222株儿童血培养分离菌的临床分布特点及药敏结果分析

朱德永,袁 雕,陆兴热

云南省文山壮族苗族自治州人民医院检验科，云南文山 663099

血流感染(BSI)是病原微生物入侵血液而导致的感染，是一种严重的全身感染性疾病，以儿童和老年人多见，且病死率高，为20%～60%[1]。有研究结果显示，儿童和新生儿BSI的年发生率为70/10万例，病死率高达20%[2]。儿童BSI病情进展迅速，早期合理有效的治疗，可改善患儿转归。血培养报告时间较长，临床医生在得到细菌鉴定及药敏报告前，需根据当地流行病学特征使用抗菌药物对患儿进行经验性治疗。本文通过回顾性分析本院2018年1月1日至2020年9月30日出生1 d至13周岁儿童血培养分离的阳性菌株临床分布特点及药敏结果，为指导临床合理用药提供参考。

1 材料与方法

1.1菌株来源 选择本院2018年1月1日至2020年9月30日出生1 d至13周岁儿童血培养分离的222 株菌株为研究标本。纳入标准:出生1 d至13周岁;有感染相关的临床表现；血培养有明确的病原菌生长。

1.2仪器与试剂 Bact/Alert3D型全自动血培养仪和配套血培养瓶、Vitke2 Compact全自动细菌鉴定及药敏系统；血平板、巧克力平板、MH平板、沙保罗平板、GN卡、GN334卡、GP卡、GP67卡、GP68卡、YST卡、血培养瓶、ATBTM FUNGUS3，以上仪器及试剂生产厂家均为梅里埃(上海)生物制品有限公司；药敏纸片(购自杭州天和生物有限公司)；质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC29213、铅黄肠球菌ATCC700327、铜绿假单胞菌ATCC27853、产酸克雷伯菌ATCC700324。

1.3实验方法 无菌操作抽取疑似BSI儿童静脉血1～3 mL 注入血培养瓶中，立即送检验科微生物室置于Bact/Alert3D型全自动血培养仪37 ℃培养，血培养仪定时检测血培养瓶中二氧化碳浓度，绘制生长曲线，并判断有无细菌生长;仪器报告阳性时，取出报阳瓶，用无菌注射器取少量培养物转种血平板和巧克力平板分离病原菌，标本采集送检和药敏试验均参照《全国临床检验操作规程》(第4版)[3]要求进行,采用Vitke2 Compact全自动细菌鉴定及药敏系统进行细菌鉴定及药敏试验。必要时采用纸片扩散法在MH培养基上对药敏结果进行复核，药敏试验结果参照美国临床和实验室标准协会指南进行判读[4]。

1.4统计学处理 数据采用SPSS19.0统计软件及Whonet5.6软件进行统计学分析。计数资料以频数或率(%)表示。

2 结 果

2.1222株菌株患者的性别及年龄分布情况 222株菌株对应的患者中男134例(60.36%),女88例(39.64%)；年龄以出生1 d至3岁(78.38%，174株)和4～6岁(10.36%，23株)为主,7～9岁占5.41%(12株)，10～13岁占5.86%(13株)。

2.2222株菌株患者科室分布情况 222株菌株中检出最高的科室为新生儿科(34.23%)，其次为儿一科(24.48%)、儿二科(22.52%)。见表1。

表1 222株菌株患者科室分布情况

2.3222株菌株菌种分布情况 222株菌株检出最高的为凝固酶阴性葡萄球菌(27.03%)，其次为大肠埃希菌(18.47%)、金黄色葡萄球菌14.86%)。见表2。

表2 222株菌株菌种分布情况

2.4葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药率 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为51.67%(31/60)，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为27.27%(9/33)。凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素、苯唑西林、头孢唑林、红霉素、克林霉素耐药率较高。金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率为96.97%；未检出对万古霉素耐药革兰阳性球菌菌株。见表3。

表3 葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药率(%)

2.5主要革兰阴性杆菌对常用抗菌药物的耐药率 产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌检出率为39.02%(16/41)，产ESBLs 肺炎克雷伯菌检出率为54.55%(6/11)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢唑林、哌拉西林、头孢噻肟的耐药率较高；沙门菌对第3、4代头孢、喹诺酮类耐药率均较低。见表4。

表4 主要革兰阴性杆菌对常用抗菌药物的耐药率(%)

3 讨 论

血培养阳性为临床BSL病原学诊断的“金标准”，其药敏结果也是有效治疗BSL的重要依据，对存在疑似感染症状的儿童均应进行血培养。参照相关专家共识，可疑感染患者出现以下任一指征时，可考虑采集血培养，包括产妇胎膜早破，产褥期腹膜炎，疑似绒毛膜羊膜炎，患儿体温不稳定，心率、呼吸加快，精神萎靡，糖不耐受，喂养不耐受，白细胞计数升高或降低，C反应蛋白水平升高，血小板计数降低，降钙素原水平升高等[5]。本研究结果显示，本院222株菌株对应的患者中出生1 d至3岁儿童占78.38%，低于杨延龙等[6]报道的89.25%，高于曹慧军等[7]报道的69.23%。低龄儿童占比较高可能与收治的多为低龄出生患儿，本身免疫功能低下易感有关。引起本院儿童BSI前5位细菌为凝固酶阴性葡萄球菌(27.03%)、大肠埃希菌(18.47%)、金黄色葡萄球菌(14.86%)、肺炎链球菌(8.56%)、沙门菌属(7.66%)。李斌等[8]研究表明，昆明地区儿童BSI感染细菌谱前5位为凝固酶阴性葡萄球菌(42.8%)、大肠埃希菌(14.4%)、金黄色葡萄球菌(5.4%)、肺炎克雷伯菌(5.3%)、沙门菌(4.6%),说明引起各地区儿童BSI的病原菌菌谱及其耐药情况有差异性。

本研究结果显示,本院儿童BSI以革兰阳性球菌为主，占62.16%,低于国内部分地区，如郑州(72.80%)[9]、南宁(67.1%)[10]等报道。MRCNS为皮肤正常寄生菌，属于条件致病菌，临床送检污染率较高，微生物室人员应及时与临床医生沟通，全面了解患者临床症状及病情发展，以便准确判断该菌是否为致病菌，本研究MRCNS 的检出率为51.67%。MRSA检出率为 27.27%，与吕春兰等[11]报道的27.60%相似。未发现对万古霉素耐药的革兰阳性球菌。

81株革兰阴性菌中，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、沙门菌最为常见，其中产ESBLs的肺炎克雷伯菌占54.55%，产ESBLs的大肠埃希菌占39.02%。肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率>80.00%；大肠埃希菌对氨苄西林、哌拉西林耐药率均>80.00%。对于较严重的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染可以考虑使用亚胺培南或美罗培南治疗，同时,应严格限制应用此类抗菌药物，避免耐碳青酶类抗菌药物菌株的出现。沙门菌属17 株，沙门菌属对氨苄西林、哌拉西林耐药率均在50.00%以上，临床可以考虑儿童用药安全的前提下使用。

本次报道中，检出产单核李斯特菌2株(0.90%)。李斯特菌通常对青霉素、氨苄西林、美罗培南和复方磺胺甲噁唑敏感。复方磺胺甲噁唑不宜用于孕妇及新生儿，建议临床使用青霉素、氨苄西林和美罗培南抗感染治疗[12]。本次报道检出近平滑假丝酵母菌1株(0.45%)，对于感染的新生儿，主要是拔除中心静脉置管和系统的抗菌治疗[13]。对于患有播散性念珠菌病的新生儿，推荐两性霉素B每日1 mg/kg。血培养持续阳性者应当进行泌尿生殖道、肝脏、脾脏CT或超声检查。对于无明显转移并发症的患者，建议治疗时间持续到血培养转为阴性且无相应体征后2周[14]。

综上所述，引起本院儿童BSI前5位细菌为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、沙门菌属。本院儿童BSI病原菌分布广，各菌株对抗菌药物的耐药率各有不同。临床及微生物室应进行及时有效沟通，尽早明确病原菌及药敏结果，合理使用抗菌药物。加强医院感染防控措施，做好细菌耐药性监测，规范治疗，避免耐药的进一步加重。