脑心清片化学成分、药理作用与临床应用研究进展

郭海彪，林娟，刘旻，王德勤，李楚源*（.广州白云山和记黄埔中药有限公司现代中药研究院，广州 5055；2.中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所，北京 0093）

柿叶为柿树科柿树属植物柿（Diospyros kakiL.f.）的新鲜或干燥叶，作为药用已有近600年，最早记载于明代《滇南本草》。后《本草再新》记载“柿叶味苦，性寒，无毒，入肺经，治咳嗽吐血，止渴生津”，主要用于止血、降压及治疗冠心病、心绞痛、胃溃疡出血、肺结核出血等[1]。近年来，随着现代提取分离技术和现代药理学方法的快速发展，对柿叶的化学成分和药理活性的研究也不断深入。柿叶含有黄酮、有机酸、三萜、多酚、多糖、脂肪酸、香豆酸等化学成分，具有降血糖、抗氧化、抗菌、抗肿瘤及保护心脑血管等作用[2]。脑心清片是在现代医药理论指导下，以柿叶作为原料经水提、醇沉、乙酸乙酯萃取而成的柿叶提取物，再加以药用辅料制备而成的纯中药制剂。主要用于脉络瘀阻、眩晕头痛、肢体麻木、胸痹心痛、胸中憋闷、心悸气短，具有活血化瘀、通络的功效，主治冠心病、脑动脉硬化症等心脑血管疾病[3]。本文对柿叶提取物及其制剂脑心清片的化学成分、药理作用及临床应用三个方面的研究进展进行综述。

1 脑心清片化学成分研究

脑心清片的化学成分组成相对明确，主要含有黄酮、有机酸和三萜类成分。大量研究表明，黄酮类成分是脑心清片治疗心脑血管疾病的主要活性物质，具有改善心肌功能、保护神经、抗动脉粥样硬化、抑制血小板等药理作用[4]。黄酮类成分占柿叶提取物总含量的25.7%[5-7]，主要包含槲皮素、山柰酚及两者的氧糖苷类成分（如金丝桃苷、黄芪苷、异槲皮素、杨梅素、柚皮素、山柰酚3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山柰酚3-O-β-D-吡喃半乳糖苷等）。有机酸类成分具有抗氧化、抗炎、抑制血小板和抗血栓等作用[8]，主要含有原儿茶酸（3，4-二羟基苯甲酸）、糠酸（2-呋喃甲酸）、琥珀酸、苹果酸等，其中原儿茶酸占柿叶提取物含量的4.5%～6.6%，糠酸占柿叶提取物含量的1.6%～2.4%[9-10]。三萜类成分具有明显的血管修复、抗衰老、抗神经损伤作用，主要含有齐墩果酸、熊果酸等[11-12]。由于柿叶提取物是柿叶经提取分离、纯化制备而成的柿叶乙酸乙酯浸出物，相较于柿叶，其化学成分组成已发生了很大的变化。因此，关于脑心清片的全化学成分分析有待进一步研究。

2 脑心清片药理作用研究

现代药理学研究表明，脑心清片具有抗氧化、抗炎、抗凋亡、改善血液流变学和血流动力学、抑制血小板聚集和血栓形成、降血压等药理作用，对心肌缺血和脑缺血引起的心脑血管疾病有明显的药效。

2.1 抗氧化作用

当机体处于应激状态时，体内存在的内源性抗氧化酶系统可加速自由基转化和失活，但过多的自由基产生会引起氧化物和抗氧化物平衡失调，诱发细胞和组织的氧化损伤[13]。已有研究表明，脑心清片可能通过清除体内多余的自由基，增加抗氧化酶体系发挥抗氧化作用。Bei 等[14]研究表明，脑心清片可抑制H2O2损伤NG108-15 细胞引起的过氧化氢酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、谷胱甘肽（GSH）含量降低和丙二醛（MDA）含量增高，对氧化应激所致的相关氧化因子有明显抑制作用。Kazzem 等[15]研究显示，脑心清片明显抑制H2O2诱导的人血管内皮细胞EA.hy926 损伤和细胞内活性氧（ROS）的生成。覃仁安等[16]研究显示，脑心清片抑制脑缺血大鼠脑脂质过氧化，降低脑组织MDA 含量，增加超氧化物歧化酶（SOD）活性。

2.2 抗炎作用

炎症是机体受到应激损伤后释放大量致炎因子所致的病理现象，是多种慢性疾病包括心脑血管疾病、高血压、肿瘤、关节炎等的主要病理生理基础。李颖等[17]研究发现，脑心清片对同型半胱氨酸诱导的小胶质细胞炎症因子[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）]的mRNA 和蛋白水平具有明显的抑制作用，其作用与银杏叶提取物EGb761 相当。林娟等[18]进一步采用脂多糖诱导BV-2 细胞损伤的经典炎症模型证明脑心清片可能是通过激活Akt/ERK1/2 信号通路介导抗炎作用。

2.3 抗凋亡作用

细胞凋亡又称程序性死亡，是机体内外因素触发细胞内预存的死亡程序而导致细胞死亡的过程。细胞凋亡往往伴随着一系列变化，外在变化主要表现为细胞形态上的变化，而内在变化则涉及到多种基因蛋白的变化[19]。Bei 等[14]研究显示，脑心清片可减少H2O2损伤NG108-15 细胞凋亡数量，增加细胞内抗凋亡因子Bcl-2 的基因表达。林娟等[18]进一步证明，脑心清片可增加Bcl-2 的蛋白表达，降低凋亡因子Bax 的蛋白表达，抑制小胶质细胞的凋亡。黄永洪等[20]证实，脑心清片能降低心肌梗死大鼠心肌组织Fas 和Caspase-3 蛋白表达，抑制心肌细胞凋亡。

2.4 改善血流动力学和血液流变学，抑制血小板和血栓形成

血流动力学和血液流变学是研究血液在血管系统中的流动力学、流动性和变形性的学科，两者与心脑血管疾病的形成、发展有着密切的联系[21-22]。臧忠良等[23]研究显示，脑心清片显著改善犬血流动力学，降低开胸麻醉犬的总外周阻力，对血压有一定的降低作用。覃仁安等[24]研究表明，脑心清片对多种诱导剂如磷酸腺苷（ADP）、花生四烯酸（AA）、胶原（CG）引起的血小板聚集有很好的抑制作用，可改善动物血液流变学，明显延长实验性动脉血栓形成时间，改善高黏滞血症大鼠的软脑膜微循环，对高黏滞血症大鼠的全血黏度、血浆黏度、血清黏度和血沉均有显著的降低作用。吴玉玲等[25]研究进一步发现，脑心清片能明显降低高血压大鼠血浆肾素活性（PRA）和血管紧张素Ⅱ的含量，延长凝血时间，降低血小板聚集率，有效改善动脉的血管重构。

2.5 抗心肌缺血作用

心肌缺血是冠心病心绞痛、心肌梗死、心律失常、心力衰竭等多种心血管病的病理特点[26]。覃仁安等[27]报道，脑心清片能改善犬急性心肌缺血，有效降低心外膜心电图ST 段的升高值，减轻心肌缺血程度，减小心肌梗死范围，降低心肌耗氧量。黄永洪等[20]研究进一步表明，脑心清片通过抑制心肌细胞凋亡和改善心室重塑，增强心肌梗死大鼠的心肌收缩和舒张功能，发挥抗心肌缺血作用。尽管已有研究表明脑心清片具有抗心肌缺血的作用，但关于其心肌缺血再灌注损伤、动脉粥样硬化的药理研究仍待佐证，对于其发挥抗心肌缺血的作用机制需要进一步阐明。

2.6 抗脑缺血作用

脑组织发生缺血缺氧后会出现一系列缺血级联反应，引起脑组织损伤，是脑卒中的主要诱发因素[28]。Bei 等[29]研究显示，脑心清片连续给药7 d（造模前3 d 及造模后4 d）对局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑梗死面积和神经功能有显著改善作用。覃仁安等[16]研究显示，脑心清片预防给药7 d（造模前）可改善FeCl3所致局灶性脑缺血模型大鼠和局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠受损的神经功能，有效缩小脑梗死范围和减轻脑水肿。闵冬雨等[30]研究表明，建立脑缺血再灌注损伤模型大鼠后连续给予脑心清片21 d 能明显改善大鼠海马神经元损伤和脑血管损伤。以上结果提示，脑心清片无论是预防给药还是治疗给药都具备改善脑缺血的药理作用，然而脑心清片临床应用主要集中于恢复期阶段或二级预防，对其在脑缺血恢复期阶段开展有针对性的药效与作用机制研究可为临床提供有价值的证据支持。

2.7 降压作用

中医药防治高血压具有整体调节、平稳降压的优势，可有效减少不良事件的发生。吴玉玲等[25]研究发现，与降血压西药相比，脑心清片连续用药3 个月不仅显著降低自发性高血压模型大鼠的血压水平，而且能改善颈总动脉重构，减轻高血压所致靶器官损伤的同时兼具抗血小板和抗凝作用。

3 临床应用

中医药理论研究认为，脑心清片具有活血化瘀、通络之功，可用于脉络瘀阻、眩晕头痛、肢体麻木、胸痹心痛、胸中憋闷、心悸气短等中医证候。现代临床医学研究表明，脑心清片适用于冠心病、脑动脉硬化症、缺血性脑血管病，对高血压、高脂血症及糖尿病等心脑血管病危险因素有综合调控作用。

3.1 冠心病心绞痛

大量临床观察发现，脑心清片可以明显减少冠心病患者心绞痛发作次数和持续时间，对胸闷、气短、心悸、乏力、头晕目眩等症状效果显著，能有效降低患者血脂、改善血液流变性、心电图和抑制血小板聚集，且临床安全性较好[31-36]。闫海慧等[37]研究发现，脑心清片可增加冠心病心绞痛患者血清脂联素（APN）、一氧化氮（NO）水平，降低血清TNF-α、超敏C 反应蛋白（hs-CRP）、内皮素（ET）、血栓素B2（TXB2）水平，改善冠心病心绞痛临床症状和血液流流变学指标。梁建光等[38]研究显示，脑心清片对冠心病心绞痛患者经皮冠状动脉介入治疗（PCI）有良好的临床效果，可有效降低患者血清血管内皮生长因子和hs-CRP 的水平，减少不良心血管事件的发生。脑心清片用于缺血性心脏病患者，可显著提高外周血内皮祖细胞数量，增强其黏附、迁移和体外血管生成能力[39]，提示脑心清片具有促进血管新生的作用。此外，也有研究表明，脑心清片用于变异型心绞痛患者的治疗可扩张冠状动脉，改善微循环，有效减轻疼痛症状[40]。从目前临床应用报道显示，脑心清片对冠心病心绞痛患者的临床症状、血液流变学、炎症等多项指标有明显改善作用，其作用机制可能与其改善心肌缺血和血管内皮功能有关。然而对于脑心清片在冠心病心绞痛的治疗优势还有待进一步研究确定。

3.2 脑动脉硬化症

脑动脉硬化症属于动脉粥样硬化范畴，自从脑血管病分类之后，已不再作为一个单独疾病定义[41]。尽管脑动脉硬化症已作为脑血管疾病的一种病理特征存在，但对其早发现早治疗将为防治缺血性脑血管疾病提供诊疗依据。蔡越冬等[42]早期临床评价发现，脑心清片治疗脑动脉硬化症有效率为83.33%，对其伴随的血压血脂的升高有明显的调控作用。叶创新等[43]采用脑心清片联合阿司匹林治疗脑动脉硬化患者12 周，结果脑心清片可有效降低患者总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇，提高高密度脂蛋白胆固醇，对脑动脉硬化症的总有效率为93.33%，因此，脑心清片治疗脑动脉硬化症的临床价值可为脑卒中一级预防提供参考。

3.3 缺血性脑血管病

缺血性脑血管病为临床常见的神经系统疾病，约占脑血管病的85%，包括短暂性脑缺血发作（TIA）、急性缺血性脑卒中、脑动脉盗血综合征（SSCA）和慢性脑缺血[44]。陈亦华等[45]临床研究显示，脑心清片能明显延长血浆凝血酶原时间和凝血活酶时间，对TIA 有明显的临床疗效。肖旭等[46]临床研究表明，脑心清片可扩张脑血管，降低血液高凝状态，改善脑血液循环，对椎-基底动脉供血不足患者的头晕、目眩症状作用明显。魏超等[47]研究显示，脑心清片能有效降低脑卒中患者的复发率，对缺血性脑血管疾病患者的二级预防具有重要的临床意义。王阿兰等[48]临床研究显示，脑心清片能明显改善脑卒中患者的心律失常、心肌酶及心功能异常等脑心综合征。此外，脑心清片对慢性脑供血不足的头晕、血管性头痛、老年性眩晕的临床疗效均得到相关临床证实[49-51]。以上临床观察证实脑心清片对不同类型的缺血性脑血管病具有治疗价值，尤其是对脑缺血引起的眩晕、头痛等症状作用显著，其作用机制可能与其抗凝、扩张脑血管等有关。

3.4 高血压

研究证实，高血压是心脑血管疾病的最主要危险因素，对其有效的防控可减少心脑血管事件的发生[52]。黄晓忠[53]临床观察发现，脑心清片联用缬沙坦可显著提升原发性高血压患者的降压效果，对头痛、头晕、耳鸣等症状优于单一使用缬沙坦，对高血压合并高脂血患者有显著的降脂作用。这可能与脑心清片具有扩张脑血管、改善脑部血液循环、调节脂质代谢的药理作用有关，与缬沙坦联用起到协同增效的作用。陈世伟等[54]临床研究发现，脑心清片明显增强非洛地平对高血压合并缺血性脑血管病患者的收缩压调控作用，减少脑血管事件的发生率。该结果提示脑心清片对伴有高血压的缺血性脑血管疾病具有很好的临床意义。临床上75%的中国高血压患者普遍存在高同型半胱氨酸现象，为了强调其危害性与普遍性，我国学者提出了“H 型高血压”概念[55]。魏超等[56]报道，脑心清片干预治疗能有效降低老年H 型高血压患者血清同型半胱氨酸水平。周静等[57-58]采用脑心清片治疗老年H 型高血压患者的研究显示，脑心清片不仅降压作用明显，而且在临床使用过程中安全性较好，对高血压伴随症状头晕、头痛、失眠效果也有所改善。

3.5 高脂血症

高脂血症是由于脂肪代谢或运转异常使血浆中一种或几种脂质高于正常的脂质代谢紊乱性疾病，是心脑血管的主要危险因素之一，可引起冠心病、心绞痛、中风、心肌梗死等多种疾病[59]。伍新林等[60]发现脑心清片能明显改善高脂血症患者血脂代谢，降低血液黏稠度，临床安全性好。魏超等[61]证实，脑心清片可降低老年原发性高脂血症患者的血脂异常，并且随着用药时间的推移，疗效更为显著。高脂血症对机体最直接的损害是加速全身动脉粥样硬化，脑心清片对血脂代谢的调节作用可减少脂质在血管内皮的沉着，进而减少心脑血管事件的发生。

3.6 糖尿病合并脑梗死

糖尿病是心脑血管疾病的独立危险因素。临床证据显示，严格的血糖控制在一定程度上可减少2 型糖尿病患者发生心脑血管疾病及其导致的死亡风险[62]。唐冰霜等[63]报道脑心清片可改善糖尿病脑梗死患者的血脂、hs-CRP 和血液流变学等指标，能有效地应用于糖尿病合并脑梗死的辅助治疗。目前，脑心清片对血糖的调节作用无相关报道，其是否能单独用于糖尿病的治疗还有待进一步临床观察。

4 展望

脑心清片主要由黄酮、有机酸、三萜等化学成分组成，是其发挥抗氧化、抗炎、抗凋亡、改善血流动力学和血液流变学、抑制血小板和血栓形成及抗心脑缺血药理作用的物质基础，临床上主要应用于防治冠心病、缺血性脑血管病及其相关危险因素高血压、高脂血症和糖尿病的综合防控。尽管目前已有研究对脑心清片的化学成分开展了一些研究，但随着现代药物分析设备与技术的提升，开展脑心清片的全化学成分分析，明确其化学成分群和成分含量构成比，对产品质量和临床价值的提升具有重要意义。此外，随着多组学技术和系统生物学理论的出现，进一步研究脑心清片的药效物质基础、入血成分及体内过程分析，揭示其药效的分子生物学机制，对其找准产品临床定位，发现新适应证具有重要的科学价值。