对大肠杆菌快速检测原料4-甲基伞形酮葡糖酸苷在食品检测中运用分析

邹琳

【摘要】文章尝试将大肠杆菌快速检测原料4-甲基伞形酮葡糖酸苷应用于食品检测过程当中，根据该原料检测结果判定食品样本的合格情况，并对4-甲基伞形酮葡糖酸苷的自制方法以及应用效果进行初步分析，希望能够引起业内有关人士的关注与重视。

【关键词】食品检测;大肠杆菌;4-甲基伞形酮葡糖酸苷

1 材料与方法

实验所需准备材料与仪器包括：孔径0.45um标准水相滤膜、胰蛋白酶、真空泵、紫外灯、分析纯试剂。同时于本地采购全脱脂牛奶、矿泉水、包装薯片、方便面以及运动饮料等食品样本分别30份，样本选取完全随机。

用精密天平在无菌操作状态下精密称取25.0g剂量固体食品样本，放入含255.0ml剂量灭菌生理盐水中，充分混合均匀并振荡，振荡后妥善保存。全脱脂牛奶样品需提前在25.0℃±2.0℃环境条件下进行蛋白酶的处理，其他液体食品样品直接用精密仪器称取25.0ml剂量，提前于容器中置入为225.0ml剂量灭菌生理盐水，将振荡器震荡参数调节为幅度30.0cm，震荡时间为7.0s，震荡次数为25次，制备形成1：10样品稀释液，保存备用。

在此基础之上，根据食品样品具体情况取浓度1.0mol/l盐酸或氢氧化钠对食品样本稀释液酸碱值进行调节，用9.0ml剂量灭菌生理盐水对所制备食品样本稀释液进行递增稀释，倍数为10倍，以达到最高稀释度检测结果与阴性终点重合为标准。将灭菌过滤装置与真空抽滤瓶相连接，底座摆放无菌滤膜并妥善固定，过滤器中加入20.0ml剂量无菌标准水，经真空泵进行抽吸过滤操作。选择不同稀释度食品样本的稀释度，经反复多次过滤后加入15.0ml剂量抽吸水，过滤后将真空泵装置调节至关闭状态，滤膜备用。將经过上述处理后的滤膜贴防于经干燥处理琼脂平板表面，确保两者间无起泡，恒温培养箱恒温至35℃～37℃，培养时间为120.0min，紫外灯检测波长为366nm，观察滤膜上菌落是否呈蓝白色荧光状态。在此基础之上，根据4-甲基伞形酮葡糖酸苷快速检测原料对大肠杆菌在食品样本中的含量进行检测，选取菌落总数在25～50个范围内琼脂平板，对蓝白色荧光菌落数进行汇总，与稀释倍数进行处理，以得到待测定样品中大肠杆菌或者大肠菌群的数量，单位为cfu/ml或cfu/g。

2 结果与分析

自制4-甲基伞形酮葡糖酸苷与品牌4-甲基伞形酮葡糖酸苷在食品样本中对大肠杆菌数量的检测结果以及食品样本合格情况评价结果如下：全脱脂牛奶样本30份，自制4-甲基伞形酮葡糖酸苷检出合格29份，品牌4-甲基伞形酮葡糖酸苷检出合格29份;矿泉水样本30份，自制4-甲基伞形酮葡糖酸苷检出合格26份，品牌4-甲基伞形酮葡糖酸苷检出合格26份;包装薯片样本30份，自制4-甲基伞形酮葡糖酸苷检出合格27份，品牌4-甲基伞形酮葡糖酸苷检出合格26份;方便面样本30份，自制4-甲基伞形酮葡糖酸苷检出合格24份，品牌4-甲基伞形酮葡糖酸苷检出合格24份;运动饮料样本30份，自制4-甲基伞形酮葡糖酸苷检出合格26份，品牌4-甲基伞形酮葡糖酸苷检出合格25份。

以上数据显示：从食品样本检测合格情况上来看，自制4-甲基伞形酮葡糖酸苷与品牌4-甲基伞形酮葡糖酸苷所检测大肠杆菌数有良好的一致性，提示为控制成本，提高检测便捷性，可以尝试以自制4-甲基伞形酮葡糖酸苷替代传统进口品牌4-甲基伞形酮葡糖酸苷。

3 结束语

4-甲基伞形酮葡糖酸苷作为一种特殊生物显色剂，可以在大肠杆菌糖苷酶作用下发生水解反应，并产生-4-甲级伞形酮，该物质具有极强的荧光显色属性，试验人员可以利用该特性直观判定食品样本是否存在大肠杆菌污染情况，在实践应用中表现出了检测时间短、操作简单、结果可靠性高等一系列特征，因而在食品安全检测领域中得到了相当广泛的应用。本次实验结果显示：自制4-甲基伞形酮葡糖酸苷与品牌采购4-甲基伞形酮葡糖酸苷在 应用于食品样本中大肠杆菌快速检测方面所得到的结果是高度一致的，虽然该结果无法应用于对4-甲基伞形酮葡糖酸苷性状、纯度以及杂质评定中，但有关食品样本检测结果的应用是可行的。未来还需要通过进一步对4-甲基伞形酮葡糖酸苷性状、杂质成分、结构等内容的研究，以生成更为系统与全面的数据信息。

参考文献：

[1]田加蒙，宁倩倩，丁海新， 等.糖苷酶底物6-氯-4-甲基伞形酮-α-L-艾杜糖醛酸苷的合成[J].有机化学，2020，40（1）：215-220.

[2]韩竞春，于剑，彭延芳， 等.他克莫司对肠尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸转移酶1A8抑制作用研究[J].环球中医药，2013，（z1）：147-148.

国家轻工业食品质量监督检测南京站