微住凝胶技术在新生儿ABO 溶血病检测中的应用及结果分析

叶志达，唐炳娣

(1.广东省惠州市第一妇幼保健院，广东 惠州 516007；2.惠州市第三人民医院，广东 惠州 516007)

0 引言

新生儿溶血病(hemolytic disease of the new-born，HDN)是指母子血型不合所致的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病。主要是胎儿红细胞(含有母亲缺乏的父系遗传抗原)经胎盘进入母体循环刺激母体产生免疫性抗体(主要为 IgG 类)[1]。是造成新生儿死亡、智力发育的主要疾病之一，一旦发病，可引起新生儿肝脾水肿、肿大、贫血、黄疸等一系列疾病，病情严重者可诱发胆红素脑病，对新生儿健康构成严重危害。临床中早期发现、早期诊断治疗，是降低HDN 危害性的关键，对改善新生儿预后至关重要[2]。目前，临床早期检查HDN 方法较多，有研究指出，微住凝胶技术具备操作简单、高准确度、高灵敏度等优点。本研究选取2019 年1 月至2020 年9 月共994例疑似新生儿溶血病(HDN)新生儿作为观察对象，分析微住凝胶技术的价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

纳入2019 年1 月至2020 年9 月共994 例疑似新生儿溶血病(HDN)新生儿作为观察对象，其中男童534 例、女童460例，日龄均≤12d，其中≤3d 患儿522 例，3＜n≤7d 患儿368例，＞7d 患儿104 例。

1.2 方法

采集新生儿血液标本，进行常规离心处理，分离血清；新生儿抗凝全血标本使用生理盐水洗涤3 次，配置0.5%-0.8%浓度红细胞混悬液，剩余1mL 压积红细胞待用。

直接抗人球蛋白试验：取1 张抗人球蛋白卡，将0.5%-0.8%红细胞悬液50μL 加入孔中，离心观察结果。

游离抗体试验：标记抗人球蛋白卡实验，分别将0.5%-0.8%红细胞悬液50μL 加入ABO 孔，加入新生儿血清50μL，孵育15min，离心观察结果。

释放试验：取大试管1 只，加入洗涤3 次的新生儿压积红细胞1mL，并加入1mL 生理盐水，水浴10min，温度56℃，同时振摇；离心2min，分离上清放散液备用。标记抗人球蛋白卡，分别将0.5%-0.8%红细胞悬液50μL 加入ABO 孔，加入放散液50μL，孵育15min，离心观察结果。若O 孔阳性，提示可释放出ABO 以外抗体，另拿一张抗人球蛋白卡，并将抗体筛选细胞I、II、III 加入，对ABO 以外不规则抗体加入放散液50μL 筛选。

1.3 结果判读

仅1 项游离试验或直抗试验阳性，判为“可疑为 HDN”；有2 项阳性或者释放试验单项阳性均为 HDN[3]。

1.4 统计学

将本次研究所得所有项目数据资料均纳入SPSS 21.0软件分析，t检验与χ2检验，P＜0.05 可认为有统计学意义，P＜0.01 有非常显著性的差异。

2 结果

2.1 检测结果分析

血清学检验显示，994 例疑似HDN 新生儿中，确诊为ABO-HDN 患儿共计559 例，确诊率为56.24%；其中O/A 血型患儿264 例(59.06%)、O/B 血型患儿294 例(61.25%)。994例疑似病例中，直抗阳性1.21%、游离阳性52.31%、放散阳性56.24%。详见表1。

表1 血清学检测疑似新生儿ABO 溶血病患儿结果(%)

2.2 三项试验检测结果HDN 构成

对确诊559 例ABO-HDN 患儿进行三项试验检测，结果显示，游离试验+放散试验阳性占比最高85.69%，单项放散试验阳性为12.16%，放散+游离+直抗阳性为2.15%。详见表2。

表2 新生ABO-HDN 患儿三项实验结果(%)

2.3 分析新生儿出生天数与ABO-HDN 阳性检出关系

研究结果分析显示，新生儿出生天数≤3d 新生儿ABOHDN 阳性检出率最高，为63.98%；其次出生3＜n≤7d 新生儿ABO-HDN 阳性检出率为50.54%，出生＞7d 新生儿ABOHDN 阳性检出率37.50%，详见表3。

表3 分析新生儿出生天数与ABO-HDN 阳性检出关系(%)

3 讨论

HDN 是在临床上较为常见的免疫性疾病，主要因母婴血型不合，造成母体IgG 抗体经胎盘进入胎儿体内，破坏胎儿红细胞最终致病[4-5]。在新生儿HDN 病中，其他血型及Rh 血型等引起HDN 则相对较为少见，母婴ABO 血型不符合最为常见。HDN 疾病危害性重大，可造成新生儿智力发育障碍，死亡等，对新生人口质量造成严重影响。因此，在临床中采取敏感、可靠、有效的早期诊断、筛查方法，对HDN 及时发现，早期治疗意义重大。

传统试管法抗人球试验是诊断HDN 的经典方法，但在早期诊断中仍然存在不足。探索一种快速、有效的方法尤为必要[6]。微住凝胶技术作为一项新的方法，该方法结合微住凝胶技术与传统试管法抗人球试验；该方法属于免疫学检查技术之一，在国外发达国家已得到广发推广，被用于常规红细胞血型血清检查；相比于传统方法，微住凝胶技术能够降低诊断误差率，提高诊断特异性与敏感性，为临床提供更为准确、科学的数据支持，在早期新生儿ABO-HDN 疑似病例诊断中具备独特优势[7-8]。

本研究对994 例疑似HDN 新生患儿应用微住凝胶技术检查，结果显示，确诊为ABO-HDN 患儿共计559 例，确诊率为56.24%；其中O/A 血型患儿264 例(59.06%)、O/B 血型患儿294 例(61.25%)，说明在新生儿ABO-HDN 疾病诊断中，微住凝胶技术具备良好的准确性。而研究显示，游离试验+放散试验阳性占比最高85.69%，单项放散试验阳性为12.16%，放散+游离+直抗阳性为2.15%，说明ABO-HDN 患儿中，三项实验联合检测对HDN 诊断作用巨大，可进一步提高诊断准确率；结合胆红素检测结果，多方面综合考虑分析，可进一步提高准确性[9]。

此外，本研究显示，新生儿出生天数≤3d 新生儿ABOHDN 阳性检出率最高，为63.98%，提示随着新生儿出生天数延长，ABO-HDN 阳性检出率下降；因此，在ABO-HDN 筛查中，应当在出生3d 内尽快检查，以确保诊断准确率。

综上，ABO-HDN 新生儿运用微住凝胶技术检查，具备诊断准确率高，可为临床提供科学、有效依据，值得推广。