不同孕期血清LAP分析及参考区间的建立

周慧聪，朱艳婷，王子铭，黄 梅，严孝岭，虞 伟

(南京大学医学院附属泰康仙林鼓楼医院检验科，南京 210046)

随着生育政策的开放，每年约有1 600万名育龄妇女进入妊娠状态[1]，寻找与妊娠有关的检测指标显得十分重要。目前，抽血监测妊娠的检测项目有孕酮及人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)[2]。血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)用于生化检测的常规项目，常常作为评价肝功能。LAP是一种蛋白水解酶[3]，在肝脏、肾脏、胰腺及子宫肌层表达水平较多[4]。孕妇体内含有两种LAP，一种由普通组织细胞产生，另一种由胎盘滋养层细胞产生[5-6]。因此，研究孕妇体内LAP与孕酮、β-HCG同样重要。本研究通过受试者工作特征(ROC)曲线[7]确定LAP判断妊娠的灵敏度和特异度，并将不同孕期妇女进行分组，研究中孕期和晚孕期LAP增长速度，运用多元logistics回归[8]进行分析，并用Hoffmann法建立不同孕期LAP参考区间，提高LAP检测对妊娠妇女的临床指导作用，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月至2019年12月本院产检正常的2 377例孕妇为研究对象，按照孕期分为早孕组(637例)、中孕组(894例)和晚孕组(846例)，年龄24～36岁。纳入同期本院86例流产孕妇作为流产组，纳入标准：(1)妊娠妇女；(2)出现腹痛、出血、宫口扩张入院，诊断为流产。另选取同期本院体检的200例健康妇女作为对照组，年龄24～36岁。

1.2 方法

通过医院LIS系统收集数据，包括性别、年龄、诊断、LAP、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)结果，选取ALT、AST结果正常的孕妇进行LAP检测，并进行数据分析。LAP测定采用L-亮氨酸-p-硝酰基苯胺基质法，检测仪器为LABOSPECT008全自动生化分析仪，检测试剂为LABOSPECT试剂，所用定标液为配套定标液，检测期间室内质控均在控。统计中孕组和晚孕组做过2次LAP检测的孕妇(50例、261例)，计算两次检测间隔时间，并分析两组LAP增长速度。

1.3 统计学处理

采用SPSS23.0软件进行数据分析，计量资料以M(P25，P75)表示，比较采用非参数检验中克鲁斯卡尔-沃利斯检验、曼-惠特尼检验，应用ROC曲线计算灵敏度和特异度，相关性采用logistic回归分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 LAP判断妊娠的ROC曲线

绘制ROC曲线，结果显示曲线下面积(AUC)为0.989，灵敏度为96.6%，特异度为99.9%，Cut-Off值为67.5 U/L，见图1。

图1 LAP判断妊娠的ROC曲线

2.2 不同孕期间LAP水平比较

早孕组、中孕组、晚孕组较对照组和流产组LAP水平升高，晚孕组、中孕组LAP水平较早孕组高(P<0.05)，见表1。晚孕期LAP增长速度比中孕期快，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 不同孕期LAP水平比较[M(P25,P75)，U/L]

表2 中孕期与晚孕期LAP增长速度比较[M(P25,P75)，U·L-1·d-1]

2.3 多元logistics回归

以流产、中孕、晚孕为因变量，LAP为协变量进行多元logistics回归，以流产为参考类别，LAP每提升1个单位水平，孕妇处于中孕期的可能提升1.158倍[OR=1.158(95%CI：1.121～1.195，P<0.05)]，处于晚孕期的可能性提升1.197倍[OR=1.197(95%CI：1.159～1.236，P<0.05)]。

2.4 Hoffmann法建立不同(早、中、晚)孕期LAP参考区间

早孕组回归方程为Y=1.537X+44.300,R2=0.906 8,参考区间为48.14～194.16 U/L；中孕组回归方程为Y=3.140X+86.830,R2=0.945 6,参考区间为94.68～392.98 U/L；晚孕组回归方程为Y=1.857X+103.800,R2=0.936 2,参考区间为108.44～284.86 U/L，且与原参考区间0～70 U/L比较，差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨 论

近年来，随着婚育年龄越来越高，怀孕后胎儿发育不良、停止发育及自然流产患者屡见不鲜[9-10]，其中原因不明的反复自然流产率为1%～5%[11]。目前通过血液监测孕妇妊娠稳定性的指标有孕酮、β-HCG、雌二醇(E2)、糖类抗原-125(CA125)[12],其中妊娠早期孕酮、血清β-HCG、E2水平检测对胚胎停育的预测具有较高的临床预测价值[13]，但妊娠10周左右β-HCG会达到峰值，中、晚期会生理性下降，寻找一种妊娠中晚期的特异性标志物监测妊娠状态显得尤为重要。还有研究表明，胎盘中的P-LAP对维持正常妊娠具有重要作用，P-LAP也被称为催产素酶，在妊娠第37周可以达到高峰，分娩结束后可以达到正常值[14]。还有研究表明，随着孕期的增加，若LAP没有达到高峰，有可能是胎盘组织功能发生异常，LAP或许会随之下降[15-16]。可见LAP在中晚期妊娠中也有着重要作用。

本研究通过绘制ROC曲线，发现LAP对判断妊娠的灵敏度及特异度都很高，进一步证实LAP可以作为孕期监测孕妇妊娠情况的指标。通过分组进行非参数检验，证实妊娠组与对照组、妊娠组与流产组LAP水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)，以流产组为参考类别，将中孕组与晚孕组对流产组进行多元logistic回归， LAP每提升1个单位，孕妇处于中孕期的可能提升1.158倍,处于晚孕期的可能性提升1.197倍。本研究还计算中孕组与晚孕组LAP的增长速度，发现晚孕组LAP增长速度较快。未来检验科可以通过优化LIS系统，计算孕妇每次产检LAP值，用2次LAP差值除以2次产检相隔天数，计算2次产检间LAP增长速度，从而作为监测妊娠的一个指标，这样可以提高LAP监测的作用，对产检结果有指导作用。LAP作为肝功能检测的指标已运用于临床中，少有文献报道LAP用于孕检项目，介于LAP在妊娠的灵敏度及特异度很高，将LAP加入孕检项目，可以作为孕期检测妊娠的指标。

本研究还用Hoffmann法[17-21]建立不同孕期LAP的参考区间。试剂说明书给出的参考区间的研究对象是健康成年人，没有单独建立孕妇的参考区间，也未见关于孕妇LAP参考区间的报道。运用健康人群的参考区间，孕妇化验单上LAP项目均显示增高，孕妇看到化验单有“异常增高值”难免会引起情绪上的紧张，但其属于“正常值”。本研究运用不同孕期正常孕妇的LAP检测结果建立参考区间，可以运用于临床，既可以指导医生判断不同妊娠妇女的妊娠状况，也可以指导产检孕妇正确了解自身身体情况。

综上所述，本文研究了LAP判断妊娠的灵敏度及特异度，并探究LAP在中、晚孕期的增长速度，通过logistic回归确立OR值，并建立LAP在不同孕期的参考区间，较之前关于孕期LAP的研究进行了更深的探讨，也给临床提供了有实用价值的建议。