蜂王浆中药物残留及其检验方法

王 琦，刘玉玲，兰凤明，王 志

（吉林省养蜂科学研究所，吉林 吉林 132108）

蜂王浆是主要蜂产品之一，是蜜蜂养殖业中的重要经济来源。它经巢内哺育蜂头部的咽下腺和上颚腺分泌[1]，呈浆状，颜色为乳白色、淡黄色或橙色，用于哺育蜂王和工蜂幼虫[2]。从19 世纪末开始，人们便开始对蜂王浆的主要成分进行了研究[3]。随着科技的发展，人们对蜂王浆的了解也逐渐加深。学者经研究发现，蜂王浆中大部分由水组成，可占其总量的62.5%～70%，少部分为干物质。干物质含量虽少，但却富含氨基酸、蛋白质、维生素、矿物质等多种营养物质，还具有一定的生物学活性[4]。因此，蜂王浆也开始作为绿色保健食品进入了人们的视野。

蜂王浆的食品安全问题一直受到人们的广泛关注。现代化农业生产为了提高农作物产量、减少病虫为害，开始普遍使用化肥和农药，这也使蜜源植物常常携带各种有害化学物质残留；再加上蜂农为了治疗蜂病所使用的抗生素、除螨剂等蜂药在蜂箱中均有残留，使有害物质被蜜蜂富集在其体内，最终影响蜂产品质量，危害人类的身体健康。对蜂王浆中几种主要的药物残留及其检验方法进行了综述。

1 有机磷农药

1.1 简介

从20 世纪开始，为防止农作物的病、虫、草害，农药被广泛应用于农作物生产中。如今，大部分的除草剂、杀虫剂均为更易降解的有机磷农药，典型的有机磷农药有敌敌畏、乐果、灭线磷、三唑磷等。

有机磷农药是指含磷元素的有机化合物农药，绝大多数为杀虫剂，对人体的危害从剧毒到低毒不等。农民在农业生产过程中使用农药，采集蜂在直接接触后有很大概率死亡。而蜜源植物或从其体表、或从土壤、水源中将有机磷农药富集在植物体内，经蜜粉传递至蜂群中制成蜂粮，最终由蜜蜂消化吸收，因此，其在蜂王浆、蜂蜜、蜂花粉等蜂产品中均可能存在一定残留。

1.2 检测方法

SN/T 2577-2010[5]中采用气相色谱法测定蜂王浆中有机磷农药残留量，该方法使用乙腈提取测试样品中的有机磷农药，提取液经凝胶色谱柱净化，使用火焰光度检测器的气相色谱仪测定， 使用外标法定量。 Emmanouel 等[6]将实验样品经C18 固相萃取技术纯化并分离试验样品，采用气相色谱法进行测定蜂王浆中有机磷和有机氯农药的残留量。李樱红等[7]将蜂王浆样品通过乙腈提取并进行初步处理后，采用HLB 固相萃取小柱富集净化，使用高效液相色谱- 串联质谱法测定了蜂王浆中包括蝇毒磷在内的7 种不同农药的残留。

2 杀螨剂

2.1 简介

蜂螨寄生在蜂体，以吸食蜜蜂血淋巴为生，造成蜜蜂寿命缩短、采集力下降等问题，严重时会导致群势迅速降低，造成巨大损失。常见的蜜蜂寄生螨有大蜂螨、小蜂螨等。为了解决这一难题，杀螨剂应运而生，如氯杀螨、甲基克杀螨、杀螨酯、乐杀螨等。

严格来说，杀螨剂也是属于农药的一种，与上述有机磷农药有所重叠。但不同的是，杀螨剂直接在蜂巢中使用。杀螨剂虽然对蜜蜂无害，但仍会被蜜蜂吸收进体内，同时在蜂产品中有所残留，最终影响蜂产品品质。

2.2 检测方法

SN/T 2571-2010[8]中采用气相色谱- 质谱法检测杀螨剂残留量，通过1 : 1 的正己烷和丙酮混合试剂提取残留的杀螨剂，然后使用弗罗里硅土柱净化，通过气相色谱- 质谱- 负化学源测定，外标法定量。曾银欢[9]将蜂王浆离心处理后使用乙腈+ 水进行样品萃取，建立了液相色谱串联质谱的测定方法，对市场购买的蜂王浆样品中的杀螨剂（四螨嗪、喹螨醚、吡螨胺、噻螨酮、乙螨唑等10 种） 残留进行了测定，相关系数均大于0.99。

3 抗生素类

3.1 简介

抗生素类与杀螨剂类似，大多属于直接用于蜂箱内的蜂药。抗生素种类繁多，凭借其优异的杀菌性能在多种蜂病的治疗当中均有应用。如盐酸土霉素可用于治疗美洲幼虫腐臭病和欧洲幼虫腐臭病、使用制霉菌素治疗白垩病、烟曲霉素治疗孢子虫病等[10]。

3.2 检测方法

GB/T 22945-2008[11]中使用磷酸溶液提取链霉素、双氢链霉素和卡娜霉素，经过三氯乙酸沉淀蛋白，苯磺酸和羧酸型固相萃取柱精华，采用液相色谱串联质谱法测定其在蜂王浆中的残留量。李晓东等[12]将样品采用QuEch-ERs 技术进行提取净化，UPLC-MS/MS 法同时定性、定量分析了蜂王浆中14 种喹诺酮类药物残留。叶有标等[13]采用高效液相色谱- 串联质谱法分别对干粉和鲜王浆两种不同状态下的蜂王浆中四环素类抗生素进行了测定，结果符合产品质量安全标准要求。SN/T 2664-2010[14]中对四环素类抗生素残留量采用放射受体分析法测定，该方法通过提取出的四环素类抗生素与[3H]标记的金霉素共同竞争结合特异的受体位点，经反应后[3H]测定衰变发出的β 粒子数放射性量值对四环素残留进行定量分析。SN/T 3027-2011[15]中采用酶联免疫法测定蜂王浆中氟喹诺酮类抗生素的残留量。薄海波等[16]通过酸性Na2EDTA-Mcllvaine 缓冲溶液将蜂王浆中蛋白质沉淀并提取其中的药物残留通过反相液相色谱柱分离，紫外检测器监测，外标法定量，结果满足相关规定的要求。

4 其他药物

侯建波等[17]使用液相色谱- 串联质谱法测定了蜂王浆中新烟碱类药物及其代谢产物的残留量。谭韩英等[18]利用气相色谱法测定了蜂王浆中氟胺氰菊酯的残留量。 SN/T 2573-2010[19]和SN/T 2574-2010[20]中介绍了气相色谱- 质谱法测定杀虫脒和双甲脒及其代谢产物残留量的监测方法。双甲脒还可采用液相色谱- 质谱法、质谱法进行测定。

5 展望

近年来，随着农药、化肥、食品添加剂等化学产品的大规模使用，食品安全问题开始广受人们关注。蜂王浆中各类农药、抗生素的残留量直接影响着蜂王浆的产品质量，也与人们的生命健康安全息息相关。因其巨大危害，蜂王浆中药物残留的允许检出指标均为mg/kg 量级，属于痕量分析，因此对监测设备的精密度要求极高。目前，气相色谱法、高效液相色谱法、质谱法等高精度仪器分析方法应用广泛。此外，质谱仪凭借其通用性、高精度等优点也被作为气相色谱、高效液相色谱的检测器使用，即气相色谱- 质谱法和高效液相色谱- 质谱法，高效、高精度，但也有价格昂贵等问题。因此，更廉价、简单便捷、高效、高精度的检测方法研究一直是该领域的研究方向。