血清糖类抗原125联合人附睾蛋白4检测在上皮性卵巢癌病情评估、预后生存预测中的应用研究

毛爱荣，李战飞，袁晓雁，韩玉新，陈 静

(1.中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院焦作院区，河南 焦作 454150；2.南方医科大学南方医院，广东 广州 510515)

卵巢癌多发生于五十岁左右的女性，其生殖恶性肿瘤中发病率、死亡率排名靠前，据相关研究资料报道，其中上皮性卵巢癌发病率高达90%[1]。由于卵巢位置特殊，临床表现隐匿，患者日常难以发觉，导致上皮性卵巢癌早期诊断率较低。晚期上皮性卵巢癌手术治疗难度大，难以达到根治的目的，患者预后情况不佳。糖类抗原125(CA125)为检测卵巢癌的肿瘤标志物之一，相关研究指出在卵巢癌相关肿瘤标志物中，总敏感性以CA125最高，但CA125对早期卵巢癌敏感性不高[2，3]。不少学者发现，肿瘤标志物与卵巢癌之间存在千丝万缕的联系，于是开始联合新的肿瘤标志物检测以为诊断卵巢癌寻求新的准确度高的检测方法。人附睾蛋白4(HE4)是从人体附睾上皮远端中分离出来，既往报道[4]HE4在卵巢癌组织中呈高表达状态。为临床诊治上皮性卵巢癌提供理论支持，本研究收集上皮性卵巢癌及健康女性的血清，对比两组CA125、HE4水平及与病理特征的关系，用ROC曲线了解其预后情况。现总结报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料2016年5月至2017年5月解放军第九八八医院焦作院区收治的上皮性卵巢癌患者54例，纳入标准：①均经腹部、盆腔MRI及CT检查，提示上皮细胞增生活跃及核异型性改变；②术后均经本院病理检查明确；③未合并重要器官严重疾病，预估生存期≥6个月。排除标准：①手术禁忌证者；②因精神障碍无法配合检查者；③纳入研究前经过药物及化疗治疗者。将符合标准的54例患者设为观察组，绝经前24例，绝经后30例；年龄41～75岁[(55.41±5.74)岁]。选取同期进行体检的女性健康人员60例设为对照组，均进行腹部、盆腔MRI及CT检查，未发现卵巢包块；无恶性疾病史，无任何外部疾病征兆者。年龄(55.57±5.89)岁；绝经前32例，绝经后28例。

1.2 方法对照组、观察组(术前)采血前需要坐位或仰卧体位休息10 min以上，清晨(空腹)抽取静脉血5 ml(未绝经的人群避开经期抽血)。室温放置15分钟，离心，避免颗粒物质干扰并分离血清，放入-80 ℃冰箱保存待测，所有标本需一次室温溶解解冻后4 h内完成检测。人CA125、HE4的ELISA试剂盒均由上海江莱生物科技有限公司提供；全自动酶标仪由德国罗氏诊断有限公司提供。检测过程严格按照说明书进行。

1.3 判断标准CA125检测标准：>35 μ/ml为阳性，<35 μ/ml为阴性；HE4检测标准：>70 pmol/L为阳性，<7070 pmol/L为阴性。

1.4 随访详细记录两组患者治疗后无进展生存时间(PFS)，即患者开始接受治疗，到观察疾病发展或因肿瘤增大、转移死亡时间；总生存时间(OS)，即患者开始治疗到最后一次随访或患者死亡的时间。

1.5 统计学方法应用SPSS 22.0软件对数据进行分析。CA125及HE4阳性、阴性表达情况以n(%)表示，比较采用χ2检验；上皮性卵巢癌患者病理特征等资料以均数±标准差描述，比较采用t检验；绘制ROC曲线，Keplan-meier生存分析，使用log-rank法进行检验，影响上皮性卵巢癌患者预后的相关因素采用非条件单因素和多因素Logistic回归分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HE4、CA125在上皮性卵巢癌及健康女性中的表达情况CA125及HE4在观察组中的阳性表达率分别为70.37%、77.78%，均显著高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 两组HE4、CA125的表达情况比较

2.2 不同CA125、HE4表达患者病理特征情况分析患者的绝经状态、组织病理学类型与CA125、HE4表达差异无统计学意义(P>0.05)；不同年龄、肿瘤浸润深度、病理学分级比较，CA125、HE4阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)；在FIGO分期中，Ⅲ～Ⅳ期阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期阳性表达率(P<0.05)；盆腔淋巴结阳性、腹主动脉旁淋巴结阳性、腹水的上皮性卵巢癌阳性表率显著高于无淋巴结转移、无腹水者(P<0.05)。见表2。

表2 不同CA125、HE4表达患者病理特征情况分析 (n)

2.3 CA125、HE4与上皮性卵巢癌预后的关系以电话随访或门诊复查的方式对54例上皮性卵巢癌患者随访3年(随访截止时间2020年5月)，回访率100%，随访时间(0.81±1.84)年。生存分析显示CA125及HE4表达阴性者生存期显著长于表达阳性者，Keplan-meier生存曲线明显不同(χ2=4.500，P=0.034；χ2=6.150，P=0.013)。CA125阴性、阳性患者半数生存期分别为(40.12±2.65)月、(30.47±2.54)月，HE4阴性、阳性患者半数生存期分别为(40.23±2.57)月、(31.27±2.77)月。见图1、图2。

图1 CA125阳性、阴性表达生存时间比较

图2 HE4阳性、阴性表达生存时间比较

2.4 不同临床特征患者3年生存率比较不同CA125、HE4、年龄、FIGO分期、盆腔淋巴结阳性、腹主动脉旁淋巴结阳性、腹水、浸润深度、病理学分级的上皮性卵巢癌患者3年生存率比较，差异有统计学意义(P<0.05)；不同绝经状态、组织病理学类型的患者3年生存率比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 不同临床特征患者3年生存率比较

2.5 影响上皮性卵巢癌患者预后生存的多因素分析CA125阳性、HE4阳性、FIGO分期为Ⅲ～Ⅳ期、盆腔淋巴结阳性、腹主动脉旁淋巴结阳性、有腹水、浸润深度≥1/2、病理学分级(G3)为影响上皮性卵巢癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)；年龄非影响上皮性卵巢癌患者预后的独立危险因素(P>0.05)。见表4。

表4 影响上皮性卵巢癌患者预后生存的危险因素分析

3 讨论

卵巢癌为女性生殖系统疾病中死亡率最高的妇科恶性肿瘤，当患者出现典型的腹水、腹胀、腹部包块时，多为卵巢癌晚期，手术及化学治疗效果欠佳，难以提高生存率。尽早发现卵巢癌对改善患者生活质量、提高生存率有重要意义。

目前，CA125与HE4在上皮性卵巢癌中的研究较少，本文采用化学发光微粒子免疫检测法检测其在上皮性卵巢癌的表达情况，发现CA125及HE4在观察组中的阳性表达率均显著高于对照组(P<0.05)，这一研究结果与既往文献报道一致[5]。本研究分析CA125、HE4与上皮性卵巢癌患者病理特征的关系，得出：年龄越大、肿瘤浸润深度越深、盆腔淋巴结阳性、腹主动脉旁淋巴结阳性、有腹水、病理学分级为G3的上皮性卵巢癌CA125、HE4阳性表达率更高(P<0.05)；在FIGO分期中，Ⅲ～Ⅳ期阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期阳性表达率(P<0.05)，提示排除其他良性病变因素的影响，CA125与HE4表达呈阳性者，需考虑出现病灶转移、腹水的可能，需尽早完善相关检查并积极进行早期治疗。

生存分析显示CA125及HE4表达阴性者生存期显著长于表达阳性者(P<0.05)。本研究结果显示腹水(有)、CA125阳性、HE4阳性、FIGO分期(Ⅲ～Ⅳ期)、盆腔淋巴结阳性、腹主动脉旁淋巴结阳性、浸润深度(≥1/2)、病理学分级为G3的上皮性卵巢癌患者预后不佳(P<0.05)，这与唐梅等[6]报道结果相似。分析其原因：CA125广泛存在于细胞组织中，属于可被单克隆抗体OC125结合的糖蛋白，有学者报道其与大分子糖蛋白抗原类似，在女性怀孕初期时的胚胎发育中会出现表达，在胚胎出生后消失，但在上皮性卵巢癌组织中会出现，可见其与卵巢上皮癌细胞之间存在密切联系[7～9]。但有较多学者研究报道，其在卵巢囊肿等良性疾病中均均呈高表达状态，因此易导致误诊、漏诊[10～12]。HE4属于抑蛋白酶家族，是一种呈酸性的蛋白质，分子量为25KDa，在女性生殖系统细胞中成高表达状态[13]。多项相关研究指出，HE4在肺癌、乳腺癌、胰腺癌中呈中到高水平表达，在肝癌、胃癌、结肠癌中呈低水平表达[14，15]。由于本研究中，纳入样本量较少，实验结果难免存在偏倚，后续将扩大样本量进一步深入研究CA125、HE4与上皮性卵巢癌之间的关系。