精油中CBD 含量的HPLC 分析方法研究
2021-04-24贺凯华薇李东
贺 凯 华 薇 李 东
(淮阴工学院化工学院,江苏 淮安223001)
1 概述
大麻二酚(CBD)是一种主要的植物大麻素,主要来源于大麻,占大麻提取物的40%,是大麻主要的非精神活性成分,可与体内内源性大麻素系统的多种生理靶点结合,具有抗惊厥、镇静、催眠、抗焦虑、抗精神病、抗炎和神经保护的性能[1]。CBD 在治疗癫痫、多种癌症、多发性动脉硬化与帕金森病、预防心肌梗死、抑制神 经胶质瘤细胞转移和抑制性激素分泌等具有一定疗效。研究表明,CBD 能阻碍四氢大麻酚对人体神经系统的作用,由于这一特性CBD 已被FDA 批准用于治疗难治性癫痫[2]。
2 实验部分
准确称取CBD 对照品10mg,乙腈溶解并定容至10 mL,得1 mg/mL CBD 标准溶液,再准确移取1 mL 至10 mL 容量瓶中,乙腈定容,得100 μg/mL 的CBD 标准溶液,并逐级以乙腈稀释,得到浓度为1、5、10、20、50 μg/mL 系列标准溶液。
称取一定质量的化妆品精油于10 mL 容量瓶中,加入四氢呋喃溶解并定容至10 mL,经0.22μm 滤膜过滤后,进行HPLC 分析。
仪器为Waters 2695 高液相色谱仪(2996 PDA 检测器),SHIMADZU WondaCract ODS-2 色谱柱(250×4.6 mm,5μm),流动相乙腈:水=70:30(V/V)流速1 mL/min,柱温30℃,进样量20 μL。
3 结果与讨论
3.1 CBD 紫外吸收曲线
对照品溶液进行HPLC 分析,结果见图1、图2。
图1 CBD 标准品的HPLC 色谱图
图2 CBD 紫外吸收曲线
分析结果显示CBD 在240 nm 以下紫外吸收强度很弱,为了提高检测的灵敏度,选择220 nm 作为检测波长。
3.2 线性实验
对1~100 μg/mL 的标准工作溶液进行HPLC 分析,以峰面积对浓度作图,结果见图3。结果显示在1~100μg/mL 范围内工作曲线线性良好,R>0.9999。
表1 不同浓度范围标准溶液峰面积
图3 CBD 标准工作曲线
3.3 精密度实验
配置6 个平行样品来准确考量方法的精密度,结果见表2。
表2 精密度实验结果
结果表明分析的相对标准差(RSD)小于0.5%,说明方法的稳定性高,重复性好。
图4 样品的HPLC 色谱图
3.4 回收率实验
移取一定量的样品溶液(本底值为24.61μg/mL),分别加入一定体积的CBD 标准品溶液,混匀后进行HPLC 分析,计算CBD 的回收率,结果见表3。结果显示方法的回收率为99.3%~101.4%,说明本方法的回收率较好。
表3 回收率实验结果
4 结论
本实验建立了针对化妆品精油中大麻二酚的HPLC 分析方法。结果表明在1~100 μg/mL 范围内具有良好的线性,R>0.9999,加标回收率在99.3~101.4%,相对偏差(RSD)小于0.5%,本方法可满足对含CBD 成分的化妆品精油中大麻二酚含量的准确测定。