血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平在急性脑梗死患者中的表达及临床意义

臧栋，杨丽洁，吴振安

(北京市中西医结合医院检验科，北京 100039)

急性脑梗死(acute cerebral infarction，ACI)是脑血供突然中断后所致的脑组织坏死，起病突然，且致死率及致残率高，多数患者治疗后仍会遗留一定程度的后遗症，给患者家属及社会带来巨大的负担[1-2]。因此，加强ACI患者的病情监测及预后评估尤为重要。有证据[3]显示，ACI患者常伴随血清同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)水平的异常升高，可能是引发其发生的重要影响因素之一。脂蛋白磷脂酶A2(lipoprotein phospholipase A2，Lp-PLA2)是一种血管特异性的炎症标志物。研究[4]表明，Lp-PLA2可加速动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)形成，是导致AS发生的重要危险因素之一，还会增加脑血管疾病发生的风险。Beclin-1是一种自噬调控基因，可参与调控细胞凋亡，可能在脑组织缺血再灌注损伤中发挥了重要作用[5]。目前，上述三种物质在ACI患者中的意义尚未完全明确。本研究探旨在探讨Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1在ACI患者中的表达水平及临床意义，以期为患者病情监测及预后情况评估提供数据参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月至2020年10月北京市中西医结合医院收治的83例ACI患者为观察组，再按脑梗死面积分为小面积组(n=34)、中面积组(n=26)及大面积组(n=23)；按神经缺损程度分为轻度组(n=37)、中度组(n=23)、重度组(n=23)；按随访两个月患者预后结局分为生存组(n=69)和死亡组(n=14)；另选50名同期体检健康的志愿者为对照组。观察组中，男性57例，女性26例；年龄33～73岁，平均(52.84±9.85)岁；体质量指数(body mass index，BMI)(23.84±1.55)kg/m2；既往史：高血压25例，糖尿病15例。本研究经医院伦理委员会审核批准，患者及家属知情同意，观察组与对照组患者一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

纳入标准：(1)均符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2014》[6]中急性缺血性脑卒中的诊断标准；(2)年龄18～80周岁；(3)初次发病，发病时间≤4.5 h；(4)血压<180/100 mmHg；(5)近期无重大手术史、无出血倾向；(6)近期未服用降脂类药物；(7)配合度高，自愿检测相关指标；(8)近期均无降脂类药物服用史。排除标准：(1)经CT检查发现有颅内出血、颅内肿瘤、脑血管畸形等；(2)既往有颅内出血史，入组前3个月内有头颅外伤史及心肌梗死史；(3)合并活动性出血、严重创伤者；(4)血小板计数<100×109/L；(5)伴精神疾病、晚期恶性肿瘤；(6)伴自身免疫性疾病、血液系统疾病；(7)肝、肾及心功能不全；(8)妊娠、哺乳女性。

1.2 方法

1.2.1 病情评估及随访 (1)脑梗死面积：采用头颅CT、MRI检查后评估，面积<1.5 cm为小面积梗死，1.5～3 cm为中面积梗死；>3 cm且累及两个以上解剖部位为大面积梗死；(2)神经缺损程度：采用美国国立卫生研究院卒中量表(national Institute of health stroke Scale，NIHSS)[7]评分评估，≤4分为轻度，5～15分为中度，≥16分为重度；(3)随访：观察组患者以电话、短信或门诊复查随访2个月预后结局，即生存或死亡。

1.2.2 血清学指标检测 采集所有研究对象晨起空腹静脉血5 mL，离心分离血清。酶循环法检测Hcy水平，试剂盒购自宁波美康生物科技股份有限公司；酶联免疫法检测；Lp-PLA2、Beclin-1水平，试剂盒分别购自天津康尔克生物科技有限公司、美国Usbiological公司。操作均按试剂盒说明进行。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 观察组与对照组血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平比较

观察组血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 观察组与对照组血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平比较

2.2 不同梗死面积患者血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平比较

不同梗死面积患者血清血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平差异有统计学意义，且大面积组高于小面积组及中面积组(P<0.05)，中面积组高于小面积组(P<0.05)。见表2。

表2 不同梗死面积患者血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平比较

2.3 不同神经缺损程度患者血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平比较

不同神经缺损程度患者血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)，且重度组高于轻度组及中度组(P<0.05)，中度组高于轻度组(P<0.05)。见表3。

表3 不同神经缺损程度患者血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平比较

2.4 不同预后结局患者血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平比较

死亡组患者血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平高于生存组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 不同结局患者血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin1水平比较

3 讨论

ACI是十分常见的脑卒中类型，发病机制较复杂，一般认为是因患者供应脑部血液的动脉出现粥样硬化和血栓形成，造成管腔狭窄、闭塞，继而引发区域性脑组织出现缺血，最终导致其发生[8]。患者由于脑部局灶性血运减少，会损伤周围神经元细胞、神经胶质细胞等，造成神经功能损害，诱发感觉及运动异常，甚至意识障碍，危及患者生命。

已有证据[9]表明，AS是导致ACI发生的重要病理生理学机制，而炎症反应在AS的发生、发展过程中扮演了重要角色。Lp-PLA2是磷脂酶A2超家族中的成员之一，主要由淋巴细胞、巨噬细胞等炎性细胞分泌，是一种与低密度脂蛋白C(low density lipoprotein C， LDL-C)水解氧化生成促炎物质相关的酶。有文献[10]报道，Lp-PLA2不仅与血管炎性反应关系密切，还对AS、不稳定斑块形成有促进作用。本研究结果显示，观察组患者血清Lp-PLA2水平高于对照组，且随着ACI患者的脑梗死面积增大、神经缺损程度加剧及预后结局的恶化不断升高(P<0.05)，表明其水平可能在一定程度上反映了患者病情进展情况，并可作为预后评估的潜在参考指标。LDL的氧化过程中，Lp-PLA2作用后产生了自由脂肪酸、溶血磷脂酰胆碱两种促炎产物，均会刺激黏附因子及细胞因子产生，从而促进AS的发生，加速病情进展。

血清同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是蛋氨酸代谢的中间产物，为一种血管损伤性氨基酸，与血管内皮损伤密切相关。既往研究[11]显示，血清Hcy水平异常升高可能会增大AS等心血管疾病的发生风险。近年有研究[12]发现，血清Hcy水平异常升高在ACI患者中也较为常见，且Hcy水平越高，患者神经功能损伤越严重，可能是Hcy可介导炎症因子和自由基的生成，而高Hcy水平会引发机体的炎症反应和氧化应激增加，损害血管内皮细胞，导致血管功能障碍，病情加剧[13]。本研究结果显示，观察组患者血清Hcy水平明显高于对照组，且随患者脑梗死面积、神经缺损程度的增加而升高(P<0.05)，表明Hcy可能与ACI的发生发展有关，可能是一种潜在的病情监测指标。同时，本研究还发现，死亡组患者血清Hcy水平高于生存组(P<0.05)，提示监测血清Hcy水平对患者预后判断可能也有一定的意义。

Beclin-1属于酵母Apg6/Vps30基因的同源物，能与死亡相关蛋白相结合，诱导细胞凋亡。多数哺乳动物体内均含有Beclin-1蛋白，能够参与自噬调控机制，当机体内存在氧化应激、神经毒反应时，会激活机体发生自噬[14]。目前有关Beclin-1在ACI患者中的表达情况报道较少。本研究结果显示，ACI患者血清Beclin-1水平升高，且随着脑梗死面积增大、神经缺损程度加剧不断升高(P<0.05)，表明Beclin-1可能参与了ACI的发生、发展过程。脑缺血损伤后，机体主要通过抑制自噬，发挥对神经保护的作用，而Beclin-1蛋白可能在此过程中起到关键作用。一项动物实验研究[15]表明，ACI大鼠梗死组织中的Beclin-1蛋白表达明显增多，提示脑缺血时可能存在神经细胞的过度自噬。本研究还发现，存活患者相比，死亡组患者血清Beclin-1水平高于生存组(P<0.05)，表明Beclin-1与患者预后也存在一定关联，可为预后评估提供参考。

综上所述， ACI患者血清Hcy、Lp-PLA2及Beclin-1水平升高，并与脑梗死面积、神经缺损程度及患者预后有关，可作为患者病情监测及预后评估的指标。