脐静脉血visfatin水平和妊娠期糖尿病胎儿宫内胰岛素抵抗的关系

李丹红，陈敏，马晓铃

(深圳市宝安区中心医院妇产科，广东 深圳 518000）

妊娠期糖尿病（GDM）是指妊娠期间首次发生或首次确诊的糖耐量异常状态，属于2 型糖尿病，为妊娠期常见并发症，极易导致不良妊娠结局，如巨大儿、新生儿窒息、未足月胎膜早破等。有研究报道GDM患者病理机制除胰岛素抵抗外，还与机体中部分血清因子异常代谢相关，干扰GDM的康复病程，从而影响预后[1]。近年来，新型脂肪细胞因子VF在诊断2型糖尿病中发挥重要作用，具有促脂肪组织分化的功效，并参与胰岛素抵抗过程，还会影响肝功能代谢。有研究认为GDM 孕妇机体VF 含量较高，会导致HOMA-IR，进一步导致高水平血糖、血脂分子聚集于母体内，通过胎盘屏障导致胎儿体内血糖、血脂等水平异常，进而导致新生儿并发症[2]。基于此，本研究旨在探究新生儿娩出后脐静脉血的血清VF 水平与GDM 胎儿宫内HOMA-IR 的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2017年1—12月本院收治的住院分娩的妊娠期糖尿病孕妇50 例作为研究组，并选取同期于本院行产前检查的糖耐正常孕妇50名作为对照组。对照组年龄22～38岁，平均（27.6±3.1）岁；初产妇23名，经产妇27名；孕次1～3次，平均（1.5±0.3）次；妊娠周期24～28周，平均（25.8±1.3）周；BMI 19.3～34.5 kg/m2，平均（26.6±2.1）kg/m2；新生儿平均身长（48.6±2.6）cm；平均出生体质量（3.6±0.9）kg；新生儿男26 例，女24 例。研究组年龄23～39 岁，平均（28.5±3.2）岁；初产妇25 例，经产妇25 例；孕次1～3 次，平均（1.6±0.2）次；妊娠周期 24～29 周，平均（26.3±1.5）周；平均19.4～34.7 kg/m2，平均（26.8±2.3）kg/m2；新生儿平均身长（48.9±2.7）cm；平均出生体质量（3.5±1.0）kg；新生儿男24 例，女26例。两组孕妇临床资料比较差异无统计学意义，具有可比性。本研究经本院伦理委员会审核批准。

纳入标准：①均于本院行规律产前检查；②均为足月妊娠，且为单胎妊娠；③GDM 孕妇经血糖等检查确诊；④既往无糖尿病史；⑤所有孕妇均自愿参与本研究，并签署知情同意书。排除标准：①精神异常或认知障碍；②合并心、肾、肝等严重病症；③妊娠期存在高血压、其他内分泌代谢性病症；④伴有多囊卵巢综合征；⑤临床资料缺失。

1.2 方法

1.2.1 GDM 诊断[3]于24～28 周行产前检查，采用75 g 葡萄糖耐量筛查实验（OGCT），即将75 g葡萄糖溶解于300 mL水中，混合摇匀，要求孕妇在5 min 饮用完毕，静坐或卧床60 min，后抽取外周静脉血检测血糖水平；诊断标准：空腹血糖（FPG）≥5.6 mmol/L、1 h FPG≥10.3 mmol/L、2 h PG≥8.6 mmol/L、3 h PG≥6.7 mmol/L，符合上述其中两项或以上者，FPG达到或超过正常值，即可诊断为GDM，如若上述1项超过正常值，则可诊断为糖耐量异常。

1.2.2 相关指标实验室检查 新生儿脐静脉血指标检查：胎儿娩出后即刻采集其脐静脉血，约5 mL，置于肝素管中，于4 ℃下1 000 r/min离心15 min，使用一次性吸管吸取上层血清，采用Ependorff 管分装，置入-20 ℃的冰箱中贮存待检。检测血清内脂素（VF）、血清25-羟基维生素D3［25（OH）D3］、血清性激素结合球蛋白（SHBG）、胰岛素、FBG及血脂水平，其中血清VF、血清25（OH）D3、血清SHBG 均采用酶联免疫吸附性试验（ELISA）及其配套试剂盒（上海酶联生物科技有限公司）检测，胰岛素采用放射免疫法检测，FBG采用葡萄糖氧化酶法检测，血脂采用比色法检测。胎盘娩出后即刻取其胎盘母体面组织，体积为1 cm×1 cm×1 cm，使用0.9%氯化钠溶液冲洗后福尔马林固定，24～48 h，后常规使用石蜡包埋，置冰箱保存备用。

1.3 观察指标

1.3.1 比较两组脐静脉血相关指标 包括血清VF、25（OH）D3及SHBG、胰岛素、FBG、血脂水平、胎儿宫内胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。HOMA-IR=空腹胰岛素×FBG/22.5。

1.3.2 比较两组胎盘组织中血清VF阳性率 阳性率结果判定标准：阳性细胞，细胞浆染色后显微检查有清晰的棕黄色颗粒；阴性细胞，细胞浆颜色与背景颜色一致或未着色。每例胎盘母体面组织切片后，随机取10 个高倍视野以此判定结果，依据染色强度计分、阳性细胞数占细胞总数的百分比计分综合评估[4]。染色强度：0分，无色；1分，淡黄色；2分，棕黄色；3 分，棕褐色；阳性细胞数：0 分，＜5.0%；1 分，5.0～25.0%；2 分，26%～50%；3 分，＞50%。最终得分=染色强度得分×阳性细胞数得分，阴性为0～1分。阳性（+）：2分；阳性（++）：3～4分；阳性（+++）：5～6分。胎盘组织中血清VF阳性率=阳性例数/总例数×100%。

1.3.3 相关性 分析脐静脉血血清VF 与胎儿宫内HOMAIR、血清25（OH）D3及SHBG的相关性。

1.4 统计学方法 采用SPSS 23.0统计软件进行数据分析，计量资料以“”表示，比较采用t检验，计数资料用[n（%）]表示，比较采用χ2检验，相关性采用Pearson分析，以r检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组脐静脉血相关指标比较 研究组VF 及SHBG、胰岛素、FBG、血脂及HOMA-IR水平高于对照组，25（OH）D3低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组脐静脉血相关指标比较（）Table 1 Comparison of related indexes of umbilical venous blood between the two groups()

表1 两组脐静脉血相关指标比较（）Table 1 Comparison of related indexes of umbilical venous blood between the two groups()

注：VF，内脂素；D3［25（OH）D3］，血清25-羟基维生素D3；SHBG，血清性激素结合球蛋白；FBG，空腹血糖；HOMA-IR，胰岛素抵抗指数

组别对照组（n=50）研究组（n=50）t值P值HOMA-IR 1.44±0.22 2.08±0.33 11.410 0.000 VF（mmol/L）3.12±0.95 5.13±1.29 8.872 0.000 25（OH）D3（mmol/L）38.76±8.62 27.31±5.23 8.030 0.000 SHBG（mmol/L）2.09±0.32 2.77±0.74 5.964 0.000胰岛素（mmol/L）8.24±1.32 12.18±2.96 8.596 0.000 FBG（mmol/L）4.15±0.27 5.28±0.74 10.144 0.000血脂（mmol/L）1.85±0.22 2.62±0.26 15.986 0.000

2.2 两组胎盘组织中血清VF 阳性率比较 研究组胎盘组织中血清VF 阳性率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组胎盘组织中血清VF阳性率比较Table 2 Comparison of serum VF positive rate in placental tissue between the two groups[n(%)]

2.3 脐静脉血血清VF与胎儿宫内HOMA-IR、血清25（OH）D3 及SHBG 的相关性分析 脐静脉血血清VF 与胎儿宫内HOMA-IR 呈正相关（r=0.576，P=0.000）；脐静脉血血清VF与血清25（OH）D3呈负相关（r=-0.512，P=0.000）；脐静脉血血清VF与血清SHBG呈正相关（r=0.535，P=0.000）。

3 讨论

内脂素又被称为前B细胞克隆增强因子，是最近发现的脂肪细胞因子，主要在内脏细胞中高水平表达，可降低血糖，具有类胰岛素特性。内脂素能结合胰岛素受体，激活胰岛素信号转导通路，以此降低血糖。相关文献[5]中报道妊娠期糖尿病孕妇机体中内脂素表达水平增加，可增强脂肪细胞应激性，提高相关应激因子的表达水平，增加胰岛细胞所致损伤产生的风险。有研究表明，GDM 的发生发展与孕妇机体血清VF 密切相关[6]。临床实践表明，GDM 孕妇机体血清VF表达水平提升，会增加机体HOMA-IR水平。但临床对于脐静脉血中血清VF水平与胎儿宫内胰岛素抵抗的研究较少。

VF能促进机体肌细胞和脂肪细胞对葡萄糖的摄取并减少肝糖原的生成，增强机体前脂细胞合成甘油三酯并促进其聚集，且近年来多项研究报道胰岛素抵抗与内脏脂肪因素的异常表达密切相关[7]。VF能提升L6肌肉细胞、3T3-L1脂细胞对机体中葡萄糖的摄取量，加强对H4IIEc3肝细胞葡萄糖释放量的抑制作用，以此进一步降低血糖。同时，VF促脂肪细胞合成，且具有促脂肪细胞分化的作用，但其在脂肪细胞中的释放机制目前临床尚未完全明确[8]。在女性妊娠期间脐血内脂素含量伴随妊娠周期增加而提升，且在分娩后会进一步增加，会在新生儿娩出后脐静脉血中高表达。本研究结果表明，研究组脐静脉血血清VF、SHBG、胰岛素、FBG、血脂水平及HOMA-IR 均高于对照组，而研究组血清25（OH）D3低于对照组（P＜0.05）；且进一步显微检查显示，现胎盘组织中血清VF阳性细胞检出率较高，进一步证实结论。除FBG、空腹胰岛素外，血清SHBG可作为诊断IR的可靠标志，临床常用血清 25（OH）D3评价维生素 D 状况，其水平与GDM 孕妇IR 密切相关，在GDM 发生与进展中发挥重要作用[9-10]。经过分析脐静脉血血清VF 与胎儿宫内HOMA-IR、血清25（OH）D3及SHBG的相关性，发现脐静脉血血清VF与胎儿宫内HOMA-IR呈正相关、脐静脉血血清VF与血清25（OH）D3呈负相关、脐静脉血血清VF与血清SHBG呈正相关，表明脐静脉血血清VF高表达会增加胎儿宫内IR的风险，且会间接提升血清SHBG 水平，降低血清25（OH）D3水平，GDM 孕妇机体中血清VF 高表达，会导致IR，从而诱导血糖及血脂水平升高，虽VF无法直接经过胎盘屏障进入胎儿循环，但处于IR状态的部分孕妇机体中血糖、血脂因子会高水平聚集，通过胎盘屏障进入胎儿循环，进一步导致胎儿机体中血脂及血糖代谢紊乱，增加胰岛素抵抗风险[11-12]。

综上所述，脐静脉血血清VF含量较高，虽不直接通过胎盘屏障，但会间接诱导胰岛素抵抗指数增加，两者呈正相关，妇产科需加强血清VF指标的检查，可作为诊断妊娠期糖尿病的有效指标。