新生儿缺氧缺血性脑病血清HMGB1、脂蛋白a 水平变化及临床意义

姜淑萍 朱洪斌 刘 芳 才海燕 冯宁宁 闫爱霞

河北省秦皇岛市妇幼保健院新生儿科，河北秦皇岛 066000

缺氧缺血性脑病是指围生期新生儿窒息所引起的缺氧缺血性脑损伤，是新生儿神经系统异常和死亡的主要因素[1]。其在新生儿中的发病率为0.2%～0.4%，其预后较差，死亡率较高[2]。目前的临床诊断主要综合影像学诊断结果、新生儿的临床表现及病史进行判断，缺乏客观、准确且有效的缺氧缺血性脑病血清生化标志物[3]。高速泳动族蛋白B1（HMGB1）属于非组蛋白家族成员，主要分布于细胞核内，参与DNA 复制、转录及损伤修复过程。有报道显示，HMGB1 与心力衰竭、急性脑梗死等心脑血管系统疾病的发生密切相关[4-5]。脂蛋白a 主要由肝脏合成，能够抑制血栓溶解，在脑卒中和冠心病等心脑血管疾病患者中表达上调，与脑卒中和冠心病的发生发展密切相关[6-8]。目前新生儿缺氧缺血性脑病的血清诊断标志物仍然十分缺乏，本研究通过检测缺氧缺血性脑病新生儿血清HMGB1、脂蛋白a 水平，分析这两个指标与新生儿神经行为测评（NBNA）评分的关系及其对诊断价值。现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018 年1 月—2020 年3 月河北省秦皇岛市妇幼保健院（以下简称“我院”）诊治的105 例缺氧缺血性脑病新生儿作为观察组。纳入标准：①出生后24 h 内发生缺氧缺血性脑病；②符合中华医学会儿科学分会制订的《新生儿缺氧缺血性脑病诊断标准》[9]；③脑部CT 结果显示有低密度灶改变。排除标准：①存在遗传代谢性疾病；②心肺功能异常；③合并其他类型脑部疾病；④治疗期间转院；⑤治疗期间死亡及治疗结束出院后失访；⑥有贫血和呼吸道阻塞性疾病。观察组中男60 例，女45 例；首胎91 例，非首胎14例；孕龄37～43 周，平均（39.88±2.61）周；出生体重2190～4310 g，平均（3033.79±996.37）g。参考新生儿缺氧缺血性脑病分度标准[10]将其进一步分为轻度组57 例，中度组33 例和重度组15 例。选择同期在我院妇产科出生的53 名健康新生儿作为对照组，其中男31 名，女22 名；首胎43 名，非首胎10 名；孕龄37～42 周，平均（39.15±2.73）周；出生体重2235～4408 g，平均（3089.46±1000.83）g。观察组和对照组性别比例、首胎比例和孕龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），具有可比性。新生儿家属均签署知情同意书，本研究经过我院医学伦理委员会审核。

1.2 观察指标及检测方法

①两组于出生后立即采集3 mL 静脉血，室温静置30 min，以转速5000 r/min 离心30 min，离心半径为12 cm，吸取上清液至另一洁净离心管中，-80℃冻存。采用酶联免疫吸附法检测血清HMGB1、脂蛋白a水平，试剂盒购自美国Abcam 科技有限公司（批号：ab18256、ab212165）。②于哺乳后1 h 测定观察组的NBNA 评分[11]，主要包括行为能力评估（6 项）、原始反射评估（3 项）、主动肌张力评估（4 项）和被动肌张力评估（4 项），总分＜35 分为脑损伤，35～36 分为可疑脑损伤，＞36 分为正常。③比较各组血清HMGB1、脂蛋白a 水平及NBNA 评分，分析血清HMGB1、脂蛋白a水平与NBNA 评分的相关性及其对新生儿缺氧缺血性脑病的诊断价值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0 对所得数据进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（）表示，组间比较采用t检验，多组计量资料比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q 检验。计数资料采用例数百分率表示，组间比较采用χ2检验。采用Pearson 相关系数分析血清HMGB1、脂蛋白a 水平与NBNA 评分的相关性，采用受试者工作特征（ROC）曲线评估血清HMGB1、脂蛋白a 水平对新生儿缺氧缺血性脑病的诊断价值。以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组和观察组血清HMGB1、脂蛋白a 水平比较

观察组血清HMGB1 和脂蛋白a 水平均显著高于对照组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）。见表1。

表1 对照组和观察组血清HMGB1、脂蛋白a 水平比较（ng/mL，）

表1 对照组和观察组血清HMGB1、脂蛋白a 水平比较（ng/mL，）

注：HMGB1：高速泳动族蛋白B1

2.2 不同分度缺氧缺血性脑病新生儿血清HMGB1、脂蛋白a 水平及NBNA 评分比较

三组血清HMGB1、脂蛋白a 水平及NBNA 评分比较，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）。重度组血清HMGB1、脂蛋白a 水平高于中度组和轻度组，NBNA评分低于中度组和轻度组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）。中度组血清HMGB1、脂蛋白a 水平高于轻度组，NBNA 评分低于轻度组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）。见表2。

表2 不同分度缺氧缺血性脑病新生儿血清HMGB1、脂蛋白a 水平及NBNA 评分比较（）

表2 不同分度缺氧缺血性脑病新生儿血清HMGB1、脂蛋白a 水平及NBNA 评分比较（）

注：与轻度组比较，aP ＜0.05；与中度组比较，bP ＜0.05。HMB1：高速泳动族蛋白B1；NBNA：新生儿神经行为测评

2.3 缺氧缺血性脑病新生儿血清HMGB1、脂蛋白a 水平与NBNA 评分的相关性

血清HMGB1 水平（r=-0.9123，P ＜0.05）、脂蛋白a 水平（r=-0.9045，P ＜0.05）均与NBNA 评分呈负相关。见图1。

2.4 血清HMGB1、脂蛋白a 水平对新生儿缺氧缺血性脑病的诊断价值

血清HMGB1、脂蛋白a 联合检测的ROC 曲线下面积（AUC）、灵敏度和特异度均高于各项单独检测，见表3、图2。

3 讨论

缺氧缺血性脑病主要由脑部缺氧缺血所致，目前普遍认为细胞代谢紊乱、免疫功能失调、炎症反应、氧化应激反应和围生期缺血再灌注等是缺氧缺血性脑病的主要发病机制[12-14]。缺氧缺血性脑病的发病过程较为复杂，病死率高且后遗症多[15]。因此寻找与缺氧缺血性脑病发病密切相关的血清标志物，并将其应用于新生儿缺氧缺血性脑病的诊断和治疗中具有重要的临床意义。

图1 血清HMGB1、脂蛋白a 水平与NBNA 评分的相关性

表3 血清HMGB1、脂蛋白a 水平对新生儿缺氧缺血性脑病的诊断价值

图2 血清HMGB1、脂蛋白a 对新生儿缺氧缺血性脑病的受试者工作特征曲线

在缺氧缺血性脑病发病过程中存在严重的氧化应激反应，而HMGB1 在氧化应激过程中起到一定促进作用[16]。本研究提示在缺氧缺血性脑病新生儿血清HMGB1 水平显著高于对照组，且与其病情严重程度密切相关，显示HMGB1 水平升高与缺氧缺血性脑病的发生及病情严重程度密切相关。Yin 等[17]的研究发现HMGB1 能够促进氧化应激的产生。氧化应激产生的过氧化物和超氧化物等氧自由基具有较强的氧化性，对细胞膜上的受体蛋白造成氧化损伤，从而抑制神经元细胞的增殖和损伤修复等过程，导致神经元细胞大量死亡而引起新生儿出现神经功能损伤[18]。同时，Wang 等[19]的研究显示HMGB1 能够激活核因子κB 炎症信号通路并促进巨噬细胞的趋化和变形运动。由于核因子κB 炎症信号通路下游靶基因为白介素和肿瘤生长因子等炎症因子，因此在新生儿缺氧缺血性脑病中血清HMGB1 水平升高，活化核因子κB 炎症信号通路，进而促进炎症反应的发生。白介素和肿瘤生长因子等炎症因子作用于组织细胞并引起组织细胞损伤，导致局部组织坏死。随血清HMGB1 水平升高，心脑血管组织坏死程度也随之增加，新生儿病情逐渐加剧[20-21]。

脂蛋白a 能够抑制组织细胞代谢，在缺氧缺血性脑病发病过程中，脑组织存在严重的代谢紊乱[22]。本研究显示脂蛋白a 在缺氧缺血性脑病新生儿中表达升高且与其病情严重程度密切相关。Ma 等[23]研究发现脂蛋白a 水平异常升高会抑制胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的活化，由于ERK 信号通路在细胞糖代谢和增殖中起到促进作用，因此缺氧缺血性脑病新生儿血清脂蛋白a 水平升高会抑制新生儿神经元细胞中ERK 信号通路的活化，使其神经元细胞糖代谢异常，进而导致神经元细胞损伤和凋亡，加剧病情[24]。同时，McCormick 等[25]研究发现神经元细胞上存在脂蛋白a 的受体，脂蛋白a 与受体结合后能够抑制G 蛋白偶联受体信号通路的活化。由于G 蛋白偶联受体信号通路在神经元细胞的增殖、凋亡和损伤修复等过程均起到一定调节作用。因此缺氧缺血性脑病新生儿血清脂蛋白a 水平异常升高会引起G 蛋白偶联受体信号通路异常，在抑制神经元细胞增殖和损伤修复功能的同时促进细胞凋亡，最终导致新生儿的神经功能损伤[26-27]。

本研究结果还显示，血清HMGB1、脂蛋白a 联合诊断新生儿缺氧缺血性脑病的价值较高，优于HMGB1、脂蛋白a 单独检测的价值，提示检测新生儿血清HMGB1、脂蛋白a 水平可作为诊断缺氧缺血性脑病的重要生化标志物。

综上所述，新生儿缺氧缺血性脑病血清HMGB1、脂蛋白a 水平异常升高，且与病情严重程度相关，可作为诊断缺氧缺血性脑病的生化标志物。