急性脑出血患者骨桥蛋白、S-100β蛋白及基质金属蛋白酶-9水平变化及与神经功能恢复、预后的相关性分析

熊江波，杜 军，向 斌，张维波，刘 盛

(重庆市黔江中心医院神经外科，重庆 409700)

急性脑出血是最严重的脑血管疾病之一，该病起病急，病情程度严重，具有较高的致残率及死亡率，严重威胁患者生命安全。据部分资料报道[1]，所有脑血管病变中约有15%为脑出血，且目前临床尚无有效的治疗措施，大多患者预后情况不理想。关于脑出血的发病机制尚未明确，但多认为与血脑屏障功能紊乱有关[2]。骨桥蛋白(ostepontin，OPN)是一种分泌型糖基化蛋白，参与脑出血的病理过程；S-100β蛋白是一种酸性钙结合蛋白，可促进神经胶质增殖、神经元分化及钙化；MMP-9是基质金属蛋白酶(matrix metalloprotein；MMP)中的一种蛋白水解酶，可破坏血脑屏障及脑微血管结构，加重组织损伤。既往研究资料表明，急性脑出血患者中OPN、S-100β蛋白及MMP-9蛋白水平表达异常会加重脑出血程度，与患者预后有显著相关性[3]。为给临床诊治急性脑出血提供理论指导，提高对急性脑出血的认识，本文探讨OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平变化与急性脑出血患者神经功能恢复、预后的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料我院2016年3月至2017年3月收治的急性脑出血患者的临床资料，纳入标准：①所有头部MRI等影像资料完整，头部MRI提示局部出现团块状异常信号；②预测生存期在6个月以上者；③龄45～79岁。排除标准：①颅内肿瘤卒中及合并其他恶性肿瘤、器官衰竭者；②合并外伤性颅脑损伤史、脑血管先天畸形者致血管破裂者；③肝肾功能疾病致脑出血者。本研究最终纳入32例急性脑出血患者(经CT及MRI检查确诊)为观察组。同时选取在本院进行健康体检人员34例为对照组，纳入标准：①临床资料完整无缺失者；②未合并恶性肿瘤、器官衰竭等严重疾病者；排除近期服用过影响免疫功能药物者。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 两组一般资料比较

1.2 方法两组均于次日清晨空腹抽取静脉血6 ml送检，分离血清，OPN、S-100β蛋白、MMP-9标本放置在-8 ℃保存待测。采用酶联免疫吸附法测定上述三项指标。OPN试剂盒由武汉云克隆科技股份有限公司提供；S-100β蛋白试剂盒由上海哈灵生物科技公司提供提供；MMP-9试剂盒由上海信裕生物工程有限公司提供。OPN、S-100β蛋白、MMP-9检测步骤严格按说明书进行。

1.3 观察指标①比较两组血清中OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平情况。OPN正常参考值范围：<30 ng/ml；S-100β蛋白正常参考值范围：<0.5 ng/ml；MMP-9正常参考值范围：40.5～55.6 ng/ml。②通过美国国立研究院制定的卒中量表(National institute of health stroke scale；NIHSS)[4]评价患者神经功能，0～42分，分值越低神经功能受损程度轻。NIHSS评分<6分则表示患者神经功能恢复良好。③对急性脑出血患者进行为期2年的随访，截止至2019年3月，整理预后。

1.4 统计学方法应用SPSS 18.0软件对数据进行统计学分析，计量资料以均数±标准差表示，比较采用t检验；计数资料以例数(%)表示，采用χ2检验；影响急性脑出血患者预后的因素采用Logistic回归模型分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平比较

观察组OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平均显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平比较 (ng/ml)

2.2 不同NIHSS评分的急性脑出血患者OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平比较NIHSS评分≥6分的急性脑出血患者OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平均明显高于NIHSS评分<6分患者(P<0.05)。见表3。

表3 不同NIHSS评分的急性脑出血患者OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平比较 (ng/ml)

2.3 不同临床特征的急性脑出血患者预后情况不同OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平、NIHSS评分的急性脑出血患者2年预后生存率比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 不同临床特征的急性脑出血患者2年预后情况 (n)

2.4 急性脑出血患者预后的影响因素分析OPN≥30 ng/ml、S-100β蛋白≥0.5ng/ml、MMP-9<40.5ng/ml或>55.6ng/ml、NIHSS评分≥6分为影响急性脑出血患者预后的独立危险因素(P<0.05)。见表5。

表5 急性脑出血患者预后的影响因素分析

2.5 不同OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平的急性脑出血患者生存函数分析OPN<30 ng/ml、≥30 ng/ml的中位生存期分别为33.38月、22.06月；S-100β<0.5 ng/ml、≥0.5 ng/ml中位生存期分别32.33月、22.06月，MMP-9 40.5～55.6 ng/ml、<40.5 ng/ml或>55.6 ng/ml的中位生存期分别为31.24月、21.87月。生存分析显示OPN<30 ng/ml、S-100β<0.5 ng/ml、MMP-9为40.5～55.6 ng/ml的患者生存期较长，Keplan-meier生存曲线明显不同(P<0.05)。见图1、图2、图3。

图1 S-100β蛋白水平<0.5ng/ml与≥0.5ng/ml生存期比较

图2 OPN水平<30 ng/ml与≥30 ng/ml生存期比较

图3 MMP-9水平40.5～55.6 ng/ml、<40.5 ng/ml或>55.6 ng/ml生存期比较

3 讨论

急性脑出血是神经内科常见的脑血管意外类型，死亡率极高。由于该病常合并小动脉硬化、颅内静脉血栓等疾病，易导致颅内高压、脑组织损伤，使中枢神经系统损伤后诱发神经内分泌系统紊乱[5～7]。临床尚缺乏高效的评估急性脑出血患者预后的标志性生化指标。本研究结果显示：观察组OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平均显著高于对照组，这一研究结果与既往文献报道一致[8]。可见急性脑出血患者上述蛋白水平均高于未发生脑出血者，有效证明了急性脑出血的发生与大量蛋白的释放有关。

目前关于血清蛋白与脑血管疾病神经功能损伤的机制研究尚未明确，但有不少研究指出，血清蛋白的升高会加重脑血管疾病患者的神经损伤[9～13]。本研究中，NIHSS评分≥6分的急性脑出血患者OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平均明显高于NIHSS评分<6分的急性脑出血患者，表明上述指标与急性脑出血患者神经功能有着密切联系，可在一定程度上反应神经功能缺损严重程度。生存分析显示OPN水平<30 ng/ml、S-100β蛋白<0.5 ng/ml、MMP-9水平为40.5～55.6 ng/ml的患者中位生存期较长，提示OPN、S-100β、MMP-9水平与急性脑出血患者预后有着密切联系，上述指标水平较低者预后更佳。

研究显示OPN≥30ng/ml、S-100β蛋白≥0.56 ng/ml、MMP-9<40.5 ng/ml或>55.6 ng/ml、NIHSS评分≥6分为影响患者预后死亡的独立危险因素，这与Royer等[14]学者报道结果相似。可见OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平与急性脑出血患者神经功能、预后相关，临床可通过控制患者血清内OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平，以改善神经功能，促进其预后。分析其原因：OPN蛋白是一种在人体内分布广泛的多功能蛋白，有研究表明，该蛋白参与了组织修复及发生炎症的过程，出现脑损伤后，其在炎症与重构组织中水平会增高[15，16]。S-100β蛋白为酸性小分子钙结合蛋白质，主要分布于中枢神经肌周围神经系统的细胞中。若大脑血管破裂，细胞机械性怀死会破坏血脑屏障，导致S-100β蛋白大量释放至血液中，S-100β蛋白水平的变化可敏感的表现中枢神经系统的损伤程度，其可作为脑损伤的生化标志物[17]。MMP-9是一种参与降解全身组织细胞外机制的蛋白质，参与脑出血后血脑屏障破坏、炎症及继发脑损伤等病理过程，可分解内皮细胞间的紧密连接，导致毛细血管基膜破裂而加速血脑屏障的渗透性，加速水分扩散释放炎性因子，最终导致脑细胞坏死[18，19]。相关研究发现[20]，脑血管疾病会引起MMP-9水平的显著升高，可见OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平的增高会加重患者神经功能损伤，上述指标水平的升高均可反映脑组织损伤及受损程度。

综上所述，OPN≥30 ng/ml、S-100β≥0.5 ng/ml、MMP-9<40.5 ng/ml或>55.6 ng/ml会影响患者神经功能恢复程度，不利于患者预后。上述指标与患者神经功能与预后有着密切联系，临床可加强三者联合检测以评估患者预后。