高效液相色谱法测定饮料中的阿力甜含量

2021-10-11李锐

食品安全导刊 2021年26期

李锐

（山西省检验检测中心食品与粮食检验技术研究所，山西太原 030012）

阿力甜是一种人工合成的甜度高、口感好、热量低的甜味剂，具有良好的贮存与加工稳定性，作为代糖物质被广泛用于饮料、糖果等食品加工领域[1]。然而，人工合成甜味剂都有着严格的适用范围与添加限量，超范围使用或过量添加会引起食用者出现不同程度的毒性表现，对人们的身体健康与食品行业发展不利，所以加强对饮料等销量较高、深受广大消费者追捧的日常食品中甜味剂的监管与检测非常必要[2-3]。GB 5009.263—2016[4]中规定了用高效液相色谱法检测食品中阿斯巴甜与阿力甜含量的方法，推荐使用DAD检测器和VWD检测器，本研究参照该标准，结合实验室现有设备，建立了HPLC-VWD法测定饮料中阿力甜含量的方法。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

雪碧、优酸乳（购自某超市）；阿力甜标准品（编号：99016-42-9，批号：B0002377）；甲醇、乙腈均为色谱纯；乙醇为优级纯；试验用水为一级超纯水。

Agilent 1260高效液相色谱仪（配紫外检测器）；AL104电子天平（精度0.0001g）；恒温水浴锅；高速离心机；涡旋混合器；Synergy超纯水机等。

1.2 试验方法

1.2.1 试样处理方法

（1）以碳酸饮料雪碧作为基质，准确称取5 g试样于50.0 mL烧杯中，在50 ℃恒温水浴锅中水浴除去CO2后转入25.0 mL容量瓶中，用超纯水定容，摇匀，经0.45 μm水系滤膜过滤，上机检测。

（2）以含乳饮料优酸乳作为基质，准确称取5 g试样于50.0 mL离心管中，加入10 mL乙醇，轻轻振摇5次，静置1 min，于4 000 r/min离心机中离心5 min，将上清液转入25.0 mL容量瓶中，用8 mL乙醇+水（2+1）洗涤沉淀，离心后将上清液合并至同一容量瓶，用乙醇+水（2+1）定容，摇匀，经0.45 μm水系滤膜过滤，上机检测。

1.2.2 标准溶液配制

准确称取0.025 0 g阿力甜标准品，用超纯水溶解并定容至50.0 mL，配制得浓度为0.5 mg/mL的阿力甜标准储备液。

准确移取0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL和2.0 mL阿力甜标准储备液至5支10.0 mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，摇匀，配制成质量浓度为5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、25.0 μg/mL、50.0 μg/mL和100.0 μg/mL的标准工作系列。

1.2.3 液相色谱条件

色谱柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱温30 ℃；流动相：甲醇+水（40+60），流速0.8 mL/min，等度洗脱；进样量：20 μL；检测器为VWD（200 nm）。

2 结果与分析

2.1 阿力甜标准溶液的色谱分离分析

采用上述仪器条件，在25 min内能完成色谱分析，阿力甜标准溶液的峰型尖锐对称，且与杂质峰较好分离，阿力甜标准溶液的色谱图如图1所示。

图1 阿力甜标准溶液色谱图

2.2 线性范围及检出限

将配制的标准工作系列在上述色谱条件下进行测定，以标准系列点浓度为横坐标，对应的色谱峰面积为纵坐标绘制标准曲线。标准曲线方程为f(x)=57.946 29x+15.991 24，相关系数r=0.999 96，由此可见，阿力甜在5.0～100.0 μg/mL范围内线性关系良好。根据3倍信噪比对应的目标物含量计算方法检出限，得该方法的检出限为0.006 g/kg。