B族链球菌显色培养在产前筛查中的应用及孕妇妊娠结局预测价值

孙 雷,孙继文,邵 坤

安徽省阜阳市妇女儿童医院检验科，安徽阜阳 236000

B族链球菌(GBS)感染是现阶段临床中导致出现新生儿感染甚至死亡的重要原因[1]。新生儿GBS感染可分为早发型和晚发型，出生1周内出现称为早发型，1周后至90 d内出现称为晚发型[2]。有研究指出，脑膜炎、败血症、肺炎等多种严重性疾病均是新生儿GBS感染可能引发的并发症[3]。此外，有报道指出孕妇产前亦可引发GBS感染，其主要症状包括早产、绒毛膜羊膜炎、死胎等，产后可能出现肺炎及败血症[4]。有文献表明低体质量儿、羊膜早破、泌尿系统感染等均与孕晚期GBS感染密切相关，因而临床中及时有效地检出GBS感染具有十分重要的意义，而传统的血平板分离鉴定法，其检测耗时长、技术要求高、操作复杂，并且存在一定比例的假阳性，因而临床中亟待寻找快捷有效的检测GBS的方案[5]。显色培养检测GBS结果更为精确，操作更为便捷，有利于临床推广应用，近年来本院逐步推广显色培养检测GBS，并取得了较高的临床应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2018年1月至2020年3月在本院住院分娩并行显色培养法检测GBS的164例孕产妇作为研究对象，年龄23～44岁，平均(28.93±5.81)岁，初产妇92例，经产妇72例，孕周35～27周，平均(36.28±1.93)周。纳入标准：(1)单胎宫内妊娠；(2)检查前两周内无抗菌药物使用史；(3)B超检查结果显示胎儿存活；(4)知情且签署知情同意书。排除标准：(1)合并心、肝、肾等重要脏器疾病；(2)合并出现肿瘤；(3)有妊娠期高血压综合征等妊娠期并发症；(4)生殖道感染其他致病菌；(5)拒绝配合或主动申请退出本研究者。本研究经本院伦理委员会批准。

1.2方法 由产科医师在无外阴消毒且不作清洁处理的情况下，使用无菌拭子采集所有孕妇阴道下1/3分泌物，并在取样后60 min内送检。将拭子插入培养基，于培养箱中以5% CO2、35 ℃培养18～24 h，若培养基呈胡萝卜色则判定为GBS阳性，将未显胡萝卜色的培养基分别转种于血平板和二分格平板，继续在同等条件下培养18～24 h，血平板可疑菌落行仪器鉴定确认后判定为GBS阳性，二分格平板出现菌落β 溶血且呈胡萝卜色则判定为GBS阳性，其余均判定为GBS阴性。

1.3观察指标 依照GBS检测结果将孕产妇分为GBS阳性组和GBS阴性组，详细记录所有孕妇妊娠结局和新生儿结局，包括胎膜早破、宫内感染、早产、产后出血、新生儿窒息、新生儿肺炎、新生儿上呼吸道感染、新生儿败血症等。

2 结 果

2.1GBS阳性与阴性孕妇一般资料调查结果 GBS阳性组孕产妇年龄、孕周及产次与GBS阴性组孕妇差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 GBS阳性与阴性孕妇一般资料调查结果

2.2孕产妇妊娠结局调查结果 GBS阳性组孕妇不良妊娠结局率明显高于GBS阴性组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 孕产妇妊娠结局调查结果(n)

2.3新生儿结局调查结果 本组研究结果显示，GBS阳性组新生儿窒息、肺炎、败血症和上呼吸道感染等不良结局率明显高于GBS阴性组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 新生儿结局调查结果(n)

2.4GBS感染与妊娠结局和新生儿感染的关系 GBS感染是导致孕妇不良妊娠结局和新生儿感染的独立性危险因素(P<0.05)，见表4。

表4 GBS感染与妊娠结局和新生儿感染的关系

2.5GBS感染预测妊娠结局和新生儿感染的关系 使用GBS感染预测妊娠结局和新生儿感染时均具有较高特异度，且预测妊娠结局和新生儿感染时差异均有统计学意义(P<0.05)。见表5。

表5 GBS感染预测妊娠结局和新生儿感染的关系(%)

3 讨 论

妊娠期妇女其阴道上皮细胞糖原水平异常上升，乳酸浓度显著升高，产生适合耐酸微生物生长的环境而导致其大量繁殖，破坏阴道内微环境，妊娠期阴道黏膜损伤，机体免疫功能降低，病原菌入侵后机体的抵抗能力下降，增加阴道细菌感染概率[6]。GBS是临床中较为常见的一种条件致病菌，在厌氧环境中存活，属于无乳链球菌属于革兰阳性菌，且患者多合并念珠菌感染[7]。既往有研究发现围生期母婴感染与链球菌密切相关，且链球菌感染也极易导致婴幼儿败血症、脑膜炎的发生[8]。GBS对绒毛膜组织有极强地穿透力和吸附力，GBS感染妇女易出现不良妊娠结局，GBS是妊娠期孕妇生殖道感染的主要致病菌之一，可能导致孕妇生殖道合并其他感染的概率显著升高。有研究指出，GBS感染会导致早产、胎膜早破、孕妇感染、宫内胎儿生长受限、新生儿感染甚至宫内胎儿死亡等不良妊娠结局[9]。若GBS感染不及时进行合理、有效地治疗，可能导致新生儿智力发育迟缓、视听觉丧失等远期后遗症。孕妇携带GBS是目前临床中导致新生儿晚发感染的重要因素之一[10]。感染GBS后，新生儿伴随出现脑积水、智障、耳聋等神经系统后遗症可能性显著升高，对新生儿的生长发育及心理发育均造成严重不良影响[11]。因此临床中应对GBS感染给予高度的重视，加强早期筛查，并采取合理方案进行干预[12]。

本研究采用显色培养检测对GBS进行检测，检测过程中通过增菌显色培养基可直接对结果进行判定，若结果为阴性则继续使用血平板和二分格平板对可疑菌落进行鉴定，可用过琼脂诱导GBS转化为β溶血型，提高GBS的检出率[13-14]。GBS 运送增菌显色培养基可有效缩短检测时间，降低漏检率，提高GBS 检出率，成本更低且结果判读更简便，可有效提高围产期妇女的GBS感染检出率，起到高效辅助临床的作用[15]。对研究结果深入探讨发现，GBS阳性组不良妊娠结局率明显高于GBS阴性组，GBS阳性组新生儿不良结局率明显高于GBS阴性组。进一步分析发现，GBS感染是导致孕妇不良妊娠结局和新生儿感染的独立性危险因素。结果提示不良妊娠结局和新生儿不良结局均与GBS 感染密切相关，分析认为妊娠期妇女免疫力降低，机体防御能力减弱，而GBS可逆行导致感染出现，经炎症细胞吞噬处理后GBS可与细菌蛋白水解酶协同作用直接进行侵袭，降低胎膜张力并引起胎膜早破的发生。

生殖道中GBS定植后其对绒毛膜具有较强的穿透力和吸附作用，进而产生上行对胎膜造成感染，通过细菌产生的蛋白水解酶和炎症细胞的吞噬作用直接进行侵袭[16]。此外，GBS感染后可能导致孕产妇出现胎膜局部张力减低，导致患者出现胎膜早破[17]。进一步分析发现，胎膜早破后会导致产道内GBS与新生儿接触概率显著增加，因而在影响新生儿GBS感染出现胎膜早破的独立性危险因素。此外，新生儿GBS疾病与胎膜早破是阴道GBS定植发病的重要且常见的中介变量，但现阶段胎膜早破与产道内GBS感染间的因果关系以及作用机制仍未被证实和揭示，有待持续追踪分析。一般情况下，GBS感染后会导致孕妇出现阴道菌群失调，导致原有的生理平衡被打破，引起阴道菌群结构出现改变。此外，不良妊娠结局与阴道菌群平衡结构失衡密切相关[16]。但目前孕妇出现阴道菌群改变与新生儿GBS相关疾病的发生等是否存在必然联系或独立性影响因素仍未明确，且支原体、人乳头瘤病毒、衣原体等阴道常见的病原体、正常菌群或致病菌等其他菌群是否与GBS密切相关也是近年来临床研究的热点问题之一。GBS可释放前列腺素、细胞因子、蛋白水解酶等多种活性因子，刺激子宫收缩，并可能导致早产。此外，GBS穿膜能力较强，感染胎盘绒毛膜引起宫内感染、绒毛膜羊膜炎，降低胎儿储备能力，降低胎儿机体免疫力，改变宫内微环境，诱发胎儿窘迫，增加剖宫产概率。此外，GBS感染还可能导致新生儿出现窒息、肺炎、感染等不良结局的出现，因而在临床中应予以高度重视。孕妇生殖道内若出现GBS定植是影响妊娠期孕妇及新生儿不良预后的独立性危险因素，并且可采集阴道分泌物对GBS情况进行检测。

综上所述，显色培养可有效检测GBS，且GBS感染是导致妊娠期妇女不良妊娠结局和新生儿感染的独立性危险因素，在临床中应予以足够的重视。但本研究并未对新生儿进行长期追踪以分析其远期随访结局，有待后续追踪分析。