动物源性食品中β-受体激动剂残留检测技术研究进展

2021-09-24冯腾垒高庆辉林文秀

今日畜牧兽医 2021年7期

张蕾，冯腾垒，曹楠，高庆辉，林文秀，张琼

（1.石家庄市畜产品和兽药饲料质量检测中心 050041；2. 石家庄市农业行政综合执法支队 050000）

β-受体激动剂具有类似肾上腺素的功能，俗称瘦肉精，其母核为苯乙醇胺类结构，根据取代基不同，可分为苯酚类和苯胺类，其基本化学结构式如图1所示。

图1 β-受体激动剂基本结构

β-受体激动剂在医学上具有兴奋呼吸道平滑肌、降低微血管通透性的作用，因此常被用于治疗支气管疾病。该类化合物还能够增加动物体内蛋白质含量及瘦肉率，提高饲料的利用率，因此常被一些不法商家用于畜牧行业中，但其性质稳定，在动物源性食品中代谢困难，容易聚积。当人体食入含有β-受体激动剂的动物源性食品后，会造成人体神经系统损伤，因此该类化合物被严禁用于动物饲养过程中。目前常用的检测方法有液相-质谱联用法、高效液相色谱法、酶联免疫检测技术、表面增强拉曼光谱等，本文综述了β-受体激动剂常用检测方法，以其能够为未来动物源性食品中该类化合物的残留检测提供依据。

1 液相-质谱联用法

液相色谱-串联质谱法检测化合物具有灵敏度高、特异性强等特点，常被用于检测畜产品中的β-受体激动剂类。刘新辉等在前处理过程采用酸水解法，并利用超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS)检测畜产品中β-受体激动剂类物质，检测限达到0.43～0.50μg/kg，回收率为80.2%～106.0%，且与国家标准方法相比，灵敏度高，前处理操作简单。罗辉泰等利用具有混合分离功能的新型色谱柱，结合同位素稀释法，建立了高效液相色谱-质谱串联法，可同时检测猪肉中26种β-受体激动剂，检测限达到0.03～0.1μg/kg，定量限为0.1～1.0μg/kg。郭平等在猪尿样品中测定β-受体激动剂时，前处理采用乙酸铵缓冲液和β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶进行酶解，并经阳离子固相萃取柱净化后，建立了超高效液相色谱-串联质谱方法(UHPLC-MS /MS)检测猪尿液品中22种β-受体激动剂的方法，由于该试验过程优化了前处理过程中酶解过程和固相萃取柱的淋洗方式，提高了抗干扰能力与方法灵敏度。

2 高效液相色谱法

高效液相色谱法(HPLC)是以液体作为流动相，并结合高压输液系统将具有不同极性的流动相泵入含有色谱柱中，在柱内利用各成分在两相系统中吸附能力不同，从而实现对目标化合物与杂质分子的分离检测。李娜等以甲醇-磷酸二氢钠混合液作为流动相，用高效液相色谱结合紫外检测器，测定猪肉及血清中的盐酸克伦特罗含量，检测限为1.8μg/kg，加标回收率为87.4%～99.2%。朱晓艾等采用C18为色谱柱，用乙腈：0.02mol/L乙酸铵溶液(0.1%甲酸)=25：75作为流动相，建立了高效液相色谱法检测猪肉中盐酸克伦特罗的检测方法，检测限达到25μg/kg，回收率在88.55%～94.03%。张群等对样品前处理方法和色谱条件进行优化，延长超声提取时间，利用C18固相萃取柱净化，以甲醇∶磷酸二氢钠=40∶60作为流动相，结合反相高效液相色谱建立了鲜肉中盐酸克伦特罗的残留检测方法，检测限达到0.01 μg/mL，加标回收率在75%～82.5%之间。

3 酶联免疫检测技术

酶联免疫检测技术(ELISA)是指以酶为标记物，以抗原和抗体之间的特异性结合为基础的一种分析方法，其特点是灵敏度高、操作简便，适用于大批量样品中β-受体激动剂的残留检测。孙明君等利用ELISA方法建立了进出口食用动物与饲料中的盐酸克伦特罗的残留检测方法，该试验了确立了包被抗原的最适质量浓度以及抗体的最佳稀释度，检测限达到0.05ng/mL，加标回收率为94.52%。

4 表面增强拉曼光谱

拉曼光谱属于分子振动光谱，可以反映分子的特征结构，且利用拉曼光谱进行检测具有分析时间短、前处理过程简单、损耗少等特点，但是直接用常规拉曼光谱仪进行检测，目标物检测限难以达到要求。因此，在应用时常加入表面增强剂，以增强化合物的散射信号。甘盛等以银纳米颗粒溶胶作为表面信号增强剂，利用拉曼光谱技术实现对硫酸特布他林、盐酸班布特罗、盐酸氯丙那林等3种β-受体激动剂的定性和定量检测；近年来，表面增强拉曼光谱法不仅能用于检测动物源性食品、动物尿液中的β-受体激动剂的残留检测，还可用于饲料中β-受体激动剂的检测分析，但该方法稳定性较差，还需进一步进行探索完善。