胰腺癌患者血清Kiss-1水平变化及临床意义

屠小龙 赵 颖 史国军 王永生 张婷素 胡梦奕

1.浙江省宁波市中医院肿瘤内科，浙江宁波 315016；2.海军军医大学附属长征医院中医科，上海 200433

胰腺癌是起源于胰腺导管上皮、腺泡细胞消化系统疾病的常见恶性肿瘤，早期症状隐匿且诊断困难，其恶性程度高，进展迅速，患者生存时间短，预后差[1-3]。亲吻素-1（Kisspeptin-1，Kiss-1）是恶性黑素瘤的转移抑制因子，在多种人类恶性肿瘤中Kiss-1 表达下调，且与肿瘤进展、侵袭转移和不良预后相关[4-6]。目前Kiss-1 与胰腺癌关系的报道少见，本研究通过检测胰腺癌血清Kiss-1水平，分析其与胰腺癌临床特征及预后的关系，以期为胰腺癌的临床预后预测及诊断治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2015 年1 月至2017 年12 月浙江省宁波市中医院（以下简称“我院”）收治的胰腺癌患者132例为胰腺癌组，其中男75例，女57例；年龄48～72岁，平均（60.35±3.21）岁。纳入标准：①均为胰头癌，术后病理证实为胰腺癌；②初诊、入组前未接受放、化疗；③术后给予吉西他滨联合埃罗替尼化疗，配合随访，随访资料完整。排除标准：①合并壶腹癌、胆总管癌、肝癌等其他部位恶性肿瘤；②胰腺囊性病变、胰腺损伤性疾病；③恶病质、血液疾病、免疫系统疾病。另选择我院同期收治胰腺良性疾病患者57例为良性病变组及我院同期门诊体检健康者53 名为对照组。良性病变组男36例，女21例；年龄51～70岁，平均（60.09±3.17）岁。对照组男29 名，女24 名；年龄50～70岁，平均（60.11±3.12）岁。三组年龄、性别比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），具有可比性。本研究已获得我院医学伦理委员会批准。

1.2 观察指标及检测方法

胰腺癌组术前（良性病变组入院72 h 内，对照组体检当日）采集肘静脉血3 ml 注入干燥试管，4℃、2000 r/min 离心10 min（离心半径15 cm）取血清检测，酶联免疫吸附试验检测血清Kiss-1水平，试剂盒购于法国STAGO 公司，批号160102。美国雅培i2000全自动电化学发光免疫分析仪检测胰腺癌相关肿瘤标志物糖类抗原199（carbohydrate antigen 199，CA199)、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）水平，试剂盒购自北京科美东雅生物技术有限公司（批号：151003）。

1.3 随访

胰腺癌组患者出院后均定期门诊复查，使用电话或微信随访3 年，随访结束后将自病理确诊至死亡的时间定义为总生存时间。

1.4 统计学方法

采用SPSS 25.0 对所得数据进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（）表示，组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t 检验。计数资料采用例数表示，组间比较采用χ2检验。采用Pearson 相关系数分析相关性，采用多因素Cox 回归分析影响因素，Kaplan-Meier 法进行生存分析，Log-Rank 检验差异性。采用受试者操作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC 曲线）分析Kiss-1 预测胰腺癌预后的价值。以P ＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清Kiss-1、CEA、CA199水平比较

胰腺癌组血清Kiss-1水平低于良性病变组和对照组，CEA、CA199水平均高于良性病变组和对照组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。良性病变组与对照组血清Kiss-1、CEA、CA199水平比较，差异无统计学意义（P ＞0.05）。见表1。

表1 三组血清Kiss-1、CEA、CA199水平比较（）

表1 三组血清Kiss-1、CEA、CA199水平比较（）

注：与对照组比较，aP ＜0.05；与良性病变组比较，bP ＜0.05。Kiss-1：亲吻素-1；CEA：癌胚抗原；CA199：糖类抗原199

2.2 血清Kiss-1 与CEA、CA199 相关性

胰腺癌组血清Kiss-1水平与CEA、CA199水平均呈负相关（r=-0.687、-0.703，P ＜0.001）。

2.3 不同临床特征胰腺癌患者血清Kiss-1水平比较

TNM 分期Ⅲ～Ⅳ期、发生肝转移的胰腺癌患者血清Kiss-1水平低于TNM 分期Ⅰ～Ⅱ期、未发生肝转移的胰腺癌患者，差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表2。

表2 不同临床特征胰腺癌患者血清Kiss-1水平比较（pg/ml，）

表2 不同临床特征胰腺癌患者血清Kiss-1水平比较（pg/ml，）

注：Kiss-1：亲吻素-1

2.4 不同血清Kiss-1水平胰腺癌患者预后差异

低Kiss-1水平组3 年生存率为2.63%（2/76），低于高Kiss-1水平组的30.36%（17/56）（χ2=12.20，P=0.001）。见图1。

图1 不同血清Kiss-1水平胰腺癌患者生存曲线

2.5 影响胰腺癌患者预后的Cox 回归分析

以胰腺癌患者随访期间死亡（0=否，1=是）为因变量，以TNM 分期（0=Ⅰ～Ⅱ期，1=Ⅲ～Ⅳ期）、肝转移（0=否，1=是）及Kiss-1水平（0=≥42.13 pg/ml，1=＜42.13 pg/ml，）为自变量。多因素Cox 回归分析显示TNM 分期高、有肝脏转移、低Kiss-1水平是胰腺癌患者预后的独立危险因素（OR ＞1，P ＜0.05）。见表3。

表3 影响胰腺癌患者预后的多因素Cox 回归分析

2.6 Kiss-1 预测胰腺癌预后的价值分析

ROC 曲线结果显示，Kiss-1 预测胰腺癌预后的截断值为35.16 pg/ml，曲线下面积为0.867（95%CI：0.790～0.944，P ＜0.001），灵敏度为72.73%，特异性为66.67%。见图2。

图2 亲吻素-1 预测胰腺癌预后的受试者操作特征曲线

3 讨论

胰腺癌是最致命的恶性肿瘤之一，2012 年全球约33.8 万人患有胰腺癌，排名恶性肿瘤第11 位[8]，2012 年我国胰腺癌患者占全球19.45%，死亡患者占全球的19.27%[9]。肿瘤侵袭和转移等恶性生物学行为是导致治疗失败、肿瘤复发、患者死亡的重要因素，识别与胰腺癌病理特征和预后相关的分子机制可为临床分子靶向治疗，预后评估提供新的靶点和参考。

Kiss-1 是一个重要的肿瘤转移抑制基因，位于人类染色体的长臂1，在胎盘、胰腺、肝脏、骨骼肌等多种组织中广泛表达，Kiss-1 在血清中可被迅速加工成为小分子活性肽，参与代谢、调节生殖神经内分泌轴、维持体内平衡、调节细胞迁移等作用[10-13]。在恶性肿瘤中Kiss-1 发挥抑癌作用，口腔鳞状细胞癌中Kiss-1表达下调，Kiss-1 低表达与淋巴结转移、TNM 分期、局部复发及总生存时间均有关[4]，Kiss-1 在结直肠癌组织中表达低于癌旁组织，Kiss-1 低表达与结直肠癌分化、浸润、转移、临床分期和5 年生存情况均有关[14]，Kiss-1 表达与胃癌肿瘤分期、淋巴结转移和总生存时间也有关[15]。但Kiss-1 在胰腺癌的表达特点尚不清楚，本研究发现胰腺癌患者血清Kiss-1水平低于良性病变组和对照组，Kiss-1水平与CEA、CA199 呈负相关，CEA、CA199 是胰腺癌诊断的敏感肿瘤标志物[16-19]，提示Kiss-1 表达缺失可能促使胰腺癌发生。本研究发现Kiss-1水平与分化程度、TNM 分期、肝转移有关，体外报道显示转染Kiss-1 后胰腺癌细胞的侵袭指数显著降低[20]，提示Kiss-1 参与胰腺癌细胞迁移和侵袭过程，但是机制尚不清楚，推测为Kiss-1 通过结合并激活G 蛋白偶联受体54，诱导磷脂酰肌醇4，5-二磷酸水解，提高细胞内钙浓度，激活细胞内信号通路，抑制细胞增殖和分化，发挥抗转移和抗肿瘤等抑癌基因作用[21]。Kiss-1 与G 蛋白偶联受体54 结合后还可通过激活磷脂酶C 产生第二信使肌醇联结和双甘酯，抑制细胞增殖和促进细胞凋亡[22]。其次，Kiss-1 通过以下不同机制抑制肿瘤细胞侵袭转移，分别为：①Kiss-1通过抑制基质金属蛋白酶9 表达及其介导的肿瘤细胞上皮间质转化，抑制肿瘤细胞浸润和转移[23]。②Kiss-1通过阻止远处转移细胞生长和定植组织癌细胞侵袭转移[24]。③Kiss-1 还可通过激活细胞外信号调节激酶1来抑制胰腺癌PANC-1 细胞迁移[25]。因此Kiss-1 缺失可导致胰腺癌恶性进展。本研究生存分析显示血清低Kiss-1水平组3 年生存率低于高Kiss-1水平组，Cox回归分析结果显示低Kiss-1水平与胰腺癌患者预后有关，ROC 曲线分析Kiss-1 预测胰腺癌预后的曲线下面积为0.867，提示Kiss-1 可以作为胰腺癌患者预后预测的无创血清学指标。

综上，胰腺癌患者血清Kiss-1水平降低，低Kiss-1水平与胰腺癌患者肿瘤分期、侵袭转移恶性行为、低生存率有关。监测血清Kiss-1水平可以为胰腺癌预后预测提供参考。