梨种质资源对黑斑病的田间抗性鉴定

李庆余， 于强， 王义菊， 牟红梅， 姜福东， 李元军

(烟台市农业科学研究院，山东 烟台 265500)

由链格孢属真菌侵染引起的梨黑斑病是梨树主要的病害之一，在我国少数栽培砂梨和西洋梨的产区发生严重。梨黑斑病主要为害梨树叶片、新梢和果实，引起梨树早期落叶和大量病果，给梨农造成严重的经济损失[1]。目前，防治梨黑斑病的方法仍然是化学药剂防控为主，长期使用化学药剂易导致病原菌的抗药性增强，且污染环境[2]。要从根本上解决黑斑病的为害，需要筛选出品质优良的抗性资源，通过杂交和定向改良育种的方式，选育出优质抗病品种。近年来，国内梨研究学者关于不同梨品种抗黑斑病的研究报道较多，筛选出了一批高抗黑斑病的品种，但鉴定主要集中在砂梨品种上，西洋梨品种鉴定的数量较少，不能系统反映西洋梨品种对黑斑病的抗性[3-8]。烟台农科院依托国家梨产业技术体系烟台综合试验站、山东省良种工程项目，收集保存以西洋梨为主的种质资源96个，通过对种质资源圃叶片黑斑病田间自然发病情况的调查，期望筛选出优良的抗性种质资源，为下一步抗病育种提供基础。

1 材料与方法

试验在烟台农科院种质资源圃进行。供试品种96份，于2009年在黄金梨、丰水梨、绿宝石梨树上高接改换而来，株行距为2 m×4 m，疏散分层形管理。2019年7月调查，每品种选3株树，在树冠的东、南、西、北四个方向随机取样调查病叶率和病情指数，每株树调查100张叶片。

病情指数的计算和分级标准参照梨种质资源描述规范和数据标准[9]。0级为无病斑；1级为病斑占叶面积的10%以下；3级为病斑占叶面积的10%～25%；5级为病斑占叶面积的26%～40%；7级为病斑占叶面积的41%～65%；9级为病斑占叶面积的65%以上。根据受害级别，计算黑斑病病情指数。

式中：VBI为黑斑病病情指数；xi为各级病叶代表级数；ni为各级病叶数；N为总叶数。

2 结果与分析

2.1 叶片黑斑病发病情况

由表1可以看出，供试96份品种间叶片发病率在0～100%之间，其中保利阿斯卡、盘克汉姆、巴梨、长把梨、雪花、早酥、金水1号、黄金、丰水、安梨、伏香等53份品种未发现黑斑病叶片；小伏洋梨、茄梨、金花4号、火把、红香酥等22份品种叶片发病率较低，都在30%以下；考密斯、哈依兰德、莱克拉克、李克特、海兰特、阿巴特、威宁大黄7份品种叶片发病率较高，都在90%以上。表明96份梨品种梨黑斑病叶片发病率差异较大。按照病情指数标准，保利阿斯卡、盘克汉姆、巴梨、长把梨、雪花、早酥、金水1号、黄金、丰水、安梨、伏香等85份梨品种病情指数都在10以下，只有考密斯、哈依兰德、海兰特、李克特、莱克拉克、威宁大黄等11份品种病情指数在10以上。表明96份梨品种对黑斑病的抗性表现不一。

表1 梨资源圃品种黑斑病的发病情况

2.2 不同梨品种欧氏距离聚类

对96份梨品种资源采用欧氏距离聚类平均法连锁聚类分析。由图1可以看出，当连锁距离为9.13时，被分为抗梨黑斑病、中抗梨黑斑病、感梨黑斑病、高感梨黑斑病4个类群。莱克拉克、威宁大黄聚为一类，病情指数最高，叶片发病率为100%，为高感梨黑斑病品种；海兰特、阿巴特、李克特、考密斯、哈依兰德聚为一类，病情指数24.75～32.32，叶片发病率90%以上，为感梨黑斑病品种；大巴梨、凯斯凯德、路易斯、秋洋梨、青松、绿云、spalding、保9、贵妃、砀山酥梨聚为一类，病情指数6.67～15.70，叶片发病率37.50%～73.64%，为中抗梨黑斑病品种；剩余保利阿斯卡、盘克汉姆、巴梨、长把梨、雪花、早酥、金水1号、黄金、丰水、安梨、伏香等79份梨品种聚为一类，病情指数在5.44以下，叶片发病率41.67%以下，为抗梨黑斑病品种。

图1 不同梨品种欧氏距离聚类分析

2.3 不同种类梨对黑斑病的田间抗性

由图1、表2可以看出，新疆梨、秋子梨、白梨均被聚类在抗和中抗梨黑斑病品种，可能是本身抗病性较强，也可能与调查品种较少有关；83.3%的砂梨品种属于抗性品种，尤其是日韩砂梨及近年选育的砂梨品种普遍抗性较强，仅威宁大黄等老的砂梨品种抗性较弱；西洋梨抗性品种仅占67.5%，15%属于感病和高感品种；砂梨抗性整体强于西洋梨；种间杂交品种均被聚类在抗梨黑斑病品种上，因此种间杂交是一个获得高抗黑斑病品种的途径。

表2 不同种类梨对黑斑病的田间抗性比较

3 小结

96份梨品种黑斑病叶片发病率和病情指数差异较大。采用欧氏距离聚类平均法连锁聚类分析被分为抗梨黑斑病、中抗梨黑斑病、感梨黑斑病、高感梨黑斑病4个类群。其中，莱克拉克、威宁大黄为高感梨黑斑病品种；海兰特、阿巴特、李克特、考密斯、哈依兰德为感梨黑斑病品种；大巴梨、凯斯凯德、路易斯、秋洋梨、青松、绿云、spalding、保9、贵妃、砀山酥梨为中抗梨黑斑病品种；保利阿斯卡、盘克汉姆、巴梨、长把梨、雪花、早酥、金水1号、黄金、丰水、安梨、伏香等79份梨品种为抗梨黑斑病品种。不同种类梨对黑斑病抗性也存在差异，砂梨整体抗性强于西洋梨，种间杂交品种表现出对黑斑病较高的抗性，因此，种间杂交是一个获得高抗黑斑病品种的途径。