超高效液相色谱测定饮料中的食品添加剂

2021-11-10陈利辉

食品安全导刊 2021年29期

陈利辉

（中纺检测（福建）有限公司，福建泉州 362000）

饮料中的食品添加剂种类较多，在食品添加剂检测时，气相色谱法、光度法等检测方法，存在准确性低、难以定性等问题。液相色谱法为常用食品添加剂测定方法，常规液相色谱法流程复杂，需大量实验试剂，且分析缓慢，不满足食品快速检测需求，可使用超高效液相色谱法解决该问题。

1 材料与方法

1.1 实验材料

本文以市售碳酸饮料为样本，测定糖精钠、苯甲酸、日落黄及柠檬黄4种食品添加剂，使用试剂包括甲醇、乙酸铵、磷酸二氢铵。

1.2 实验方法

1.2.1 样品前处理

目前市售的饮料种类繁多，不同饮料处理方式不同。对于碳酸饮料或茶饮料，将饮料置于超声波清洗器中，进行除气处理，精确称取5～10 g（精确至小数点后3位）除气后的饮料，置于50 mL带盖离心管中，加水至20 mL左右，使用漩涡混合器振荡，超声20 min，加水定容至刻度，置于离心机内离心处理10 min（转速为10 000 r/min），取上清液过0.22 μm的滤膜，滤液即为样品溶液[1]。

1.2.2 色谱条件优化

在超高效液相色谱检测中，色谱条件影响饮料中不同种类食品添加剂的分离效果，进而影响检测灵敏度与检测准确性。在超高效液相色谱测饮料中食品添加剂时，应注重以下色谱条件的选择。

（1）流动相。当对流动相进行优化选择时，基于国家标准检测方法，流动相应选择水溶性强的溶液，此类溶液不易在色谱柱上残留，可保障各类食品添加剂有效分离；常用流动相包括乙酸铵、乙腈、甲醇、磷酸二氢钾和磷酸二氢铵等，可基于性质变化，选择一种或两种溶液作为流动相，取得更精准的检测结果[2]。如乙腈、乙酸作为流动相，乙腈本身的洗脱效果较好，使添加剂能够直接被冲刷下来，但是很难达成添加剂的分离。如甲醇、乙酸铵作为流动相，则可以充分利用甲醇、乙酸铵的应用属性，具有良好的添加剂分离效果。需要注意的是，由于等度洗脱难以达成良好的添加剂分离效果，在这种情况下，便可以不断优化调整流动相比例，应用梯度洗脱程序，从而得到最佳分离条件[3]。

（2）检测波长。按照《食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定》（GB5009.35—2016），不同食品添加剂在不同检测波长的敏感度不同，如糖精钠的最大吸收波长为206.2 nm，安赛蜜的最大吸收波长为230 nm等。如果采用单一检测波长的方式，将会降低检测效果，检测人员可通过变量控制实验，测定不同波长下，各个目标食品添加剂的最佳检测波长，在保障检测准确性与灵敏度的基础上，减少其他物质干扰。在检测波长期间，还需要将出峰时间、紫外干扰等因素进行综合考量，通过反复对比实验，获取得到最佳检测波长[4]。

（3）检测器。液相色谱检测可用紫外检测器或二极管阵列检测器（PDA），后者适用范围更广，为检测首选。

（4）色谱柱。在超高效液相色谱检测中，可用色谱柱包括TC-C18、ZORBAX SB-C18等，色谱柱类型与规格均会影响食品添加剂分离效果，需根据目标食品添加剂，选择合适色谱柱，以取得理想基线分离效果[5]。

最终确定的超高效液相色谱法的色谱条件为ZORBAX SB-C18色谱柱，柱温为35 ℃；流动相A选用甲醇；流动相B选用乙酸铵与0.1 mol/L的磷酸二氢铵；检测器为PDA；

1.2.3 检测参数

使用超高效液相色谱法逐一测定4种食品添加剂，进行对比分析。4种食品添加剂的检测参数如表1所示。

表1 4种食品添加剂的检测参数

2 结果与分析

2.1 实验结果对比

由表2可知，超高效液相色谱法的检测结果与国家标准中的方法法相差不大，RSD均低于2.12%，证实超高效液相色谱法能够用于饮料中食品添加剂的测定，且检测精密度较高，可在实践中普及。

2.2 要点分析

本文运用超高效液相色谱，基于《饮料中乙酰磺胺酸钾的测定》等多个国家标准规定，合理展开食品添加剂的测定工作。在使用超高效液相色谱法测定饮料中的食品添加剂时，应按照规范流程测定：①选择合适的仪器与试剂，制备标准储备液；②样品前处理；③按照最佳色谱条件开始测定；④分析处理实验数据。在上述过程中，操作要点在于样品前处理与色谱条件优化。