黔产迎春花质量标准研究

姜莲 程韬 王影超 舒柯

【摘 要】 目的：为提升黔产迎春花药材的质量标准提供参考。方法：本研究采用显微鉴别及薄层色谱鉴别法对迎春花进行定性鉴别，同时根据《中国药典》2015年版规定的方法对其水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物进行定量测定，以总黄酮为指标，通过系统的方法学考察，建立迎春花药材的UV含量测定方法。结果：迎春花药材显微特征、薄层色谱斑点均清晰明显。3批迎春花药材样品的水分测定结果为12.1%～13.5%，总灰分测定结果为5.0%～5.8%，酸不溶性灰分测定结果为0.7%～1.2%，浸出物测定结果为26.1%～30.2%，3批迎春花药材中总黄酮的含量为2.50%～3.56%。结论：本研究为提高迎春花药材质量标准提供参考。

【关键词】 迎春花;定性鉴别;总黄酮;含量测定

【中图分类号】R282   【文献标志码】 A    【文章编号】1007-8517（2021）05-0026-04

Quality Standard for Jasminum Nudiflorum from Guizhou Province

JIANG Lian CHENG Tao WANG Yingchao* SHU Ke

Guizhou Institute for Food and Drug Control，Guiyang 550004，China

Abstract：Objective To provide reference for improving the quality standard of Jasminum nudiflorum from Guizhou.Methods Jasminum nudiflorum was qualitatively identified by microscopic characteristics and TLC methods，and referring to Chinese Pharmacopoeia of 2015 edition，water content，total ash，acid-insoluble ash and extract were also determined.Using Total flavonoids as indicators，the content determination with UV in Total flavonoids was established through systematic methodological investigations respectively.Results The microscopic characteristics and the spots of TLC were clear and evident.The moisture，total ash，acid-insoluble ash and extract of 3 Jasminum nudiflorum samples varied in the ranges of 12.1%～13.5%，5.0%～5.8%，0.7%～1.2%，and 26.1%～30.2%，the contents of Total flavonoids in 3 batches of Jasminum nudiflorum were 2.50%～3.56%.Conclusion This study provides a reference for improving the quality standard of Jasminum nudiflorum.

Keywords：Jasminum Nudiflorum;Qualitative Identification;Total Flavonoids;Content Determination

迎春花，又称金腰带、黄素馨，为木犀科植物迎春花Jasminum nudiflorum Lindl.的干燥叶和花。春、夏、秋三季均可采摘，晾干或晒干。药用价值在我国历史悠久，主要功效为解毒消肿、清热利尿、止血止痛，用于发热头痛、小便热痛、跌扑损伤、外伤出血、口疮、痈疖肿痛、下肢溃疡[1]。产于贵州思南、贵阳、安顺等地。我国山西、陕西、甘肃、山东、河南、江苏、四川、云南也有分布[2]。王佩珩等[3-4]对迎春花的化合物进行分析，得到裂环烯醚萜类化合物、黄酮类化合物、迎春花黄色素、多糖类化合物、挥发油类和脂肪酸类等。为提高迎春花的质量控制水平，本实验建立显微鉴别、薄层鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物及总黄酮的含量测定，为迎春花的研究及质量控制提供依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 奥林巴斯BX51型显微镜（OLYMPUS），双光束紫外可见分光光度计TU-1901（北京普析通用仪器有限责任公司），电子调温电热套98-I-C（天津泰斯特仪器有限公司），四用式暗箱紫外分析仪ZF-8（骥辉分析仪器（上海）有限公司）。

1.2 材料 3批迎春花药材均自贵州，分别产至贵州安顺（批号：180801）、贵州贵阳（批号：180802）、贵州贵阳（批号：180803），样品及对照药材经贵州省食品药品检验所标本馆熊慧林老师检定，均为迎春花，并存于贵州省食品药品检验所;芦丁（110752-201514）來源于中国食品药品检定研究院;硅胶G薄层板：青岛海洋化工厂分厂生产的硅胶G薄层板（批号：20170408）及自制硅胶G薄层板;试剂：稀甘油、水合氯醛试液、三氯甲烷、甲醇、硫酸、乙醇均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 显微鉴别 取本品内容物置显微镜下观察：本品粉末淡棕色。叶表皮细胞含砂晶，有气孔;木纤维常见，直径5～30 μm，花粉粒圆形、类圆形、椭圆形，直径20～45 μm，外壁薄，壁上偶见壁沟，花粉粒表面具网格状纹理。

2.2 薄层鉴别 取本品粉末2 g，加70%乙醇30 mL，加热回流1 h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取迎春花对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（75∶35∶4）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。如图2所示。

2.3 检查

2.3.1 水分 按《中国药典》2015年版四部通则0832第二法，测定并计算3批迎春花的水分含量（%），平行操作2次，取平均值作为结果，结果：3批迎春花的水分为12.1%～13.5%。样品测定结果为见表1。

2.3.2 总灰分 按《中国药典》2015年版四部通则2302总灰分测定法，测定并计算3批迎春花的总灰分含量（%），平行操作2次，取平均值作为结果，结果：3批迎春花的总灰分为5.0%～5.8%。样品测定结果为见表1。

2.3.3 酸不溶性灰分 按《中国药典》2015年版四部通则2302总灰分测定法，测定并计算3批迎春花的酸不溶性灰分含量（%），平行操作2次，取平均值作为结果，结果：3批迎春花的酸不溶性灰分为0.7%～1.2%。样品测定结果为见表1。

2.4 浸出物 按《中国药典》2015年版四部通则2201浸出物测定法进行测定，分别用乙醇、50%乙醇、水作为溶剂，热浸法和冷浸法分别测定浸出物，平行操作两次，取平均值作为结果。根据测定结果，选择浸出物含量最高的方法作为浸出物方法，故浸出物测定法为以稀乙醇为溶剂的冷浸法，其测定结果见表2。

2.5 总黄酮的含量测定[5]

2.5.1 供试品溶液的制备 取迎春花粗粉约1.2 g，精密称定，精密加入50 mL 70%乙醇，置具塞锥形瓶中，密塞，称定重量，加热回流40 min，放冷，再次称定重量，用70%乙醇不租减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。

2.5.2 对照品溶液的制备 取芦丁对照品20 mg，精密称定，置50 mL量瓶中，加70%乙醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加70%乙醇至刻度，摇匀。精密量取25 mL，置50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1 mL含芦丁0.2 mg）。

2.5.3 标准曲线的制备及线性关系考察 精密量取对照品溶液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL、6 mL，分别置25 mL量瓶中，各加水至6 mL，加5%亚硝酸钠溶液1 mL，混匀，放置6 min，再加10%硝酸铝溶液1 mL，摇匀，放置6 min。加氢氧化钠试液10 mL，再加水稀释至刻度，摇匀，放置15 min，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在500 nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线（如图3所示），得回归方程：Y=0.0133X-0.0047（r=0.9999），在7.909～47.454 μg芦丁与吸光度之间线性关系良好。

2.5.4 测定法 精密量取供试品溶液1 mL，置25 mL量瓶中，加70%乙醇至6 mL，照标准曲线制备项下的方法，自“加亚硝酸钠溶液1 mL”起，依法测定吸光度，同时取供试品溶液1 mL，除不加氢氧化钠试液外，其余同上操作，作为空白，从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的重量（mg），计算，即得。

2.5.5 精密度、稳定性与重复性试验 取对照品溶液在500 nm的波长处测定吸光度，重复测定6次，RSD=0.2%，表明精密度良好。取供试品溶液，按“2.5.4”项方法测定吸光度，連续测定120 min，计算得含量的RSD=0.2%，表明稳定性良好。取同一批迎春花药材共6份，每份1.2 g，精密称定，按“2.5.1”项方法制备供试品并测定含量，计算得平均含量为2.50%，RSD=0.1%，表明重复性良好。见表3。

2.5.6 准确度试验 精密称取已知含量迎春花粉末0.6 g，平行操作6份，分别精密加入含芦丁对照品（0.2967 mg/mL）50 mL，按“2.5.1”项制备供试品溶液，并按“2.5.4”方法测定吸收光，计算回收率。结果回收率为101.5%，RSD=0.3%，表明方法的准确度良好。见表4。

2.5.7 样品测定 取3批迎春花样品，按“2.5.1”“2.5.4”项下方法制备供试品溶液并测定吸光度，测定总黄酮的含量，结果见表5。

3 结果与讨论

迎春花为贵州习用药材，其现行标准质量控制项目较少，文献关于迎春花质量研究也较少，本研究从定性、定量对迎春花药材进行研究，定性研究中显微特征明显，薄层色谱分离效果较好，重现性佳， 水分、灰分、浸出物测定方法可行。

迎春花的花、叶中含有较为丰富的黄酮类，已有研究证实迎春花提取液具有很好的抗心律失常、镇痛镇静、耐缺氧等作用，故含量以总黄酮为指标，分别考察了不同的提取方式（超声、回流），不同的提取溶剂（乙醇、70%乙醇、稀乙醇、25%乙醇），不同的提取时间（回流30 min、40 min、50 min），结果文中方法提取完全，重现性好，准确度高，方法可行。

随着中药现代化和国际化，民族药资源的开发利用、保护极其重要，应更好地保证该品种的合理开发利用，药材安全有效，质量可控稳定。本研究可为迎春花的质量控制提供参考依据。

参考文献

[1]杨伟波，卢成瑛，陈功锡，等.迎春花研究进展[J]. 食品科学， 2008（4）：474-477.

[2]《贵州省植物志》编辑委员会.贵州植物志（第四卷）[M].贵阳：贵州人民出版社，1982：480.

[3]王佩珩，周宜君，张洪志，等.迎春花的有效化学成分及其生物学活性研究概况[J]. 黑龙江农业科学，2015（6）：152-155.

[4]卢成瑛，杨伟波，黄早成，等.迎春花叶抑菌活性物研究[J].食品科学，2007 （12）：43-46.

[5]任雪峰，吴冬青，王永生，等.超声波法提取迎春花总黄酮含量的[J]. 光谱实验室，2010（1）：250-253.

（收稿日期：2020-09-05 编辑：刘斌）

基金项目：贵州省中药材、民族药饮片质量标准提高项目（No.DBYC52268）。

作者简介：姜莲（1984-），女，汉族，本科，主管药师，研究方向为中药检验及质量控制。E-mail：149853532@qq.com

通信作者：王影超（1987-），女，汉族，本科，主管药师，研究方向为中药检验及质量控制。E-mail：447406621@qq.com