粪便钙卫蛋白联合血清学抗体检测诊断炎症性肠病的临床应用价值

高丹，王科峰，卢丽萍

（中国医科大学附属盛京医院 1.检验科；2.泌尿外科，沈阳 110004）

炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）是一类主要累及消化道的慢性非特异性肠道炎症性疾病，主要包括溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）和克罗恩病（Crohn disease，CD）。IBD的病因及发病机制尚不完全明确，其诊断主要依据临床表现、实验室检查、影像学检查、内镜和组织病理学检查［1-2］。近年来，IBD的实验室检查取得了较大的进展，可以通过某些生物标志物辅助IBD的诊断与鉴别诊断、疾病活动度的评估、治疗应答以及预测复发［3-4］。这些生物标志物主要有粪便钙卫蛋白（fecal calprotectin，FC）及慢性IBD抗体，包括抗胰腺腺泡抗体（antipancreatic antibody，PAB）、抗酿酒酵母抗体（antisaccharomyces cerevisiae antibody，ASCA）、抗小肠杯状细胞抗体（anti-intestinal goblet cell antibody，GAB）、核周型抗中性粒细胞胞浆抗体（perinuclear antineutrophil cytoplasmic antibodies，pANCA）等。本 研究拟对FC和慢性IBD抗体在肠道疾病中的检测结果进行总结，并对其在IBD诊断中的应用价值进行分析。

1 材料与方法

1.1 临床资料

选择2019年3月至2020年3月中国医科大学附属盛京医院消化内科收治的肠道疾病患者106例，年龄14～84岁，男62例，女44例，以病理及肠镜检查结果为金标准分为UC组（n=64）和CD组（n=42）。另选择同期健康体检者（n=30）作为对照组（均无遗传性家族病史、自身免疫性疾病及腹痛、腹泻等临床症状）。UC组和CD组患者均符合IBD诊断与治疗的共识意见［1］，并排除严重心、肝、肾疾病等。

1.2 方法

1.2.1 粪便标本采集：在肠镜检查口服清肠药前3 d内留取清晨第1次排便的标本［5-6］。严格按照钙卫蛋白检测试剂盒（胶体金法）（珠海市医友生物科技有限公司）说明书进行粪便标本采样，用试剂盒标本处理管中的采样棒采取约15 mg的固体粪便标本至1.5 mL稀释液中；若为液体标本，则用微量移液器移取15 μL粪便标本至1.5 mL稀释液中。尽量保证不同标本粪便取样量一致。检测标本时严格按照说明书操作，保证每份标本滴加的样本液和结果判读的时间均一致。由2名检验主管技师同时进行结果判读，以保证结果的一致性。

1.2.2 血液样本采集：清晨采集患者空腹静脉血3～4 mL，置于真空促凝管中，离心5 min（3 500 r/min）。采用慢性IBD抗体检测试剂盒（间接免疫荧光法）（德国欧蒙医学实验诊断股份公司）体外定性检测人血清中IgA和IgG型PAB、ASCA、GAB 和pANCA。严格按照说明书操作，由2名检验主管技师同时进行结果判读，以保证结果的一致性。

1.3 统计学分析

采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，计数资料用率（%）表示，组间比较采用χ2检验；采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线，计算曲线下面积（area under curve，AUC）。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组患者中IgA和IgG型PAB、ASCA、GAB、pANCA及FC的阳性比例分布

UC组FC阳性率与对照组比较，差异有统计学意义（P＜ 0.05）；CD组FC、PAB-IgG、ASCA-IgG、GAB-IgG阳性率与对照组比较，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。见表1。

表1 各组患者FC、PAB、ASCA、GAB和pANCA的阳性检测结果［n（%）］Tab.1 The positive results of FC，PAB，ASCA，GAB and pANCA in each group ［n（%）］

2.2 各组中FC、慢性IBD抗体阳性检测结果

4种慢性IBD抗体中1项为阳性则判定为慢性IBD抗体检测阳性。本研究结果显示，UC、CD组FC、慢性IBD抗体及联合检测阳性率与对照组比较，差异有统计学意义（P＜ 0.05）；各组FC、慢性IBD抗体联合检测阳性率高于2项指标单独检测。其中，UC组FC、慢性IBD抗体联合检测阳性率与慢性IBD抗体单独检测比较，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。见表2。

表2 各组FC和慢性IBD抗体阳性检测结果［n（%）］Tab.2 The positive results of FC and antibody against chronic inflammatory bowel disease in each group ［n（%）］

2.3 FC、慢性IBD抗体诊断IBD准确性比较

以肠镜及病理诊断为金标准，其他肠道疾病组为对照，绘制FC、慢性IBD抗体诊断IBD的ROC曲线。结果显示，FC、慢性IBD抗体、FC联合慢性IBD抗体的AUC分别为0.859、0.583、0.828；95%CI分别为0.790～0.929，0.478～0.688，0.738～0.917。提示FC诊断IBD准确性更高。见图1。

图1 FC、慢性IBD抗体诊断炎症性肠病ROC曲线Fig.1 ROC curve of FC and antibody against chronic inflammatory bowel disease in the diagnosis of inflammatory bowel disease

2.4 FC、慢性IBD抗体IBD诊断效能分析

联合检测FC与慢性IBD抗体，其中1项阳性即判定为阳性。结果显示，FC联合慢性IBD抗体检测的灵敏度和阴性预测值高于2项指标单独检测；FC单独检测特异性和阳性预测值高于慢性IBD抗体单独检测及FC联合慢性IBD抗体检测。见表3。

表3 FC和慢性IBD抗体检测诊断炎症性肠病的效能评价（%）Tab.3 Efficacy evaluation of FC and antibody against chronic inflammatory bowel disease in the diagnosis of inflammatory bowel disease（%）

3 讨论

目前，诊断IBD主要依据临床表现、内镜检查、组织病理学检查、实验室和放射学检查等，且还需排除其他原因引起的肠道炎症疾病。但内镜属于有创检查，患者的心理负担较重，接受性较差，而且当患者的临床表现、内镜和病理学特征不典型时会更加难以诊断［7］。因此，临床上需要非侵入性、准确客观的方法对IBD患者进行诊断。近年来，IBD的实验室检查取得了很大进展，且实验室检查具有客观、方便、侵入性低等优点，在IBD的诊断方面有很高的价值。

FC主要存在于中性粒细胞，也存在于单核细胞、巨噬细胞、鳞状上皮细胞等。在肠道发生炎症时，由于肠黏膜渗透性增加，使中性粒细胞渗透并释放钙卫蛋白，在粪便中可检测到钙卫蛋白，因此，FC与肠道炎症相关［8］。同时，FC与IBD的筛选、监测和预测疾病复发有关［9］。本研究显示，在IBD中，FC阳性率大于慢性IBD抗体，FC可用于鉴别IBD与非IBD［10］。pANCA是核周型抗中性粒细胞胞浆抗体，可见于20%～80%的UC患者和5%～25%的CD患者［11-14］。ASCA则是抗酿酒酵母抗体，是最早被发现的IBD自生抗体，可见于22%～71%的CD患者和0%～14%UC患者［12-14］，在疾病的缓解期，ASCA仍可以作为CD炎症表现的生物学标志物［15］。PACA是抗胰腺腺泡抗体，它在CD中的阳性率明显高于UC，特异度高达96%～98%，说明可作为诊断CD的特异性血清学指标［13-14］。本研究中，pANCA（IgG+IgA）阳性见于20%的UC患者和7%的CD患者；ASCA（IgG+IgA）阳性见于26%的CD患者和3%的UC患者，与其他研究结论一致。本研究结果提示慢性IBD抗体中，PACA、ASCA与CD相关，可用于鉴别UC；pANCA在UC中的表达高于CD，为UC特异性抗体，与文献［16］报道一致。

FC与慢性IBD抗体联合检测对于IBD与非IBD胃肠道疾病的鉴别具有重要意义［16］。本研究中，各组患者FC与慢性IBD抗体联合检测阳性率高于2项指标单独检测，提高了检测的灵敏度。根据诊断IBD的ROC曲线，FC、慢性IBD抗体、FC+慢性IBD抗体的AUC分别为0.859、0.583、0.828，表明FC和FC+慢 性IBD抗体检测对IBD诊断均有一定价值，但FC单独检测对IBD诊断准确性更高。

在IBD诊断效能方面，单独检测FC对IBD诊断特异性可达91.7%，适合用来鉴别IBD与非IBD，与慢性IBD抗体联合检测可以提高检测的敏感性，因此，FC联合慢性IBD抗体检测在IBD的诊断中具有重要的临床应用价值。