第二代杂交捕获法检测人乳头瘤病毒DNA在宫颈上皮内瘤变诊断中的应用价值

任玲

天津市泰达医院 (天津 300457)

流行病学调查结果显示，宫颈癌是目前威胁女性健康的第二大恶性肿瘤，且发病率呈逐年升高的趋势[1]。现代医学研究表明，宫颈癌的发生和发展有一个渐进的演变过程，若在病情可逆转的癌前病变期开展及时有效的治疗，则对防止患者病情恶化、改善治疗效果具有重要的意义[2]，因此，宫颈癌前病变筛查工作尤为重要。宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)属于宫颈癌前病变的范畴，镜下特点为宫颈上皮细胞形态大小不均匀，细胞核增大浓染，核分裂象增多，病变开始由基层向表层发展[3]；其基于严重程度可以划分为不同的等级，早期诊断有助于对患者采取及时有效的治疗措施[4]。有研究表明，阴道镜下宫颈活检诊断CIN的准确度非常高，通常将其作为诊断金标准，但该方法会对患者造成一定的伤害，且诊断较为复杂[5]。第二代杂交捕获法检测人乳头瘤病毒DNA(hybrid capture 2 human papilloma virus DNA，HC2-HPV-DNA)是近些年发展起来的一种诊断方法，已被广泛用于宫颈癌前病变筛查中[6]。本研究选取我院收治的350例CIN可疑患者为研究对象，对HC2-HPV-DNA检测的临床价值进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2017年5月至2018年9月接收的350例CIN可疑患者为研究对象，年龄20～55岁，平均(37.26±4.35)岁；孕次1～5次，平均(2.63±0.87)次；产次1～3次，平均(1.72±0.64)次。本研究已获得医院医学伦理委员会的审核批准。纳入标准：患者均存在不同程度的阴道瘙痒、白带异常及阴道不规则出血或接触性出血等症状；已签署研究知情同意书。排除标准：合并子宫内膜癌及卵巢癌等其他肿瘤；合并感染性疾病；有宫颈手术史。

1.2 方法

所有患者均行HC2-HPV-DNA检测和阴道镜下宫颈活检。(1)HC2-HPV-DNA检测：在患者非经期对其进行取样(注意取样前3 d不可对阴道进行冲洗或用药)，采用专门用于获取宫颈脱落细胞的刷子，将其置于宫颈口1.0～1.5 cm处，逆时针方向旋转5圈，停留10 s后取出，将刷子置于缓冲液中保存，在4 ℃环境下通过聚合酶链反应进行扩增处理，然后应用杂交技术开展HPV-DNA检测工作，以相对光单位(relative light unit，RLU)与阈值平均值的比值作为诊断标准，比值>1为阳性，比值≤1为阴性。(2)阴道镜下宫颈活检：于检查前明确所有患者均无阴道镜检查禁忌证，首先让患者排空膀胱，取膀胱截石位，充分暴露宫颈，采用3%醋酸溶液对宫颈部位均匀涂抹约40 s后置入阴道镜，观察血管的形态，并应用绿色滤光镜片对血管形态的变化进行观察，应用碘试剂对病变部位进行观察，记录病变的大小及形态等特征，且取病变组织，将标本送病理科进行检查，基于2003年世界卫生组织关于宫颈肿瘤组织学分类标准对患者进行诊断，包括慢性炎症、CINⅠ级、CINⅡ级和CINⅢ级等类型。

1.3 临床评价

将阴道镜下宫颈活检结果作为诊断金标准，分析HC2-HPV-DNA检测的诊断灵敏度、特异度、漏诊率和误诊率。

2 结果

2.1 两种方法的结果比较

阴道镜下宫颈活检结果显示，350例CIN可疑患者中慢性炎症138例，CINⅠ级132例，CINⅡ级45例，CINⅢ级35例；HC2-HPV-DNA检测结果显示，阳性154例，阴性196例，且随着疾病严重程度的增加，诊断阳性率呈现升高的趋势，见表1。

表1 两种方法的结果比较[例(%)]

2.2 HC2-HPV-DNA检测的临床价值

HC2-HPV-DNA检测诊断CIN的灵敏度为56.60%(120/212)，特异度为75.36%(104/138)，漏诊率为43.40%(92/212)，误诊率为24.64%(34/138)，见表2。

表2 HC2-HPV-DNA检测的临床价值(例)

3 讨论

宫颈癌是女性较为常见的恶性肿瘤，其发病是一个长期持续的过程，经历宫颈上皮轻度不典型增生、中度不典型增生、重度不典型增生，直至宫颈癌，一旦患病，将严重影响患者的身体健康和生命安全。临床实践表明，在癌前病变期及宫颈癌早期对患者进行治疗具有较好的效果，这就需要进行及时有效的诊断[7]。现代医学研究表明，HPV感染是导致宫颈癌的主要病因，99%以上的宫颈癌与HPV感染有关，其中高危型HPV持续感染是导致宫颈癌变的必要条件，但并非HPV感染后的患者一定会发生宫颈癌，多数患者在HPV感染后会基于自身的免疫能力对病毒进行清除，只有不到10%的患者会持续感染[8]。CIN是宫颈癌变前的一种异变，基于细胞异型程度可以分为3种类型，不同类型的CIN均有恶化的可能，且具有直接转化为浸润癌的风险。目前，临床难以对所有类型的CIN进行有效预测，特别是在面对CINⅠ级时预测效果往往不理想[9]。

阴道镜下宫颈活检对CIN具有非常高的诊断准确度，但其会对患者造成一定的创伤，不能过度使用，且难以被广泛用于宫颈癌筛查阶段。HC2-HPV-DNA检测是近年来发展起来的一种CIN检测方法，具有操作简单方便等特点，其诊断阳性率会随着患者病情严重程度的增加而升高。本研究结果显示，在HC2-HPV-DNA检测的诊断阳性率方面，CINⅢ级高于CINⅡ级，CINⅡ级高于CINⅠ级，CINⅠ级高于慢性炎症，与理论分析结果一致[10]。本研究结果显示，HC2-HPV-DNA检测诊断CIN的灵敏度和特异度偏低，漏诊率和误诊率偏高，诊断效果不是特别理想，分析原因为，研究对象中慢性炎症和CINⅠ级患者数量较多，而相对来讲，HC2-HPV-DNA检测对慢性炎症和CINⅠ级的诊断准确度低于CINⅡ级与CINⅢ级，因此得出以上结果。

综上所述，在临床实践中，将HC2-HPV-DNA检测CIN用于疾病筛查中可有效减少阴道镜下宫颈活检的过度使用。