为“万艾可”，是一种PDE5 抑制剂，法定处方药，主治男性勃起性功能障碍，效果显著［6］，但会出现头痛、潮红、消化不良、鼻塞及视觉异常等不良反应［7］，严重副作用会导致阴茎异常勃起出现永久性损伤、单眼或双眼突然视力丧失及突发听力减退或听力丧失等［8-10］。根据中国疾病预防控制中心的最新数据，我国高血压患者人数已达2.45 亿，平均每4 个成年人中就有1 人是高血压患者，一般都要长期吃药保持血压稳定。而西地那非具有扩张血管的作用，可使血压下降。高血压患者治疗期间在不知情的情况下服用该药物，会导致血压剧烈波动，持续下降，如正在服用硝酸酯类药物的患者误服西地那非，患者的血压可能会突然下降甚至危及生命［11］。因此，西地那非一旦脱离医生指导而随意服用，对服用者的健康和生命安全将造成严重威胁，37 批样品中有31 批检出西地那非，被检出西地那非的样品的使用说明书均未标明含有西地那非成分，西地那非的擅自加入将会对使用者尤其是老年人带来极大风险。

3.2 现状分析

随着科技发展，药品、食品的检测检验方法水平不断提升，药品、食品中的非法添加物可快速准确检出。但通过历年抽检调查发现，中成药及保健食品中添加化学药物现象屡禁不止，愈演愈烈，这次调查的27 家企业竟有22 家生产企业顶风作案，违规添加西药西地那非，且违规添加西地那非的均为保健食品。追其原因大致分为以下几个方面：一、药品监管比较成熟，监管力度较大，近几年都有非法添加专项整治，非法添加情况较少，而保健食品处在监管的空隙，监管较为薄弱。二、保健品市场规模巨大，据前瞻产业研究院发布的《2021——2026年中国保健品行业市场前瞻与投资规划分析报告》，2019 年中国保健品行业的市场规模达到3 965 亿元，2020 年保健品行业的市场规模保守估计为4 092 亿元，2026 年行业市场规模将会达到约5 178 亿元，庞大的市场带来巨大的利益。三、保健品行业准入门槛较低，大量食品生产企业、跨界企业纷纷进入保健品市场，各企业良莠不齐，许多企业根本不进行产品研发，而是仿制已有保健品并进行大量广告宣传，可迅速增加销售并获取巨额利润。四、营销手段高明，如补肾保健品大多数外包装印制精美，中文说明较少，外文介绍较多，会让患者产生是高档进口产品假象，同时使用说明书夸大其词且附有大量淫秽图片，更会让患者产生购买欲望。五、制假、掺假成本较低，所使用的原材料价格低廉，制成产品后卖出，利润一般能达到几十倍甚至上百倍，掺入西药后，产品效果更是显著增强，达到畅销目的。六、监管处罚力度不够，食品药品安全领域行政执法与刑事司法“两法”衔接工作中面临违法与犯罪界限不明、证据标准不统一的问题［12］，往往出现以罚代管、以罚代刑的现象，不少企业直接将此作为成本计算到产品中，在巨大的利益面前基本无视处罚。

3.3 小结

本研究建立的UPLC-MS/MS 法可对壮阳类中成药及保健食品中11 种PDE5 抑制剂进行快速筛查，专属性较好。所抽取的37 批样品中有31 批检出西地那非成分，检出率为83.8%。市售补肾类中成药及保健食品中化学药物的非法添加情况严重，安全风险较高，质量水平较低，尤其是保健食品。广大患者需谨慎使用补肾产品，建议购买正规知名厂家产品，对于服后立马见效的产品需警惕化学药物的加入，同时相关执法部门需加大、加重对非法添加行为的打击力度，真正伤及不法商家根本，净化市场环境，促进中药类等保健品行业健康稳定发展，保证老百姓安全。