气相色谱-三重四极杆质谱法测定辣椒中咪鲜胺及其代谢物残留量

吴晓娜，董 娟，董雪峰

（聊城市食品药品检验检测中心，山东聊城 252000）

咪鲜胺是一种被广泛使用的咪唑类杀菌剂，主要的作用机理是抑制细胞膜的重要成分麦角甾醇的生物合成，从而达到铲除病害的目的[1]，它广泛用于大田作物、水果蔬菜及各种经济作物病害的防治[2]，其对于辣椒的枯萎病也具有很好的防治效果[3]。通过对咪鲜胺的大量研究，普遍认为咪鲜胺在进入环境后最终会降解成2,4,6-三氯苯酚[4-5]，而2,4,6-三氯苯酚的毒性较强，且不易降解，对环境安全会造成潜在隐患。目前对于咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚的检测方法，样品的前处理不仅复杂烦琐，而且还会用到毒性较大的吡啶盐酸盐，不利于检验人员的健康和环境的安全。本文通过研究构建了QuEChERS-气相色谱-三重四极杆质谱法测定辣椒中咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚残留的方法，处理过程简单快速，并具有较高的灵敏度和选择性。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

乙腈、丙酮、醋酸、无水硫酸镁、氯化钠、PSA、C18、咪鲜胺标准品（北京海岸鸿蒙标准物质技术有限责任公司，标准物质编号：GBW(E)081565，浓度100 μg/mL）、2,4,6-三氯苯酚标准品（北京海岸鸿蒙标准物质技术有限责任公司，标准物质编号：SB05-059-2008，浓度100 μg/mL）。分析中所有试剂为分析纯试剂，水为一级水。

1.2 仪器与设备

7890B-7000C气相色谱-三重四极杆质谱联用仪（AgilentTechnologies）、±0.01 g电子天平、均质器、离心机和氮吹仪。

1.3 仪器条件

（1）色谱条件。色谱柱：VF-1701MS石英毛细管柱 （30 m×0.250 mm×0.25 μm）；柱箱程序升温：40 ℃保持 1 min，然后30 ℃/min升温至130 ℃，再以5 ℃/min升温至250 ℃，10 ℃/min升温至300 ℃保持5 min；进样口温度：280 ℃；碰撞气为氮气，载气为氦气，纯度≥99.999%；流速：1.2 mL/min；进样量1 μL；进样方式为不分流进样。

（2）质谱条件。离子源温度：230 ℃；传输线温度： 280 ℃；电离方式：EI；溶剂延迟：5 min；测定方式：多反应监测。

1.4 方法

称取15 g试样于50 mL离心管中，加入15 mL 1%醋酸乙腈溶液进行均质提取，在离心管中加入盐（6 g无水硫酸镁，2 g氯化钠），迅速混匀，涡旋振荡1 min，4 000 r/min离心5 min。吸取离心结束的上清液8 mL进行净化处理，加入净化剂（1 500 mg硫酸镁，400 mg PSA及400 mg C18），涡旋振荡1 min，4 000 r/min离心5 min。吸取净化完的溶液 2 mL于离心管中，进行浓缩，氮吹至近干，加入1 mL丙酮复溶，过滤膜，上机。

2 结果与分析

2.1 质谱条件的优化

对咪鲜胺以及2,4,6-三氯苯酚标准溶液进行全离子扫描。选择碎片中丰度比较高的碎片离子作为定性定量母离子。咪鲜胺母离子碎片为：180（定量离子）、196（定性离子）；2,4,6-三氯苯酚母离子碎片为：196（定量离子）、132（定性离子）。检测在不同碰撞能量下，母离子碎片的碰撞情况，得到母离子-子离子对，表1为优化后的母离子-子离 子对。

表1 咪鲜胺及其代谢物多反应离子监测条件

2.2 咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚定性、定量离子图谱

图1和图2为优化质谱条件下咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚的定性、定量离子图谱。

图1 咪鲜胺定性、定量离子图谱

图2 2,4,6-三氯苯酚定性、定量离子图谱

2.3 建立基质校正曲线

吸取一定量的2,4,6-三氯苯酚和咪鲜胺标准溶液，以净化后的辣椒基质溶液为溶剂，配制基质混合标准溶液使其终 浓 度 为0.1 μg/mL、0.2 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、 2.0 μg/mL。绘制标准曲线得到线性回归方程，结果见图 3和图4。R2都在0.999以上，表明咪鲜胺及2,4,6-三氯苯酚在0.1～2 μg/mL范围内线性关系良好。以10倍信噪比计算方法的定量限(S/N=10)，咪鲜胺为0.006 6 mg/kg，2,4,6-三氯苯酚为0.000 4 mg/kg。

图3 2,4,6-三氯苯酚的基质校正曲线

图4 咪鲜胺的基质校正曲线

2.4 回收率和精密度的测定

对辣椒样品进行3水平，6平行实验，选择低、中、高3个不同浓度进行加标实验。计算加标回收率以及精密度，结果见表2。

表2 咪鲜胺及其代谢物在3个添加水平下的平均回收率及其相对标准偏差

咪鲜胺的平均回收率在91.9%～118.3%，相对标准偏差在1.82%～6.95%；2,4,6-三氯苯酚的平均回收率在85.1%～118.0%，相对标准偏差在1.22%～7.64%。结果表明该方法具有较好的回收率及精密度，能够满足辣椒中咪鲜胺及代谢物残留量的检测。

3 结论

本文建立了辣椒中咪鲜胺及其代谢产物2,4,6-三氯苯酚残留量的检测方法。通过操作简单的QuEChERS前处理方法，利用气相色谱-三重四极杆质谱仪对咪鲜胺及其代谢产物2,4,6-三氯苯酚残留量进行了定性和定量分析。避免了复杂烦琐的前处理程序以及毒性试剂的使用。通过该方法检测，咪鲜胺和2,4,6-三氯苯酚的定量限分别为 0.006 6 mg/kg和0.000 4 mg/kg，检测灵敏度高；绘制的5个点的浓度曲线，线性良好；在3个不同添加水平下，均获得了良好的回收率。因此，可采用该方法检测辣椒中咪鲜胺及其代谢物2,4,6-三氯苯酚残留量。