原水中粪大肠杆菌群随季节性变化的研究

印丰

摘要：饮用水与人民群众生活息息相关，水质安全切实关系到人们健康问题。粪大肠菌群是总大肠菌群的一部分，其主要来源于人畜粪便。粪大肠菌群是判断水体污染状况的重要指标，在环境质量评介、环境卫生监督等方面具有重要的意义[1]。本次研究抽调合肥市董铺和三厂两个取水点，2020年12月至2021年7月的样本作为研究对象，通过研究原水中粪大肠杆菌的，探索其是否随季节性变化。

关键词：原水;粪大肠杆菌群;季节性变化;

1前言

粪大肠菌群是水质污染的重要指标之一，对于评价原水受生活污染和工业污染的程度和正确认识原水的特征有重要的参考意义。从而为合理评价原水质量和优化水质管理流程提供数据支撑。

测定粪水中大肠菌群的传统方法有多管发酵法、滤膜法。多管发酵法不受水体浊度和浓度的影响适用于任何条件水样的检测，滤膜法适用于较清洁的水样，但两种方法的前期准备工作量大、操作繁锁、耗人力[1]。

酶底物法可弥补传统检测方法的不足，本次研究采用酶底物法测定原水中粪大肠杆菌群的含量，探究其随季节变化的情况。

1.1水质标准

水体的微生物污染是最早一批被提出的水质污染问题，认识到水是疾病的载体对于控制水媒介传染病具有重要意义[2]。

水中的致病性微生物往往由外界污染物引起，尤其是是人类和其他变温动物动物的排泄物，其生长和繁殖可能导致霍乱、伤寒、腹泻等肠道传染病的传播甚至大规模爆发。病原体包含可以引起疾病的细菌、病毒和原生动物。[3]水中可能存在常见的病原菌包括有伤寒沙门氏菌、志贺氏、菌大肠杆菌等。这些细菌大量存在于人类和其他常温动物的肠道和排泄物中，若水体因此被污染，在稀释后也可通过技术手段测到粪大肠菌群。

在绝大多数情况下，大肠菌群并不具有健康风险，但是作为粪便污染的指示微生物，大肠菌群的存在提示了人体被粪便中其他病原体感染疾病的可能性[3]。

1.2粪大肠杆菌群检测方法

发酵法：是通过将水样注入已灭菌的放有微孔滤膜的滤器中，经过抽滤。细菌即被截留在滤膜上，然后将滤膜贴于合适的培养基上进行培养。

滤膜法：是将水样注入已灭菌的放有微孔滤膜的滤器中，经过抽滤。细菌即被截留在滤膜上，然后将滤膜贴于合适的培养基上进行培养[4]。

酶底物法：能弥补传统的检测方法存在的劣势，且技术操作简洁，速度快，精度高，低消耗。可有效提高水质中粪大肠菌群测定的准确度，精密度以及检验效率。

2实验部分

2.1实验原理

酶底物法采用大肠菌群细菌能产生ß-半乳糖苷酶分解PG使培养液呈黄色，以及大肠埃希氏菌产生葡萄糖醛酸分解MUG使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理来定量分析水样中粪大肠菌群数[4]。

2.2实验材料和设备

科立得试剂、97孔定量盘、100mL无菌取样瓶、程控定量封口机、隔水式恒温培养箱。

2.3实验过程

1.在生物洁净室内，将科立得试剂倒入装有100mL水源的无菌取样瓶中，盖上盖子摇匀;

2.待充分摇匀后试剂完全溶解后，将样品混合液倒入97孔定量盘中，使用程序定量封口机进行封口;

3.培养：将密封后的装有样品混合液的97孔定量盘，放入44.5℃隔水式恒温培养箱培养48h

4.查看结果：待培养结束后，取出定量盘，与阳性比色盘对照，黄色》阳性比色盘，则粪大肠菌群阳性。数出阳性孔格数，对照97孔MPN表，读取结果。

2.4结果与分析

将实验所得具体数据导入绘图软件，分别绘图得图1和图2。

观察图1可知，在冬季这一阶段，董铺原水中的粪大肠菌群数量较少，其原因可能是当时处于冬季，气温较低，不利于原水中粪大肠菌群的繁殖，在春季有一个较大的上升过程，呈现出迅速爆发的趋势，结合春季天气温度分析其中原因：春季开始温度回升，对于粪大肠菌群有一个较适宜的生长环境，水中温度、光照等因素较为温度，数量有所上升。而后进入夏季，温度持续上升，观察图可知董铺原水中的粪大一直保持一个温度上升的趋势，在夏季达到最大值，随后又呈现出下降的趋势，这与夏季汛期雨水量大，长时间高温有一定关联。

观察图2可知，在冬季时期，三厂原水中的粪大肠菌群数量较少，其原因可能是当时处于冬季，气温较低，不利于原水中粪大肠菌群的繁殖，在春季有一个较大的上升趋势，分析其中原因：可能是春季开始温度回升，对于粪大肠菌群有一个较适宜的生长环境，水中温度、光照等因素较为温度，数量有所上升。而后有持续下降，可能是短暂的升温后，有开始降温或者连续的阴雨天气不利于粪大肠菌群的繁殖。进入夏季后，呈现出稳定上升的趋势，且在7月达到最大值。

3总结

通过对比三厂原水和董铺原水粪大肠菌群数量变化趋势可得出一定规律：粪大肠菌群的数量与温度有较大关系整体呈正相关影响，当气温较低时，水中粪大肠菌群数量较少，随着温度的升高，环境有利于粪大肠菌群的繁殖，原水中粪大肠菌群数量增加。结合其它地区原水中粪大肠菌的调查研究，不仅温度对其有影响，光照、原水中无机物、有机物、以及水库水源的流动、夏季汛期水量的上升等因素对粪大肠菌群都有一定的影响。

参考文献

[1]许丹梅，吕玉容.酶底物法测定水中粪大肠菌群的探讨[J].广东化工，2021，48（03）：194+183.

[2]JOHN S. On the Mode of Communication of Cholera [M]. London：John Churchill，1855

[3]楊蓉，李垒，霍晓芹，袁懋，金小伟.水质标准中指示微生物的发展及现状[J].中国环境监测，2020，36（04）：1-10.

[4]张少峰，刘国强，魏春雷.粪大肠菌群检测方法及研究进展[J].海洋通报，2008（03）：102-106.