IL-7和IL-15在前列腺癌患者血清以及组织中的表达水平及其临床意义

雪合热提·萨塔尔，迪力夏提·马木提，阿卜杜日斯·阿卜力克木

(1.新疆医科大学第六附属医院 泌尿外科，乌鲁木齐 830054；2.新疆医科大学第一附属医院 泌尿外科，乌鲁木齐 830054)

前列腺癌是男性恶性肿瘤相关死亡的重要原因，慢性炎症是引起前列腺癌的重要因素。有研究发现，细胞因子是炎症的关键介质，在免疫系统与肿瘤的相互作用中起着关键作用[1]。包括IL-7和IL-15在内的一组细胞因子共用一个受体链γ，细胞因子共用受体γ链具有调节淋巴细胞发育的功能，有助于支持CD4+和CD8+T细胞的稳态增殖和功能。IL-7在临床肿瘤学的Ⅰ/Ⅱ期试验中有着很好的应用效果。虽然IL-15尚未用于临床试验，但有研究发现，IL-15可能在临床相关性的恶性肿瘤治疗中具有较高潜力[2-3]。鉴于前列腺癌患者血清及组织中IL-7和IL-15蛋白表达的相关研究甚少，本研究通过分析IL-7和IL-15在前列腺癌患者血清及组织中表达的差异，及其与前列腺癌侵袭性的相关性，探究IL-7和IL-15在前列腺癌发生及发展中的潜在作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料研究对象为2019年2月—11月期间就诊于新疆医科大学第六附属医院泌尿外科的患者，其中54例前列腺癌患者为研究组，年龄(67.2±3.4)岁；68例前列腺增生患者为正常对照组，年龄(69.7±4.6)岁。所有患者都经过病理科确诊。以上纳入研究的患者均无术前放疗、化疗史，本研究经医院伦理委员会批准，所有患者及其家属均已签署知情同意书。

1.2 主要试剂和仪器兔单克隆抗体IL-7(美国Abcam公司，克隆号：BVD10-40F6)，兔单克隆抗体IL-15(美国Abcam公司，克隆号：MA5-23561)，IL-7酶联免疫试剂盒、IL-15酶联免疫试剂盒(伊莱瑞特生物科技有限公司)，Thermo MultiskanTMGO全波长酶标仪(赛默飞世尔科技公司)，徕卡DM3000数码显微镜(徕卡微系统有限公司)。

1.3 ELISA检测患者血清中IL-7和IL-15水平严格按照ELISA 试剂盒说明书要求测定2组患者血清中IL-7和IL-15水平，在酶标仪上依序测量各孔光密度[D(450 nm)]值。

1.4 免疫组织化学法染色切片脱蜡，抗原修复，加稀释好的IL-7和IL-15抗体(IL-7为1∶100，IL-15为1∶100)，加适量生物素标记的二抗工作液，显色剂显色，自来水充分冲洗，复染，脱水，透明，封片，显微镜下观察染色结果。前列腺组织标本中细胞质出现淡黄色或黄色颗粒状着色为阳性表达，采用IPP 6.0 软件在同等条件下检测每张组织切片中的IL-7和IL-15表达的积分D值。

2 结果

2.1 2组患者血清IL-7和IL-15水平的比较与前列腺增生组比较，前列腺癌组患者血清IL-7和IL-15水平显著升高(P<0.05，表1)。

表1 2组患者血清IL-7和IL-15水平的比较

2.2 2组患者组织中IL-7和IL-15蛋白阳性表达率的比较在前列腺癌和前列腺增生患者组织中，IL-7蛋白阳性表达率分别为72.16%、38.23%，IL-15蛋白阳性表达率分别为62.96%、35.29%，二者2个指标差异均有统计学意义(P<0.05，图1、表2)。

注：A. 前列腺增生组织中IL-7的表达；B.前列腺增生组织中IL-15的表达；C. 前列腺癌组织中IL-7的表达；D. 前列腺癌组织中IL-15的表达。图1 免疫组织化学染色分析前列腺癌和前列腺增生患者组织中IL-7和IL-15的表达 (×200)

表2 2组患者组织中IL-7和IL-15表达水平的比较

2.3 前列腺癌组织标本中IL-7和IL-15表达水平与临床病理特征的关系对54例前列腺癌组织标本中IL-7和IL-15表达水平与临床病理特征之间的关系进行分析。结果显示，IL-7和IL-15表达水平与Gleason评分、临床分期、前列腺特异性抗原(prostate specific antigen，PSA)水平密切相关，与淋巴结转移相关(表3)。

表3 前列腺癌组织标本中IL-7和IL-15表达水平与临床病理特征的关系

2.4 前列腺癌组织中IL-7与IL-15的相关性经Spearman 相关分析，在前列腺癌组织中，IL-7和IL-15表达水平呈正相关(r=0.415，P<0.01)。

3 讨论

近年来，大量组织病理学、流行病学和分子病理学的研究发现，慢性炎症可能在前列腺癌的发生中起重要作用[1]。IL是炎症的重要介质，在前列腺癌患者中，许多炎症介质表达上调。IL-2、IL-15和IL-7是调节淋巴稳态的关键细胞因子[2]，它们独特的生理功能可归因于专有细胞因子受体链、细胞因子或其受体链的差异表达模式在不同生理环境中产生的信号所启动的不同信号通路[3-4]。然而，这些研究对象大多数是晚期前列腺癌患者，在这样的情况下，无法很好地解释肿瘤发展、转移及扩散的内在机制，如骨溶解，可能与诱导IL产生有关[5-8]。此外，肿瘤内缺血和相关坏死引发的无菌炎症也可以促进IL的释放。因此，晚期肿瘤患者提供的数据可信度不高。为探究免疫炎症在前列腺癌早期所起的作用，本研究分别从局部(前列腺组织)和全身(血清)水平评估前列腺癌患者中IL的表达，并与前列腺增生组织进行了比较。研究结果显示，与前列腺增生组织相比，前列腺癌组织中促炎症因子IL-7和IL-15的表达频率及程度较高。

已知IL-15可由多种细胞产生，包括活化的巨噬细胞、平滑肌细胞和前列腺癌细胞。IL-7是由多种基质细胞和不同的上皮细胞(包括胸腺和肠道)产生的。最近，在正常前列腺上皮细胞中检测到了IL-7的产生，但在转移的前列腺上皮细胞中没有发现[9]。IL-15通常由髓系活化抗原提呈细胞产生，包括单核细胞、巨噬细胞和DC[10]。然而，IL-15也被发现在多种其他类型细胞中表达，包括基质细胞和上皮细胞[4]。炎性因子(IL-6、IL-7和IL-15等)促进前列腺癌患者中蛋白质生成的机制尚不清楚。不同的微生物，包括病毒和细菌也与前列腺癌的发生有关[11]。事实上，它们的存在可能导致慢性炎症。细胞死亡可能反过来激活先天免疫系统，由此引发的固有免疫细胞产生的可溶性因子，包括IL-6、IL-7和IL-15被认为可以促进前列腺癌的发生[12]。

有研究发现，IL-7通过肿瘤细胞促进促血管生成因子的产生和内皮细胞的增殖，IL-15也被证明能刺激“体内”血管生成[13]。本研究结果显示，IL-7和IL-15在前列腺癌组织中的表达水平明显高于前列腺增生组织(P<0.05)，IL-7和IL-15的表达与临床病理特征显著相关(P<0.05)，且IL-7和IL-15的表达呈正相关。由此推测，IL-7和IL-15在前列腺癌的发生和发展过程中可能有一定程度的协同作用。因此，单独或联合检测前列腺癌患者血清IL-7和IL-15水平，可能有助于前列腺癌患者的疗效判断和预后观察，这尚待进一步研究。