辣木叶与地衣芽孢杆菌联用对蛋鸡产蛋后期生产性能、蛋品质和抗氧化能力的影响

■易 鑫杜 红彭佳昊 徐 丹 孙弟芬陈 芬赵小玲舒 刚*

（1.四川农业大学动物医学院，四川成都 611130；2.四川宜宾山勾勾农业科技有限公司，四川宜宾 644000）

蛋鸡产蛋周期可分为产蛋前期、高峰期和产蛋后期[1]。当蛋鸡进入产蛋后期后，产蛋率开始下降，并且蛋品质开始降低[2]。产蛋后期，蛋鸡产蛋率的降低不仅与其营养的摄入有关，而且还与其体内自由基的不断增多有关，且过多的自由基会对机体细胞带来损伤，进而影响机体器官功能[3]。而生产性能与蛋品质的降低，会直接影响养殖户的经济效益，因此，改善产蛋后期蛋鸡的抗氧化能力，提高其生产性能、改善其蛋品质，对于延长蛋鸡使用年限、提高蛋鸡经济效益具有重要意义。

辣木(Moringa oleifera Lam.)隶属辣木科，又称辣根树等，是一种生长迅速的小型常绿或落叶树，树高通常长10～12 m，目前广泛种植于热带和亚热带国家和地区[4]。辣木叶是辣木的树叶，其活性成分主要有黄酮类、生物碱类、糖苷类、异硫氰酸酯、有机酸、有机酸酯等，其药理作用包括降血糖、降血脂、抗氧化、抗炎、免疫调节、肝肾调节、抗癌等[5]。辣木叶具有较好的科研价值和推广应用前景，具有改善蛋鸡的产蛋性能、蛋品质、生理代谢作用，其作用效果受动物品种、添加量、生理状态等因素的影响[6]。陆唯[7]在基础饲料中添加5%、10%、15%的辣木叶粉，其研究结果表明，添加高剂量的辣木叶粉对蛋鸡会产生不良影响，而5%～10%的添加量较为适宜，可以改善蛋清品质和哈夫单位，提高蛋黄颜色和蛋鸡抗氧化能力。习欠云等[8]用2%、4%和8%的辣木叶粉替代等量基础饲粮饲喂蛋鸡，其研究结果表明，添加4%～8%的辣木叶粉对其生产性能无不良影响，但可显著提高蛋黄颜色，但未研究其抗氧化能力。Wei等[9]研究表明，添加5%的辣木叶可提高蛋黄颜色、机体抗氧化能力、促进了机体对营养物质吸收，而10%和15%的添加量会使机体甲醛含量升高。根据本实验室前期预试验结果显示，添加40 g/kg的辣木叶较为适宜。

地衣芽孢杆菌是一种革兰氏阳性菌，具有酶种类丰富、耐热、产酶量高、安全性好等诸多优点[10]。将地衣芽孢杆菌作为饲料添加剂使用，具有维护畜禽肠道微健康、促进动物生长、提高免疫力等作用[11]。雷凯[12]在蛋鸡基础饲料中添加0.01%、0.02%、0.03%、0.06%、0.09%的地衣芽孢杆菌，研究发现，地衣芽孢杆菌能显著提高产蛋率和产蛋量，其中0.01%和0.06%的添加量最佳；地衣芽孢可以提高蛋壳强度和厚度；能显著降低血清中二胺氧化酶活性和D-乳酸，表明蛋鸡的肠道通透性显著降低；并且还能显著降低血清中促肾上腺皮质激素水平，显著提高促卵泡激素和雌二醇的分泌水平。景翠等[13]在饲粮中添加1×109、2×109、3×109CFU/kg的地衣芽孢杆菌，研究表明，地衣芽孢杆菌可以平衡肠道菌群、改善肠道形态结构且效果明显。孙全友等[14]研究表明，100 mg/kg的地衣芽孢杆菌能降低肉仔鸡料重比，提高平均日增重，降低肠道中大肠杆菌和沙门氏菌的含量，提高乳酸杆菌和双歧杆菌的含量。

目前，对于辣木叶在产蛋后期蛋鸡上的应用较少，且辣木叶与地衣芽孢杆菌二者的联用试验更少。研究的重要意义在于，辣木叶具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗炎、免疫调节、肝肾调节、抗癌作用，地衣芽孢杆菌具有维护畜禽肠道微健康、促进动物生长、提高免疫力等作用，两者联用可以从多方面促进蛋鸡健康并且提高生产性能，以达到替代抗生素的目的。所以本试验旨在通过在产蛋后期蛋鸡日粮中添加辣木叶以及辣木叶和地衣芽孢杆菌的联用，探究其对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质、抗氧化能力的影响。

1 材料与方法

1.1 试验材料

辣木叶粉（粒径大小为100目）购自攀枝花市春成商贸有限公司；地衣芽孢杆菌（含量为1.0×1010CFU/g）由四川农业大学微生态研究中心提供。50周龄海兰灰蛋鸡由宜宾山勾勾农业科技有限公司生产基地提供。

1.2 试验设计与饲养管理

将288只50周龄健康无病海兰灰蛋鸡随机分为4组，每组4个重复，每个重复12只，每组72只，分别为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组。对照组饲喂基础饲粮，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组在基础饲粮的基础上分别按照40 g/kg辣木叶、0.1 g/kg地衣芽孢杆菌、40 g/kg辣木叶和0.1 g/kg地衣芽孢杆菌的剂量进行添加，药物以等量递加法与饲料混合均匀。相关试验研究在宜宾山勾勾农业科技有限公司养殖场开展。预试期1周，正式试验期6周，试验期间蛋鸡自由采食和饮水。基础饲粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.3 样品采集

每周从每个组中选取6枚蛋，在24 h内检测鸡蛋的蛋横径、蛋纵径、蛋型指数、蛋白高度、哈夫单位、蛋黄颜色、蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋壳重、蛋壳比例、蛋黄重指标。试验结束时，每组随机选取6只体重一致的蛋鸡，共24只，禁饲12 h(不禁水)，对蛋鸡进行称重，颈静脉处采集5 mL血液，分离血清，置于-80℃条件下保存并待测。然后屠宰分离肝脏置于-80℃条件下保存并待测。

1.4 指标测定及方法

1.4.1 产蛋性能

试验期间，每天统计各重复蛋鸡的产蛋数、破蛋数、畸形蛋（包括过大、过小、过长蛋）、砂壳蛋数、合格蛋重（指除去破壳蛋、砂壳蛋数和畸形蛋后的总蛋重），计算产蛋率、次品蛋率（破蛋率、砂壳蛋率、畸形蛋）、平均合格蛋重、料蛋比。

1.4.2 蛋品质测定

采用游标卡尺测定鸡蛋横径和纵径，计算蛋型指数；采用蛋白高度仪测定蛋白高度和蛋壳厚度，计算哈夫单位；采用罗氏比色扇测定蛋黄颜色；采用蛋壳强度测定仪测定蛋壳强度；用分离器将蛋黄与蛋清分离，采用电子天平对蛋黄、蛋壳进行称重。

1.4.3 血清抗氧化指标测定

血清中丙二醛（MDA）含量、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、总抗氧化能力（T-AOC）用试剂盒(购自南京建成生物工程研究所)进行测定，测定方法严格按照说明书进行。

1.4.4 肝脏抗氧化指标测定

肝脏中总蛋白（TP）含量、丙二醛（MDA）含量、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、总抗氧化能力（TAOC）、还原型谷胱甘肽（GSH）含量用试剂盒(购自南京建成生物工程研究所)进行测定，测定方法严格按照说明书进行。

1.5 数据分析

试验数据运用SPSS 20.0软件进行统计，并进行正态分布检验，符合正态分布的采用单因子方差分析进行差异显著性检验，最小显著差数法（LSD）进行多重比较，以P＜0.05作为差异显著性判断标准，结果均以“平均值±标准误”表示；不符合正态分布的采用非参数秩和检验，结果以中位数表示，以P＜0.05作为差异显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期生产性能的影响（见表2）

表2 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期生产性能的影响

由表2可知，与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组在产蛋率、平均合格蛋重、料蛋比、砂壳蛋率、次品蛋率、破蛋率、畸形蛋率方面无显著差异(P＞0.05)。

2.2 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期蛋品质的影响（见表3）

表3 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期蛋品质的影响

由表3可知，与对照组相比，试验Ⅰ组蛋黄颜色和蛋黄重分别提高了46.41%和10.63%，具有显著差异(P＜0.05)；试验Ⅱ组蛋壳重提高了20.15%，蛋壳比例提高了14.88%，具有显著差异(P＜0.05)；试验Ⅲ组蛋黄颜色和蛋黄重分别提高了58.57%和12.52%，具有显著差异(P＜0.05)。

2.3 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期血清抗氧化指标的影响（见表4）

由表4可知，与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组的MDA含量均无显著差异(P＞0.05)；与对照组相比较，试验Ⅰ组的T-AOC和T-SOD活性分别提高了69.86%和12.45%，试验Ⅱ组的T-AOC、T-SOD活性分别提高了97.26%、9.38%，具有显著差异(P＜0.05)。

表4 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期血清生化指标的影响

2.4 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期肝脏抗氧化指标的影响（见表5）

表5 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期肝脏抗氧化指标的影响

由表5可知，与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组的MDA含量，T-AOC、T-SOD活性和GSH、TP含量均无显著差异(P＞0.05)。但与对照组相比，试验组MDA含量和GSH含量有提高的趋势。

3 讨论

3.1 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期产蛋性能的影响

辣木叶中含有丰富的蛋白质、氨基酸、维生素和大量微量元素，并且辣木叶容易消化和吸收，因而可以提高动物的生产性能[15]。王志刚[15]研究发现，辣木叶降低了育雏期鹌鹑采食量，提高了平均日增重，提高了饲料转化率，提高了育雏期鹌鹑的生产性能。胡诗慧[16]在辣木叶替代菜籽饼作为蛋白饲料的研究中发现，辣木叶可以使文昌鸡日增重、日采食量和总增重提高，使料重比降低，改善其生产性能，其替代比例可达5%。陆唯[7]研究发现，添加5%的辣木叶对蛋鸡产蛋率和饲料转化率无影响，添加15%的辣木叶会使蛋鸡产蛋率下降，料蛋比升高，对生产性能产生负面影响。本试验中，饲粮中添加辣木叶以及辣木叶与地衣芽孢杆菌的联合应用的结果与前人研究结果相似。辣木叶对产蛋率无影响的原因可能是其营养物质主要被机体吸收转化为肌肉蛋白或脂肪，而利用在产蛋方面的能量较少。

3.2 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期蛋品质的影响

N'nanle等[17]研究发现，在整个试验期，辣木叶提高了萨索母鸡蛋黄颜色，蛋白和蛋黄比有显著性差异，提高了鸡蛋蛋品质。Abou-Elezz等[18]研究发现，辣木叶可以使罗德岛红母鸡的蛋黄颜色显著升高，降低了蛋黄百分比，升高了蛋白百分比，改善了蛋品质。Wei等[9]研究发现，在饲粮中添加5%的辣木叶可以提高鸡蛋蛋黄颜色，提高蛋白的稳定性。本试验结果与前人研究结果一致，辣木叶以及辣木叶和地衣芽孢杆菌二者的联用使蛋黄颜色均有显著提升，在提高蛋品质效果上显著优于地衣芽孢杆菌的单独使用。蛋黄的颜色取决于蛋黄中类胡罗素含量的多少，鸡的机体本身不能合成该物质，只能从食物中获取，食物中的色素被机体吸收后，在卵黄和鸡体表沉积，色素含量越多，蛋黄色泽越深[19]。而辣木叶中含有丰富的维生素和类胡萝卜素。郭刚军等[20]认为多油辣木叶中含量最高的为蛋白质、维生素C、维生素E、维生素B6、β-胡萝卜素、P、Ca与Mg。因此，蛋黄颜色的加深可能与辣木叶中含有丰富的天然色素有关。

3.3 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期血清抗氧化能力的影响

辣木叶中所含的多糖、多酚、黄酮等物质具有较强的抗氧化能力[21-23]。张婷婷等[24]研究发现，在饲粮中添加6%和9%的辣木叶使育肥猪的肌肉总抗氧化能力和SOD活性显著提高，改善了育肥猪抗氧化功能。张幸怡等[25]研究发现，辣木叶粉能够有效提高大鼠肝脏和血液的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活力，使丙二醛(MDA)的含量降低，从而提高机体抗氧化能力。Abu等[26]研究发现，在饲粮中添加辣木叶可提高谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性，降低TBARS水平。本试验结果与前人研究结果一致，在饲粮中添加辣木叶可以显著提高血清总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性和总抗氧化能力（T-AOC），且效果优于地衣芽孢杆菌的单独使用；与对照组相比，辣木叶与地衣芽孢杆菌二者的联用也使机体总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性和总抗氧化能力（T-AOC）提高。

3.4 辣木叶与地衣芽孢杆菌对蛋鸡产蛋后期肝脏抗氧化能力的影响

关于辣木叶和地衣芽孢杆菌对蛋鸡肝脏抗氧化能力的影响的研究较少，还需进一步试验探索其影响机理。解静等[27]研究发现，辣木叶粉饲料组的小鼠肝脏表达上调和下调的差异表达基因共有1 227个，其中包括过氧化物酶体表达基因上调，故而辣木叶对小鼠肝脏的抗氧化能力有一定提升作用。陆唯[7]研究发现，在过氧化氢诱导的氧化应激条件下，辣木叶粉粗提物可使体外肝脏细胞SOD活性、T-AOC提高以及MDA含量下降。徐鹏[28]研究发现，地衣芽孢杆菌TS-01分泌的胞外多糖对蛋鸡肝细胞T-AOC有提高趋势但是效果不明显，可以显著降低MDA的含量。本试验结果与前人研究结果一致，与对照组相比，试验组MDA含量和GSH含量有提高的趋势，但是没有显著性变化，说明辣木叶和地衣芽孢杆菌以及二者的联用对肝脏的抗氧化能力有一定的作用，而作用不明显的原因可能为辣木叶和地衣芽孢杆菌添加量较少。

4 结论

在生产性能方面，辣木叶以及辣木叶和地衣芽孢杆菌联合使用无不良影响。在蛋品质方面，辣木叶以及辣木叶和地衣芽孢杆菌联合使用对产蛋后期蛋鸡蛋黄颜色和蛋黄重有所改善，且效果优于地衣芽孢杆菌单独使用。在抗氧化能力方面，辣木叶、地衣芽孢杆菌以及辣木叶和地衣芽孢杆菌联合使用均可使产蛋后期蛋鸡血清抗氧化能力提升。综上所述，辣木叶以及辣木叶和地衣芽孢杆菌联合使用对产蛋后期蛋鸡生产性能无不利影响，对蛋品质、抗氧化能力有较好改善作用。