Xpert MTB/RIF 检测技术用于肺结核病诊断的价值研究

高 波

（景泰县人民医院，甘肃 景泰 730400）

肺结核为传染性疾病，患病群体数量日渐增多，危害性严重，而有效的抗结核治疗依赖于诊断结果[1]。目前国内结核病实验室诊断方法较多，包括涂片镜检法、固体培养法、比例法药敏试验等，以上方法在肺结核病诊断方面因敏感度低、耗时较长等限制，漏诊、误诊情况频频发生[2]。分子生物学诊断技术不断进步，逐渐发展出Xpert MTB/RIF 检测技术，其在结核病、利福平耐药检测方面应用较广，具有快速检测、灵敏度高、特异度高等多重优势[3]。因此，本研究将Xpert MTB/RIF 检测技术用于肺结核病诊断过程，诊断结果报告如下。

1 临床资料与方法

1.1 临床资料

选择2019 年1 月～2020 年2 月期间于景泰县人民医院就诊的疑似肺结核病患者178 例作为本次研究对象，男130 例，女48 例，年龄20～69 岁，平均年龄（51.38±8.96）岁。

1.2 方法

标本采集：收集178 例患者痰标本（清晨痰），及时送检，标本采集时178 例患者均未开始抗结核治疗。

涂片镜检法：参照《痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》实施检测。

固体培养法：参照《分枝杆菌分离培养标准化操作程序及质量保证手册》实施检测。

比例法药敏试验：参照《结核分枝杆菌药物敏感性试验标准化操作程序及质量保证手册》实施检测。

Xpert MTB/RIF 检测技术：主要借助全自动Gene Xpert 仪器与配套试剂盒检测。

以上检测结果提示“无效”“错误”“无结果”等情况下，需再次留取标本实施检测。

1.3 观察指标

（1）不同检测方法阳性检出情况比较。统计涂片镜检法、固体培养法、Xpert MTB/RIF 检测技术对痰标本的阳性检出情况。

（2）不同检测方法检测结核分枝杆菌结果（以固体培养结果为金标准）。

（3）Xpert MTB/RIF 检测技术检测利福平耐药性情况（以比例法药敏试验结果为金标准）。

1.4 统计学处理

数据分析使用SPSS23.0，计数资料用n（%）表示，组间比较行χ2检验。检验水准α=0.05，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同检测方法阳性检出情况比较

178 份痰标本均采用不同检测方法实施检测，涂片镜检法：阳性痰标本共48 份，阳性率26.97%；固体培养法：阳性痰标本共72 份，阳性率40.45%；Xpert MTB/RIF 检测技术：阳性痰标本共98 份，阳性率55.06%。固体培养法痰标本阳性检出率高于涂片镜检法（χ2=7.241，P=0.007）；Xpert MTB/RIF 检测技术痰标本阳性检出率高于涂片镜检法（χ2=29.028，P=0.000）；Xpert MTB/RIF 检测技术痰标本阳性检出率高于固体培养法（χ2=7.611，P=0.006）。

2.2 不同检测方法检测结核分枝杆菌结果（以固体培养结果为金标准）

以固体培养结果为金标准，Xpert MTB/RIF 检测技术检测的灵敏度94.44%（68/72）明显高于涂片镜检55.56%（40/72），比较差异有统计学意义（χ2=29.037，P=0.000）；Xpert MTB/RIF 检测技术与固体培养结果的一致性显著高于涂片镜检法（Kappa=0.625vs 0.507，P＜0.05）。见表1。

表1 不同检测方法检测结核分枝杆菌结果（以固体培养结果为金标准）

2.3 Xpert MTB/RIF 检测技术检测利福平耐药性情况（以比例法药敏试验结果为金标准）

固体培养结果显示阳性菌株共72 份，行菌种初步鉴定，鉴定结果提示非结核分枝杆菌共4 份，结核分枝杆菌共68 份。采用Xpert MTB/RIF 检测技术与比例法药敏试验对以上68 份进行利福平耐药性检测，结果提示，Xpert MTB/RIF 检测技术检测利福平耐药率20.59%（14/68）与比例法药敏试验耐药率22.06%（15/68）比较，差异无统计学意义（χ2=29.037，P=0.000）；Xpert MTB/RIF 检测技术与比例法药敏试验符合率98.53%（67/68）。见表2。

表2 Xpert MTB/RIF 检测技术检测利福平耐药性情况（以比例法药敏试验结果为金标准）

3 讨论

Xpert MTB/RIF 检测技术是半巢式实时荧光定量PCR 技术优化所得，靶基因为rpoB 基因，能依赖于自动化系统完成脱氧核糖核酸提取、rpoB 基因扩增、目标序列（位于rpoB 基因上的192bp 片段）检测。另外，根据分子信标、探针等，同样能辅助肺结核病诊断、利福平耐药情况等[4]。研究表明，利福平耐药情况与rpoB 基因存在关联，若存在利福平耐药情况，则rpoB 基因会发生相应突变[5-6]。

本研究结果显示：①178 份痰标本均采用不同检测方法实施检测，涂片镜检法：阳性痰标本共48份，阳性率26.97%；固体培养法：阳性痰标本共72份，阳性率40.45%；Xpert MTB/RIF 检测技术：阳性痰标本共98 份，阳性率55.06%。固体培养法痰标本阳性检出率高于涂片镜检法；Xpert MTB/RIF 检测技术痰标本阳性检出率高于涂片镜检法；Xpert MTB/RIF 检测技术痰标本阳性检出率高于固体培养法。可见，Xpert MTB/RIF 检测技术在提高痰标本阳性检出率方面优势突出，其应用价值明显优于涂片镜检法、固体培养法。原因可能是，Xpert MTB/RIF检测技术其是半巢式实时荧光定量PCR 技术优化所得，集脱氧核糖核酸提取、PCR 扩增、目标序列检测等多个步骤于一体，具有检测快、污染几率低、灵敏度高等多重优势。②以固体培养结果为金标准，Xpert MTB/RIF 检测技术检测的灵敏度94.44%（68/72）明显高于涂片镜检55.56%（40/72），比较差异有统计学意义；Xpert MTB/RIF 检测技术检测的Kappa 值明显优于涂片镜检。提示，与涂片镜检法相较，XpertMTB/RIF 检测技术在肺结核病原学诊断方面能提供更有力的证据。③XpertMTB/RIF 检测技术检测利福平耐药率20.59%（14/68）与比例法药敏试验耐药率22.06%（15/68）比较，差异无统计学意义（χ2=29.037，P=0.000）；Xpert MTB/RIF 检测技术与比例法药敏试验符合率98.53%（67/68），此结果进一步证实了Xpert MTB/RIF 检测技术对利福平耐药性情况的高诊断价值，其与金标准符合率较高。与刘扬等[7]研究结果相似。

综上所述，Xpert MTB/RIF 检测技术在肺结核病诊断、利福平耐药性情况等方面均有着较高的可行性、可靠性。