G试验联合白介素-6、白介素-10和半乳甘露聚糖检测对慢性阻塞性肺疾病急性加重期并发侵袭性肺部真菌感染的早期诊断价值

赵万富

(郑州市第三人民医院 检验科，河南 郑州 450000)

慢性阻塞性肺疾病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD)属于临床常见的呼吸系统疾病。近年来随着广谱抗菌药物的普及应用以及患者自身免疫功能的降低，侵袭性肺部真菌感染成为AECOPD患者死亡的主要原因[1]。AECOPD的早期确诊和对症干预对改善患者预后、降低病死率具有重要意义。然而，真菌感染性疾病诊断困难，真菌培养虽能确定诊断，但操作复杂，耗时久易贻误治疗时机。G试验和血清白细胞介素(interleukin，IL)-6、IL-10、半乳甘露聚糖(galactomannan，GM)水平检测均是临床上常用的感染性疾病诊断方法，各具优缺点。本研究旨在观察上述方法联合应用对AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染的早期诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2018年3月至2019年3月在郑州市第三人民医院就诊的72例AECOPD患者，把单纯AECOPD患者作为对照组(50例)，把并发侵袭性肺部真菌感染患者作为观察组(22例)。观察组男13例，女9例；年龄46～73岁，平均(59.48±5.67)岁；体质量指数(body mass index，BMI)17.6～25.4 kg·m-2，平均(21.51±1.33)kg·m-2；合并基础疾病高血压5例，冠心病2例，糖尿病2例。对照组男27例，女23例；年龄44～72岁，平均(60.18±5.39)岁；BMI为17.2～25.7 kg·m-2，平均(21.48±1.26)kg·m-2；合并基础疾病高血压13例，冠心病4例，糖尿病5例。两组患者性别、年龄、BMI、合并基础疾病等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经郑州市第三人民医院医学伦理委员会审批通过。

1.2 纳入及排除标准(1)纳入标准：①明确COPD病史；②处于急性发作期；③入组前未接受抗真菌治疗；④患者自愿签署知情同意书。(2)排除标准：①细菌及其他病原体感染；②肺以外部位感染。

1.3 检测方法

1.3.1收集样本 患者均行G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测。取患者晨起空腹静脉血3 mL，离心半径8 cm，3 500 r·min-1离心10 min，取上清液，保存至-80 ℃冰箱待测。

1.3.2G试验 取待测血清加入酶反应主剂，待溶解以微量加样器移至9 mm×65 mm平底试管，插入微生物快速动态监测系统(湛江安度斯生物有限公司，MB-80型)自动显示1，3-β-D葡聚糖水平>10 ng·L-1记为阳性。

1.3.3血清IL-6、IL-10水平检测 取待测血清，采用酶联免疫吸附法测定患者血清IL-6、IL-10水平。

1.3.4GM检测 取待测血清，与配比血清处理液混匀，水浴3 min(100 ℃)，离心，取上清液50 μL，与50 μL结合液加入EB-A2微孔板，封板，孵育90 min(37 ℃)，加显色液，避光置30 min，加终止液以自动定量酶标仪读吸光度值(A值)，A值需介于0.3～0.8间，连续2次有效A值>0.5者为阳性(+)。并发侵袭性肺部真菌感染阳性标准：上述检测任一诊断为阳性即为阳性。

1.4 观察指标(1)对比两组G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测结果。(2)以真菌培养为金标准，分析G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测结果。(3)比较血清IL-6、IL-10、GM水平检测与G试验联合诊断效能。

2 结果

2.1 G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测观察组患者1，3-β-D葡聚糖水平、血清IL-6及IL-10水平、GM检测A值高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组患者G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测结果比较

2.2 检测结果72例AECOPD患者中，经真菌培养确诊为并发侵袭性肺部真菌感染22例，血清IL-6、IL-10水平检测检出12例，G试验检出12例，GM检测检出14例，3种方法联合检出者24例。见表2。

表2 3种检测方法结果比较(n)

2.3 诊断效能G试验联合血清IL-6、IL-10、GM水平检测AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染灵敏度为90.91%，高于G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测，差异有统计学意义；G试验联合血清IL-6、IL-10、GM水平检测漏诊率为9.09%，低于G试验、GM检测、血清IL-6及IL-10水平检测，差异有统计学意义(P<0.05)；3种方法联合对AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染诊断的准确度、特异度、误诊率、阳性预测值、阴性预测值与G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 不同方法诊断效能比较[%(n/N)]

3 讨论

COPD病情久且常反复发作，患者长期接受糖皮质激素、抗生素治疗可致免疫功能抑制，易遭受二重感染，其中以侵袭性肺部真菌感染最为常见[2]。据统计，AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染时病死率达95.00%[3]。因此，临床上需加强早期预防及诊断，以改善患者预后。

血清IL-6、IL-10及GM水平检测是临床上评估机体炎症反应及真菌感染的常用方法。IL-6为炎症指标，有研究表明，正常情况下血清中IL-6水平极低(<7 ng·L-1)，当致病菌感染时会迅速升高[4-5]；IL-10是免疫调节因子，主要由Th2及调节性T细胞生成，能调节Th1细胞应答及巨噬细胞活性，相关研究证实，AECOPD患者血清IL-6、IL-10水平会升高，且可评估炎症反应的严重程度[6]。本研究发现，观察组AECOPD患者血清IL-6、IL-10水平高于对照组，与上述研究结果相符，说明存在侵袭性肺部真菌感染时IL-6、IL-10增加，但是发现血清IL-6、IL-10升高并无特异性，因此，无法鉴别真菌感染。此外，本研究还发现，观察组患者血清1，3-β-D葡聚糖水平和A值高于对照组，与血清IL-6、IL-10水平变化一致，或可辅助鉴别真菌感染。GM检测主要适用于侵袭性曲霉菌的早期诊断，但有报道显示，β(1-5)呋喃半乳糖残基为曲霉菌特有的细胞壁多糖成分，GM检测存在一定漏诊情况[7-8]。G试验主要检测真菌细胞壁成分1，3-β-D-葡聚糖，研究显示，人体吞噬细胞吞噬真菌后可持续释放上述物质，迅速升高血液、体液中1，3-β-D-葡聚糖水平，有利于真菌感染的早期诊断[9-10]。本研究结果显示，G试验联合血清IL-6、IL-10、GM水平检测AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染灵敏度高于G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测，漏诊率低于G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测，提示G试验联合血清IL-6、IL-10水平及GM检测在AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染具有较高的诊断效能，有利于疾病的早期确诊。但本研究首次探讨G试验联合血清IL-6、IL-10、GM水平检测对AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染的诊断价值，且样本量较小，所得结论需大样本量研究进一步验证。

综上可知，G试验联合血清IL-6、IL-10、GM水平检测对AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染诊断具有较高的灵敏度，能降低早期诊断漏诊率，可为临床上制定治疗方案提供参考依据。