微生物检验操作流程有哪些?需要注意什么?

王兰

【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B 【DOI】10.12332/j.issn.2095-6525.2021.04.062

微生物检验在许多领域中都比较常见，在微生物检验操作过程中，首先，相关人员的各项操作一定要保障规范性与合理性，同时还应当严格控制使用器具以及检测环境的洁净程度，保障无菌操作。避免由于人为因素操作有误从而对结果产生影响，并且要保证环境温度适宜，为微生物检验工作的稳步有序开展提供基础保障。以下就针对为什么要进行微生物检验、检验的操作流程是怎样的，检验时要注意什么，来一一说明。

1  为什么要微生物检验

微生物说的就是细菌、真菌、病毒一类的微小生物，它们对人的生存生活有好的也有坏的影响，有时为了发挥微生物的价值，有时为了解决因微生物造成的传染病等问题，就有必要对微生物进行检验检测，找到微生物活动规律，找到真正的致病菌在哪里，才能进一步采取有效的措施解决问题。

比如：对某类食品进行微生物检验，通过这一检验可以获得其中所含菌种、菌类数量，判断某一菌类是否超标，一旦超标会导致什么结果，如食品检验显示含有副溶血性弧菌，人在食用后可出现腹泻、呕吐等症状。因此，通过微生物检验，我们可以知道哪些是非正常菌群，有助于对某一传染病或疾病的判断，从而提出控制和处理方法。并且无论是对食品等生产企业，还是对消费者，微生物检验都是有积极意义的，例如可以判断企业生产加工的环境情况，可以评价产品微生物污染程度，预防传染病的发生，预防人或动物等出现食物中毒的情况。

2  微生物检验操作流程有哪些？

在具体的微生物检验当中，虽然检验的项目有所不同，但流程存在一些共通之处，具体操作流程有如下几点：

2.1在进行实验操作之前，要使用75%酒精对试验操作区域台面以及四周环境进行擦拭，提前准备好相关实验器材设备与各种溶液，并且要提前打开紫外灯进行消毒，时间控制在30分钟左右。

2.2在进入到无菌操作室之前，必须要用肥皂洗手，之后再使用75%的酒精棉球擦干净双手。

2.3进入到无菌室前，必须穿上相应的工作服、鞋帽，戴好口罩，同时对于这些物品要提前使用紫外线进行消毒，之后才能够正常使用。

2.4实验需要的培养基、吸管以及平皿等相关物品应当提前消毒灭菌，如果器皿打开包装，是不能放置后再使用的，器皿放置时间不能超过一周。

2.5在取出吸管时，吸管的尖部是不能接触外露部分以及试管。

2.6在进行样品接种时，应当在酒精灯前进行操作，在接种时，取出吸管，以及打开试管塞等步骤都应当采用火焰进行消毒。

2.7在实验结束之后，要及时清理实验区域台面。

2.8对使用过后的器材要及时整理，器材应当采用高压灭菌或者煮沸等方式进行消毒。

2.9实验操作人员在实验结束之后，要使用肥皂清洗双手，并用清水冲洗，保持手部及时消毒、清洁。

2.10换后的隔离衣帽等物品要用紫外线消毒，并及时将拖鞋及时放回原处。

2.11无菌室以及缓冲间每星期大扫除一次，保障室内环境衛生整洁。

2.12每天要对室内空气用紫外线消毒，如果紫外线灯管使用时间过长，应及时更换新的紫外灯管。

3  微生物检验操作需要注意什么？

微生物检验时可以针对检验样本，选择不同的检验方法，如生长量测定法、微生物计数法等，这些方法均有其相应的原理及适用范围，在进行微生物检验前应当结合样本情况选择合适的方法，并需要注意以下几点事项：

3.1培养前准备工作

在进行实验之前，要制定相应的实验计划，明确具体操作流程，提前计算核对有关数据，结合实验具体要求，准备好相关物品和器材，清点无误之后放在培养室内，并进行消毒。这样也能够避免在实验过程中，因相关物品准备不全，而往返拿取，从而导致污染几率增加。

微生物检验前的工具准备

3.2操作技巧

在培养时，动作要敏捷，合理控制时间，减少污染的几率，避免用手接触器皿，如果接触，要使用火焰进行消毒。为了实验方便，要对物品合理布局，将酒精等放在中央区域。实际工作过程中要保障顺序的合理性，组织再没有进行处理前，要避免暴露在空气当中。培养液也不能太早开瓶，使用过后，要马上封闭瓶口，否则可能会增加污染的几率。各种用液是不能混合的，避免交叉污染，工作过程中也不能咳嗽或者讲话。正式操作之前，要用酒精擦拭双手。

3.3火焰消毒

无菌环境下培养或者是其他无菌工作进行时，应当点燃酒精灯，接下来的操作，如打开或者封闭瓶口，需要用火焰进行烧灼，需要注意的是金属器械烧灼时间不能过长，用火烧过的金属镊，要等到慢慢冷却之后才可以使用，避免对组织造成损伤。吸管如果已经吸取营养液，这个时候不能再用火焰烧灼，很可能会将有害物带入其中。开启以及关闭培养瓶时，要严格控制火焰灭菌时间，避免温度过高将细胞烧死。

为了保障检测结果的准确性，就必须要严格按照相关规定要求进行实验，提前做好相关准备工作，并对相关物品进行消毒，实验环境要保证无菌化，检测前，要使用75%的酒精对区域环境进行擦拭消毒，工作人员也应当对个人进行相应的消毒，从而保障微生物检验工作能够稳步有序的开展。