血清STIP1、sPD-L1水平与肝癌TACE术后患者预后的关系*

陈燕波,周奕彬,张卓敏

普宁市人民医院：1.检验科;2.肝胆科,广东普宁 515300

原发性肝癌是临床上常见的恶性肿瘤之一，具有侵袭性强、增殖速度快、复发率和病死率高等特点，其病死率在所有消化系统恶性肿瘤中居第3位[1]。由于患者发病早期症状不明显，大部分患者就诊时已处于中晚期，导致患者治疗相对困难，严重影响着患者生存预后。肝动脉化疗栓塞术(TACE)是目前晚期肝癌患者的主要治疗方式之一，可有效控制肝内病灶进展，延长肝癌患者的生存期[2]。磷酸化应激诱导蛋白1(STIP1)能够通过调节热激蛋白70(HSP70)和HSP90连接及二聚化参与调控细胞的多个生理过程[3]。有研究报道[4]，血清STIP1在卵巢癌患者表达水平升高，其水平升高与卵巢癌患者的不良预后密切相关。可溶性程序性死亡配体1(sPD-L1)是由基质金属蛋白酶裂解细胞膜表面PD-L1而形成，存在于多种恶性肿瘤(如肺癌、胃癌等)的血清中[5]。韩瑞等[6]报道，胰腺癌患者外周血 sPD-L1水平明显升高，其在评估患者预后方面有较高的临床价值。目前，血清STIP1、sPD-L1与肝癌TACE术后患者预后关系的研究较少。因此，本研究旨在探讨肝癌TACE术后患者血清STIP1、sPD-L1水平，并分析其与患者预后的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年1月至2017年6月在本院接受TACE治疗的原发性肝癌患者126例为肝癌组，其中男75例，女51例；年龄31～75岁，平均(58.36±10.42)岁。选取本院同期体检健康者80例为对照组，其中男40例，女40例；年龄28～70岁，平均(56.11±7.39)岁。两组患者的年龄、性别比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。纳入标准：(1)符合《原发性肝癌诊疗规范(2017年版)》[7]，经影像学和病理学检查确诊为原发性肝癌；(2)均行TACE治疗；(3)初诊治患者，术前未接受放、化疗等抗肿瘤治疗；(4)患者自愿参加研究，签署知情同意书。排除标准：(1)严重心肺肾功能障碍者；(2)合并其他器官恶性肿瘤者；(3)凝血功能和自身免疫系统疾病患者；(4)转移性肝癌患者；(5)临床随访资料不完整者。本研究已获得本院医学伦理委员会审批通过。

1.2方法

1.2.1血清STIP1、sPD-L1检测 所有患者均在入院时及TACE治疗1周后空腹状态下抽取外周静脉血5 mL，置于 EDTA 抗凝管中静置30 min，3 000 r/min 离心10 min，取上清液，置于-80 ℃ 冰箱保存待测。采用酶联免疫吸附法检测血清STIP1、sPD-L1水平。血清STIP1试剂盒购自上海通蔚实业有限公司，血清sPD-L1试剂盒购自美国RD公司，所有操作均按照试剂盒说明书严格进行操作。

1.2.2临床资料收集 收集原发性肝癌患者的临床资料，包括患者的年龄、性别、肿瘤数量、肿瘤直径、有无门静脉癌栓、有无肝外转移、Child-Pugh分级和BCLC分期等。

1.3随访 采用门诊和电话等方式对原发性肝癌TACE术后患者进行为期3年随访，术后第1年每2个月随访1次，术后第2～3年每3个月随访1次。死亡为随访终点，随访截止时间为2019年12月。

2 结 果

2.1肝癌组与对照组血清STIP1、sPD-L1水平比较 肝癌组患者血清STIP1、sPD-L1水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 肝癌组与对照组血清、sPD-L1水平STIP1比较

2.2肝癌组TACE治疗前与治疗后血清STIP1、sPD-L1水平比较 肝癌患者治疗后血清STIP1、sPD-L1水平均低于治疗前，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 肝癌组TACE治疗前与治疗后血清STIP1、sPD-L1水平比较

2.3血清STIP1、sPD-L1评估肝癌TACE术后患者预后的ROC曲线 ROC曲线结果显示：血清STIP1评估肝癌TACE术后患者预后的AUC为0.818(95%CI：0.732～0.903，P=0.000)，cut off值为61.40 ng/mL，灵敏度和特异度分别为0.781和0.722；血清sPD-L1评估患者预后的AUC为0.861(95%CI：0.791～0.935，P=0.000)，cut off值为6.11 ng/mL，灵敏度和特异度分别为0.797和0.750；两项联合检测评估患者预后的AUC为0.939(95%CI：0.905～0.978，P=0.000)，灵敏度和特异度分别为0.859和0.868。见图1。

图1 血清STIP1、sPD-L1评估肝癌TACE术后患者预后的ROC曲线分析

2.4血清STIP1、sPD-L1水平与肝癌TACE术后患者预后的关系 截至2019年12月，共126例获得随访，死亡72例。根据血清STIP1、sPD-L1最佳cut off值，将患者分为高、低STIP1、sPD-L1组。79例高STIP1组患者死亡52例，总生存率为34.18%；47例低STIP1组患者死亡20例，总生存率为57.45%，两组患者总生存率比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见图2。74例高sPD-L1组患者死亡48例，总生存率为35.14%；52例低sPD-L1组患者死亡24例，总生存率为53.85%，两组患者总生存率比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见图3。

图2 高、低STIP1组患者生存率比较.

图3 高、低sPD-L1组患者生存率比较.

2.5影响肝癌TACE术后患者不良预后的危险因素分析 Cox比例风险模型进行单因素分析结果显示，肿瘤数量、肿瘤直径、门静脉癌栓、肝外转移、BCLC分期、血清STIP1和sPD-L1可能与患者预后不良有关(均P<0.05)；多因素分析结果显示，肿瘤数量、肿瘤直径、门静脉癌栓、血清STIP1和sPD-L1是影响肝癌TACE术后患者预后不良的独立危险因素(均P<0.05)，见表3。

表3 影响肝癌TACE术后患者不良预后的危险因素分析[M(P25～P75)]

3 讨 论

原发性肝癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一，其发病机制与多种因素有关如病毒性肝炎、环境因素、食用黄曲霉素等。目前，随着人们生活方式的改变，肝癌的发病率也呈现出逐年上升的趋势，严重威胁着人民生命健康安全。肝癌患者不仅病情进展快，极易复发和转移，且预后较差，5年生存率小于10.00%，病死率大于50.00%[8]。手术是目前肝癌的主要治疗方法，但部分患者就诊时已发展为晚期肝癌，已不具备手术指征。TACE可通过栓塞阻断肿瘤动脉，促进肝癌细胞坏死，进而控制患者病情进展，在延长患者生存时间、改善预后方面有积极作用[9]。因此，尽早评估肝癌患者的预后状况，进而采用有效的治疗手段，对改善患者预后具有重要意义 。

STIP1也称为HSP70、HSP90组织蛋白，是一种62.6×103蛋白，包含3个四肽重复基序和2个核定位信号，其在调节转录和细胞内信号转导及细胞增殖和分裂中起着重要作用。同时，STIP1也可通过结合 ALK2 和活化 SMAD-ID3 信号通路促进肿瘤细胞增殖，与微管蛋白相互错用调节细胞极化和迁移来促进肿瘤血管生成[10]。既往研究证实，STIP1表达升高与多种恶性肿瘤(如胃癌、甲状腺癌)的细胞增殖、侵袭、迁移有关[11-12]。研究表明，STIP1在肝癌中过度表达，并可促进肝癌细胞的生长和转移，STIP1表达升高也与肝癌患者肿瘤分期及生存期有关，并对患者不良预后有较高预测价值[13]。sPD-L1作为一种跨膜转运糖蛋白，是由免疫细胞在促炎性细胞因子刺激下产生的，受周围细胞因子、炎症环境等多种因素调节，并在多种肿瘤的发生、发展中起着重要作用。sPD-L1在功能上与PD-L1相似，其水平升高可与PD-1受体更多结合，抑制T细胞活化，导致机体正常的免疫系统受到抑制，从而导致细胞的凋亡过程受阻，进而使患者病情加重[14]。KUSHLINSKII等[15]报道称：血清sPD-L1水平与肾细胞癌患者的肿瘤分期及转移密切相关。研究证实，血清sPD-L1水平升高与晚期食管癌及非小细胞肺癌患者的生存预后较差有关，也是用于评估患者预后状况的一种生物标志物[16-17]。

本次研究结果显示，肝癌组患者血清STIP1、sPD-L1水平高于对照组，肝癌治疗后的血清STIP1、sPD-L1水平低于治疗前，差异有统计学意义，说明血清STIP1、sPD-L1变化在肝癌病变过程中发挥着重要作用，也提示TACE 可通过栓塞作用及化疗药物作用来抑制肿瘤的生长。STIP1也可分泌到细胞外，作为细胞因子影响细胞增殖和凋亡，分泌型STIP1可通过进入机体的循环系统来介导肿瘤细胞的生长和进展，进而血清STIP1表达升高与恶性肿瘤患者总生存期差有关。机体慢性炎症与肿瘤发生发展密切相关。血清sPD-L1水平受患者的肿瘤负荷和肿瘤外炎性环境共同影响[16]，并在预测恶性肿瘤患者的治疗反应及预后方面有着重要作用。研究发现，肝癌合并系统性炎症患者中血清sPD-L1水平明显升高，血清sPD-L1升高也是预测患者预后的潜在指标[18]。ROC曲线结果显示，血清STIP1、sPD-L1两项联合检测评估患者预后的AUC为0.939，灵敏度和特异度分别为0.859和0.868，均高于血清STIP1、sPD-L1单独检测，说明联合检测血清STIP1、sPD-L1对肝癌TACE术后患者预后的评估价值更高，进而有利于指导患者临床治疗，降低患者病死率。高STIP1、sPD-L1值组患者的生存率分别低于低STIP1、sPD-L1值组，差异有统计学意义，提示血清STIP1、sPD-L1水平变化与肝癌TACE术后患者的生存率有关，而STIP1、sPD-L1高表达不利于肝癌TACE术后患者的预后。多因素回归分析示：血清STIP1、sPD-L1水平升高是肝癌TACE术后患者预后不良的独立危险因素，提示血清STIP1、sPD-L1水平越高，肝癌患者的死亡风险越大，与MA等[19]和ELGEBALY等[20]报道相似。STIP1可正向调控癌细胞生长和迁移，并通过调控ID3表达来影响癌细胞EMT转化，参与癌细胞的侵袭和转移过程，与患者病情进展及不良预后密切相关。恶性肿瘤细胞和影响其浸润的免疫细胞可分泌大量PD-L1，二者结合后可抑制免疫细胞活化，使其逃避免疫系统监视，使肿瘤生长、侵袭与转移活性增强，进而影响患者预后。

综上所述，血清STIP1、sPD-L1水平变化与肝癌TACE术后患者的预后有关，两项联合检测可用于评估肝癌TACE术后患者预后。