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枣中主要活性成分及其生物活性研究进展*

2021-04-16牛亚红赵智慧刘孟军王丽丽

中国果树 2021年8期
关键词:枣果半乳糖自由基

牛亚红,袁 野,刘 平,,赵智慧,刘孟军,,王丽丽

(1 河北农业大学园艺学院,保定071000)(2 河北农业大学中国枣研究中心)

枣(Ziziphus jujubaMill.)是鼠李科枣属植物,是我国独具特色且经济价值、药用价值极高的树种,它不仅栽培技术简单,易成活,具有很强的抗盐碱、抗旱、抗寒等抗性,而且口感独特、医药保健价值高,使其更受广大群众的喜爱。枣中含有多种活性成分,包括酚类、黄酮类、多糖、维生素C、五环三萜酸、皂苷类、月桂酸、单宁、核苷(如:环磷酸腺苷)和碱基、α-生育酚与β-胡萝卜素等,使其具有抗癌、抗氧化、抗炎、增强免疫力、护肝、降血糖等功效,其中维生素C、酚酸和黄酮类化合物是枣果中主要的抗氧化物质,三萜类化合物是枣果中主要的抗癌活性成分,多糖是枣果发挥护肝和免疫刺激作用的物质基础[1]。因此枣具有很高的研究价值,并日益受到广泛的研究关注。

1 枣中主要的活性成分

1.1 酚类

酚类物质是在正常生长条件下或者机体发生氧化应激反应时产生的次级代谢产物,由于其既能提供电子,又能提供氢,所以能够清除多种自由基,具有很高的抗氧化活性。据报道,枣中酚类物质有儿茶素、咖啡酸、香草酸、表儿茶素、芦丁、丁香酸、绿原酸、阿魏酸、对羟基苯甲酸等[2-3]。

杨梅[4]对乐陵‘金丝小枣’原汁进行研究,从中检测出5种酚酸,分别为原儿茶酸、儿茶酚、对羟基苯甲酸、香草酸和对香豆酸,并发现儿茶酚对DPPH 自由基的清除和对铁离子的还原能力最强,对香豆酸对ABTS 自由基的清除能力最强。刘杰超等[5]对6个枣品种的不同发育期果实中多酚类物质的含量、组成及抗氧化活性进行分析测定,发现芦丁、儿茶素、表儿茶素是供试各枣品种果实中最主要的酚类物质,且与供试枣果实抗氧化活性存在极显著相关关系,而没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸及肉桂酸等含量极少,表明芦丁、表儿茶素、儿茶素等多酚类物质是枣果中最主要的抗氧化活性成分,而且还发现幼果时期总酚含量最高,随着果实发育,总酚含量呈下降趋势。王蓉蓉等[2]对我国6种枣果中多酚物质等活性成分的含量进行测定,发现‘木枣’的总酚、单酚类物质(儿茶素、表儿茶素、芦丁、香草酸、咖啡酸和丁香酸)含量均最高,枣果的总酚与其FRAP 值及清除ABTS 能力显著相关,丁香酸含量与清除DPPH 能力显著相关,更加证明了酚类物质能够清除自由基,具有很强的抗氧化能力。

1.2 黄酮类

黄酮类物质具有抗氧化能力,这与酚羟基的取代位置和数目以及双键相关,其B 环上大多有2个酚羟基,保证了基本的抗氧化能力。近年来的研究发现,结构A环上的C-5、C-7 位羟基,以及A 环的邻二酚羟基均有利于黄酮类化合物的抗氧化活性。有研究从‘金昌枣’果实醇提物中发现3种黄酮类化合物,槲皮素-3-O-β-D-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷[6]。吴小燕[7]对7种不同枣果的黄酮含量进行测定,发现这7种枣果的黄酮平均含量为0.493 mg/g,‘小米枣’黄酮含量最高,达到0.606 mg/g,‘鸡蛋枣’含量最低,为0.344 mg/g;黄酮含量由高到低为:‘小米枣’>‘药枣’>‘梨枣’>子代‘糖枣’>母本‘糖枣’>‘酸枣’>‘鸡蛋枣’。另外,通过对‘金丝小枣’黄酮的研究发现,其活性会因贮藏温度而发生改变,比较适合低温5 ℃保存,高温会使其遭到破坏从而降低活性[8]。

1.3 多糖类

多糖又称多聚糖,是枣果中重要的活性物质。多糖由酸性多糖和中性多糖组成,酸性多糖是由阿拉伯糖基、半乳糖基、半乳糖醛酸基、木糖基、鼠李糖基组成,而中性多糖则是以阿拉伯糖基1,5-连接为主并具高度分支,且阿拉伯糖基和半乳糖基以30∶1 的比例组成[9]。

有研究从‘金丝小枣’中分离出1种水溶酸性多糖(ZSP3c),ZSP3c 由L-鼠李糖、D-阿拉伯糖和D-半乳糖组成,其摩尔比为1∶2∶8,并对ZSP3c 的结构特征进行了鉴定,结果表明,ZSP3c的主链为(1→4)-α-D-半乳糖醛糖基残基、(1→2)-α-L-鼠李糖基残基。鼠李糖基残基常位于O-4 位,以阿拉伯糖醛糖残基(α-L-Araf)和半乳糖基残基(β-D-Galp)为中性侧链附着在骨架上,作为支链[10]。还有研究从‘金昌枣’果实中提取、分离和纯化出2种酸性多糖JCS-1 和JCS-2,二者都不包含蛋白质,且JCS-1 比JCS-2 的糖醛酸含量高,JCS-1 以摩尔比为39.04∶1.26∶1.39的Gal A(半乳糖醛酸)、Gal(半乳糖)和Ara(阿拉伯糖)组成,JCS-2 由摩尔比为2.07∶1.77∶19.87∶1.16∶1.65 的Man(甘露糖)、Rha(鼠李糖)、Gal A(半乳糖醛酸)、Gal(半乳糖)和Ara(阿拉伯糖)组成,二者均具有很强的抗炎和提高免疫力的生物活性。有研究表明,补体能促进红细胞的溶血作用,但对这2种成分进行化学修饰后发现,一般容易在C-6 位置上取代发生硫酸酯化形成的硫酸酯化多糖,能够提高‘金昌枣’多糖的免疫活性,具有硫酸酯化前所没有的抗补体和抗凝血活性,这表明,化学修饰多糖对生物活性的发挥具有促进作用[11]。另外,以‘木枣’为研究对象,从中提取出2种酸性多糖HJP1 和HJP3,分析后发现,它们均由甘露糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖和阿拉伯糖组成,并且HJP1 和HJP3 对人肝癌细胞HepG2 的生长均有抑制作用,且HJP3 活性强于HJP1,表明多糖对肝癌有一定治疗功效[12]。这些研究均能证明,多糖是枣中重要的具有抗癌、抗氧化、提高免疫力、抗炎等生物活性的成分。

1.4 维生素C

维生素C 生物活性的主要形式是其还原形式(L-抗坏血酸),由于其易失电子且可以迅速转化成还原形式,所以具有高效抗氧化性[13]。它可以高效中和氮氧和活性氧自由基,也可以激发其他抗氧化物质至还原态,如黄酮。新鲜大枣中,维生素C 含量特别高,甚至可高达10 250 mg/kg。有研究人员对6个枣品种全红期维生素C 含量进行测定,发现‘鸡心枣’果实维生素C 含量最高,‘梨枣’维生素C 含量最低,含量由高到低顺序为‘鸡心枣’>‘磨盘枣’>‘葫芦枣’>‘灰枣’>‘赞皇枣’>‘梨枣’,且这6个枣品种维生素C 含量会随发育过程而降低,特别是白熟期前,除‘磨盘枣’外,其他枣品种在全红期和半红期维生素C 含量无显著变化[5]。

1.5 三萜酸

三萜类化合物分子量一般为400~600,有较高的脂溶性,在植物中可以与糖结合成苷和酯,或者以游离酸的形式存在[14-15]。Guo 等[16]测出枣中10种三萜酸,即美洲茶酸、麦珠子酸、马斯里酸、科罗索酸、桦木酸、齐墩果酸、熊果酸、白桦脂酮酸、齐墩果酮酸和乌苏酮酸,并发现在干燥过程中的前24 h,三萜酸的总含量会先上升,然后变化不明显。在此期间,其中属于齐墩果烷型的齐墩果酮酸、齐墩果酸和马斯里酸含量增加不太明显,羽扇豆烷型(麦珠子酸、桦木酸和白桦酯酮酸)和乌苏烷型化合物(科罗索酸和熊果酸)的含量显著增加,特别是科罗索酸和白桦酯酮酸的含量增加了2 倍多。此结果表明,经过干燥或蒸煮的枣中,三萜酸含量比新鲜大枣高,这可能是因为结合在一起的三萜酸经历了被酶分解的过程,随着干燥时间的延长,三萜酸的解离达到平衡,因而含量不再增加,因此若想得到更多三萜酸,可以选择利用干燥或蒸煮的枣果。研究证实,羽扇豆烧型三萜烯C-3 位置上的香豆酰酯对增强细胞毒性可能发挥着重要作用,对癌症有一定的预防和治疗作用。

1.6 核苷与碱基

Guo 等[17]对枣中9种核苷和碱基(胞苷、尿苷、鸟苷、cGMP、cAMP、尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟嘌呤、腺嘌呤)进行测定,发现9种成分含量随干燥时间延长而增加,当干燥时间达到120 h 时,干燥枣果中总含量(1 051.89 μg/g)是新鲜枣果(509.59 μg/g)的2 倍之多,且cAMP 和cGMP 等环核苷酸分别增加了3 倍和4 倍,增加的程度最深,而蒸熟枣果中,环核苷酸不稳定,cAMP 和cGMP 含量会下降20%~30%,该研究结果为消费者满足特定需求提供了参考。已知cAMP 是机体中发挥重要作用的第二信使,能作用于转录翻译水平,对糖代谢、脂代谢等都能进行调控,有研究从5种枣果中提取出活性成分(环磷酸腺苷)cAMP,含量由高到低为:‘灵武长枣’(335.7 μg/g)>‘中宁圆枣’(169.0 μg/g)>‘山东大枣’(168.2 μg/g)>‘陕北滩枣’(140.8 μg/g)>‘同心圆枣’(139.5 μg/g),‘灵武长枣’更具含量优势,为枣果的高效利用提供参考[18]。

1.7 α-生育酚与β-胡萝卜素

枣果中,功能性成分α-生育酚和β-胡萝卜素是关键的呈色物质,王蓉蓉等[2]测定了6种枣果中的多种活性成分,发现6种枣果中均含有这2种成分,且α-生育酚含量范围为1.17~8.43 mg/kg,含量由高到低为:‘哈密大枣’>‘梨枣’>‘相枣’>‘灰枣’>‘木枣’>‘金丝小枣’;β-胡萝卜素其含量范围为 1.64~6.07 mg/kg,含量由高到低为:‘哈密大枣’>‘木枣’>‘梨枣’>‘灰枣’>‘相枣’>‘金丝小枣’,‘哈密大枣’的α-生育酚与β-胡萝卜素含量均显著高于其他枣果。也有试验发现,冷冻干燥的枣果α-生育酚与β-胡萝卜素含量高于热风干燥和微波干燥,而日光晾晒可能会使这些成分丧失,因而检测不到这2种物质[19]。

2 枣的主要生物活性

2.1 抗氧化活性

自由基的产生和随后的氧化应激反应在肿瘤的发生、发展以及动物的衰老中起重要作用,抗氧化剂通过清除反应性自由基,从而降低自由基介导的DNA 损伤水平,进而预防癌症和衰老。酚类、黄酮类、维生素C、多糖都具有清除自由基的作用,是枣果实中主要的抗氧化活性物质。·OH是活性氧中一种活性最强的自由基,它可以与细胞中所有的有机化合物反应,破坏蛋白质、脂肪和核酸代谢,损伤细胞的结构和功能,导致机体发生病变。超氧阴离子具有一定的毒性,经反应可以生成其他氧自由基,引起机体损伤,产生疾病。超氧化物、一氧化氮和过氧亚硝酸盐等自由基均是氧化应激的主要来源,能够导致组织损伤和各种疾病。

Kumar 等[20]以冻干枣浆(ZJP)和枣浆水醇提物(ZJE)2种形式研究枣的抗氧化性,ZJE 在DPPH 自由基清除活性(1.0±0.07 mg/mL)、ABTS 自由基清除活性(0.8±0.01 mg/mL)和金属螯合活性(1.4±0.07 mg/mL)上具有很强的抗氧化作用,且ZJE 的抗氧化活性明显高于ZJP。另外,抗氧化酶SOD、GPX、GR 和CAT 可以防御抵抗运动中产生的自由基,此研究发现ZJP 和ZJE 的添加能显著控制肝脏和肌肉组织中乳酸的积累,上调抗氧化酶SOD、GPX 和CAT 水平,降低了因机体劳累而提高的肝脏和肌肉组织中的脂质过氧化水平。这些结果表明,枣果具有抗氧化活性,且因此使机体具备了抗疲劳的能力。

另外潘莹等[21]对‘冬枣’多糖进行分离纯化,得到由半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、葡萄糖组成的单糖组分DPA,以及由半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖组成的单糖组分DPB,二者均具有清除·OH 和DPPH 的抗氧化能力,且随多糖浓度升高,清除能力增加。这些结论均可证明枣果中的多糖具有抗氧化活性。

2.2 抗癌活性

癌症是多发性、种类繁多、难以治疗的世界性难题,因此对癌症的治疗研究刻不容缓。这就需要探明癌症发生的机制,进而有针对性地高效治疗。研究发现,细胞凋亡对细胞保持正常稳态和细胞癌变生长的调节起关键作用,与细胞间进行信息交流的信号分子的作用有很大关系,且细胞癌变后,内部的生化反应也会有相应改变。因此,对细胞内信号分子与生化指标进行研究,能够为细胞癌变的发生特征以及之后的治疗发挥重要作用。

Abedini 等[22]研究了枣水提物对MCF-7(乳腺癌细胞系)和OV2008(宫颈癌细胞系)细胞株的抗增殖作用,结果表明,枣果显著增加了兔抗人单克隆抗体(Bax)的表达,降低了癌细胞中B 淋巴细胞瘤-2 基因(Bcl-2)的表达,并显著增加bax/bcl-2 的mRNA 比率,比药草治疗癌细胞能力提高了6 倍,因此,枣果提取物可以通过改变凋亡调节基因来抑制癌细胞的增殖作用。另外,利用肺癌小鼠模型,以DDT、氯氰菊酯、联苯菊酯为促肺癌剂,通过抑制肺泡上皮原位的细胞间隙连接通讯GJIC,致使调控细胞增殖的信号小分子不能在细胞间流通,导致细胞增殖因失去调控而异常加快,而饮食大枣后,GJIC 的受阻减轻,从而对促癌剂致癌有明显对抗作用[23]。以上研究均证明了枣果具有抗癌生物活性。

枣中三萜酸类物质在预防和抵抗癌症方面具有至关重要的作用,有研究发现3-O-cis-p-香豆酰麦珠子酸、3-O-trans-p-香豆酰麦珠子酸、2-O-trans-p-香豆酰麦珠子酸、2-O-cis-p-香豆酰麦珠子酸 4种异构体可以使人类肺腺癌细胞系A549、人类乳腺癌细胞系MDA-MB-231、人类前列腺癌细胞系PC-3 细胞的膜连蛋白失活数量增加,且3-O-cis-p-香豆酰麦珠子酸和3-O-transp-香豆酰麦珠子酸的活性大于2-O-trans-p-香豆酰麦珠子酸和2-O-cis-p-香豆酰麦珠子酸,而3-O-trans-p-香豆酰麦珠子酸诱导凋亡的活性最强,它可以诱导人类前列腺癌细胞系PC-3 细胞线粒体产生活性氧(ROS),ROS 在诱导细胞凋亡和坏死中起着关键作用,通过线粒体ROS 依赖途径诱导激活p38-MAPK,使线粒体功能紊乱,进而诱导癌细胞凋亡,由此推断,另外3种物质也应该是通过这种方式诱导癌细胞死亡。另外,枣中三萜酸类物质可以影响GRP78/BIP 和CHOP 的表达水平,即内质网应激,也可能诱导PC-3 细胞凋亡,此试验发现,2-O-cis-p-香豆酰麦珠子酸可以上调GRP78/BIP 和CHOP 的表达,并下调Bcl-2 的表达,进而导致癌细胞发生凋亡[24]。另外细胞凋亡的另一个特征是激活半胱氨酸蛋白酶家族的酶,活化的caspase 可以切割细胞中许多重要的蛋白,破坏细胞骨架和核骨架,还能激活DNA 酶,使细胞核内的DNA 降解[25],而2-O-cis-p-香豆酰麦珠子酸可以触发 procaspase-3、procaspase-7、procaspase-8 的分裂,产生 caspase-3、caspase-7、caspase-8,通过半胱天冬酶途径诱导癌细胞凋亡[26]。另外也有研究证明,羽扇豆烷型化合物(3-O-CIS-P-香豆素酸、3-O-反式-P-香豆素酰丙酸、白桦酸、齐墩果酸)对白血病细胞株系K562、黑色素瘤细胞B16(F-10)、黑色素瘤细胞SK-MEL-2、前列腺癌细胞系PC-3、黑色素瘤细胞LOX-IMVI 以及肺癌细胞系A549 都有较强的毒性作用,且3-O-P-香豆素酸(3-O-CIS-P-香豆素酸、3-O-反式-P-香豆素酰丙酸)的细胞毒活性优于非香豆素三萜类化合物(白桦酸、齐墩果酸),羽扇豆烷型三萜烯C-3 位置上的香豆酰酯能够增强对癌细胞的毒性作用[27]。且有研究证明朦胧木酸-3-O-反式-对-香豆酰酯、朦胧木酸-3-O-顺式-对-香豆酰酯、山楂酸-3-O-顺式-对-香豆酰酯、白桦脂酸对乳腺癌细胞MCF-7、肺腺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2 以及结肠癌细胞HT-29 都表现出较强的抑制作用,因此这些证据证明了三萜酸具有很强的抗癌活性。

癌变后的细胞内生化指标会发生变化,血清ALP(碱性磷酸酶)和LDH(乳酸脱氢酶)会显著升高,而血清总蛋白和白蛋白水平降低,这些生化标记酶是肿瘤反应和肿瘤过程的指标,ALP在肿瘤早期诊断中被用作一般的肿瘤标志物,血清中白蛋白的低水平可增加自由基库,导致癌症发生。有研究通过大鼠乳腺癌实验发现,枣水提取物可以明显提高血清总蛋白、白蛋白和可溶性肝酶如AST(天冬氨酸氨基转移酶)、ALT(丙氨酸氨基转移酶)含量,降低血清APL 和LDH 的升高水平,提高抗氧化能力,降低乳腺癌细胞系的细胞活力,抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-468 的增殖,从而在一定程度上治疗癌症[27]。所以枣具有很好的防癌抗癌功效,拥有很高的药用价值。

2.3 抗炎活性

当机体受到损害时,机体为了自我保护,会诱发炎症,而其实质是机体与致炎因子进行抗争。在炎症反应发生时,巨噬细胞会产生TNFα,它是主要的促炎细胞因子,COX-2 是介导炎症反应的重要酶之一,当它过量时会加重炎症[28]。

展锐等[29]研究发现大枣多糖具有抗氧化和抗炎活性,其通过研究大枣多糖对LPS(脂多糖)诱导的巨噬细胞RAW264.7 的影响,发现当大枣多糖浓度为0~100 μg/mL 时,能够抑制炎症因子IL-6(白细胞介素-6)、IL-1β(白细胞介素-1β)和TNF-α(肿瘤坏死因子-α)的分泌,降低环氧合酶-2(COX-2)的活性;而当多糖浓度达到 50 μg/mL 和100 μg/mL 时,发挥的作用最显著,并发现多糖通过抑制RAW264.7 细胞中炎症因子COX-2 的活性,从而下调COX-2 依赖途径细胞信号通路,发挥抗炎作用,而且大枣多糖还对多种活性自由基[1,1-二苯基-2-苦基肼基(DPPH)自由基、2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)自由基、羟基自由基]有清除能力,从而阻断炎症反应中关键靶点,更进一步促进了其抗炎活性的发挥。另外,也有研究证明,枣水提取物对LPS 诱导的巨噬细胞IL-1β 和IL-6 细胞因子均有抑制作用,但对TNF-α 的表达却未表现出抑制作用。并且,提取物能抑制LPS 诱导的巨噬细胞核因子κB 的转录活性。这些结果表明,通过调节巨噬细胞中促炎细胞因子的表达,能够发挥枣的双向免疫调节作用[30]。

2.4 护肝

肝脏在人体中起着至关重要的解毒作用,肝损伤会引发多种肝病,正常状态下,在血液中肝细胞内酶血清转氨酶ALT 和AST 少量存在,肝细胞遭到破坏时,血清中AST、ALT 会升高,相关酶类会变得活跃,SOD(清除自由基的重要物质)、CAT(抗氧化酶)含量会减少,MDA(常用的膜脂过氧化指标)含量会增加。崔雪琴[31]从枣叶中提取出标准化乙醇-水提取物(ZJL-EWE),探究枣叶对由CCl4 诱发的急性肝损伤小鼠的保肝作用,发现ZJL-EWE 中富含黄酮类化合物,槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖基-(1→2)-α-L-鼠李糖含量最多,槲皮素-3-O-洋槐糖苷、芦丁、儿茶素次之。此研究发现,ZJL-EWE 能显著降低血清中ALT 和AST 的活性,对肝脏具有保护作用,并且能够降低肝脏组织的MDA 含量,提高SOD、GSH-Px(保护肝脏组织不受氧化物的损伤的一种过氧化物分解酶)的活性,因而能够抑制肝脏细胞因CCl4 引起的氧化能力的增强,进而保护肝脏。杨梅[4]通过小鼠实验,发现‘金丝小枣’原汁对因酒精造成的肝脏功能损伤,如肝脏脂肪含量的增加和肝细胞损伤坏死有一定预防治疗作用,可以明显改善脂肪紊乱现象,降低肝氧化损伤的程度,并可以提高肝脏中抗氧化酶SOD 和GSHPx 的水平,从而提高机体的抗氧化能力,保护肝脏。张惠芳等[32]通过小鼠急性CCl4 肝损伤实验,证明‘酸枣’多糖可以降低血清中ALT、AST 活性,提高肝组织匀浆中CAT、SOD 的活性,显著降低MDA 的含量,对小鼠急性CCl4 性肝损伤具有明显的治疗作用。还有研究从‘酸枣’中分离出一种酸性多糖PWJS,含有半乳糖(10.44%)、半乳糖醛酸(17.64%)、阿拉伯糖(23.16%)、葡萄糖(38.59%),发现这种提取物能够提高CCl4 中毒小鼠肝脏抗氧化酶(SOD、CAT)和谷胱甘肽(GSH)水平,降低MDA 含量及血清ALT 和AST 水平,并可以逆转,肝损伤小鼠HO-1、GSTα和NQO1 蛋白的表达得到增强,能通过增强肝组织Nrf2 途径及抗氧化作用减小肝毒性,保护肝脏[33]。有研究从‘金丝小枣’中提取出黄酮提取物(ZJF),以APAP 诱导的人正常肝细胞L-02 损伤作为研究对象,发现ZJF 能够通过降低损伤肝细胞中ROS 的生成来抑制细胞内氧化应激反应的发生,并能够增强抗氧化反应过程中关键转录因子Nrf2 在细胞核中的表达,抑制调节炎症反应的NF-kBp65 在细胞核中的表达,调控环氧合酶-2(COX-2)的活性,还能抑制促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA 的表达,表明黄酮提取物(ZJF)能从抗氧化和抗炎水平上保护肝细胞,进而起到护肝活性作用[34]。

2.5 增强免疫力

枣果实中的多糖、多酚和三萜类化合物都具有免疫调节活性。邹曼等[35]从阿克苏‘灰枣’中提取多糖、多酚和三萜类化合物3种活性成分,通过小鼠灌胃实验,研究其生物活性成分及其两两组合对小鼠的免疫作用,表明‘灰枣’多糖、多酚和三萜类化合物均可显著提高小鼠体内免疫实验的免疫指标,具有增强小鼠细胞免疫、体液免疫以及非特异性免疫的作用。3个单组分中,‘灰枣’多糖增强免疫活性作用最强,3个组合成分中,‘灰枣’多糖与多酚组合增强免疫活性作用最强,能产生协同免疫作用,多糖和三萜类化合物具有拮抗免疫作用,多酚和三萜类化合物具有加和免疫作用。说明枣果能够在一定程度上提高免疫力。另外,有研究从枣果中分离出红枣多糖结合物(JPC),并建立了大鼠慢性疲劳综合征(CFS)模型,发现喂食JPC 能够明显改善CFS 大鼠的行为,能够降低丙二醛(MDA)水平,提高超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性,还能增强T 淋巴细胞的增殖和自然杀伤细胞(NK)的活性,显著提高CD4+T 细胞的百分比,CD8+T 细胞的百分比略有下降,提高了CD4+/CD8+的比率,还增加了白细胞介素2(IL-2)基因的表达,提高了IL-2 蛋白的产生水平,因此证明红枣多糖结合物JPC 可改善CFS 大鼠的免疫系统和抗氧化活性[36]。还有研究发现,‘金昌枣’多糖JCS-1 可以协同诱导能使小鼠T淋巴细胞和B 淋巴细胞增殖的Con A 共同促进B细胞的增殖,但不能协同促进T 细胞的增殖,多糖JCS-2 在浓度高达100 μg/mL 时,能协同刺激Con A 诱导的T、B 淋巴细胞的增殖。巨噬细胞NO 的释放水平与巨噬细胞的免疫反应关系密切,低浓度的JCS-1 和JCS-2 便可以促进NO 的释放,在浓度达到100 μg/mL 时,NO 的产量增加了10倍,表明这2种多糖成分能够通过激发吞噬细胞的活性,来发挥免疫调节的作用[11]。

2.6 降血糖

糖尿病是一直以来难以彻底根治解决的世界性难题,其引起的并发症非常多。神经元细胞在高血糖持续发作后会受到损害,表现出葡萄糖神经毒性,因为它与肌肉细胞有所不同,在胰岛素的影响下,它们不能适应间歇性葡萄糖摄取,所以神经元的葡萄糖摄取依赖于细胞外葡萄糖的浓度,当细胞外葡萄糖的浓度过高时会表现出对神经元细胞的毒性[37]。Kaeidi 等[38]研究了枣水提物(ZJF)对葡萄糖诱导的神经毒性的影响,通过糖尿病神经病变的体外模型,研究了ZJF 对PC12 细胞(大鼠肾上腺嗜铬肿瘤细胞)的潜在抗凋亡作用,研究发现ZJF 在300 μg/mL 剂量24 h 后显示出抑制由高血糖导致的PC12 细胞的caspase-3 激活,抑制了高葡萄糖下诱导的凋亡生物标志物半胱天冬酶caspase-3 的上调,显著降低了高葡萄糖诱导的活性氧的产生,但在24 h 前并未显示出此活性,且ZJF 在其他浓度下不能防止细胞损伤,此结果表明,葡萄糖对PC12 细胞的毒性是通过ROS 的产生和凋亡来介导的,ZJF 可以保护PC12细胞免受高葡萄糖诱导的毒性,因而证明了枣果具有降血糖的生物活性。

高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)是具有抗动脉粥样硬化的脂蛋白,能够降低心血管病的发生,而 TC 总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)升高,均属于血脂异常,会导致动脉硬化。有研究从‘陕北滩枣’中提取出1种酸性杂多糖ZSP,由D-xylose(D-木糖)、Larabinose(L-阿拉伯糖)、D-glucose(D-葡萄糖)、Dribose、L-rhamnose(L-鼠李糖)、Dgalactose(D-半乳糖)、D-mannose(D-甘露糖)、D-glucuronic acid(D-葡萄糖醛酸)和Dgalacturonic acid(D-半乳糖醛酸)组成,主要成分是L-阿拉伯糖、D-半乳糖和D-半乳糖醛酸,结果表明,ZSP 可以降低TC、TG、LDL-C 和VLDLC 水平和提高HDL-C 水平,进而改善果糖处理小鼠的胰岛素抵抗和血脂异常的作用[39]。

3 结语

近年来,枣果受到广泛的关注,它不仅成为人们生活中的养生必备品,还受到学术界的青睐。虽然现今对很多种枣果进行了活性成分分析研究,以及探明了许多机理,但仍有很多活性物质及其作用机制未被发现,另外枣果加工尚处于初级阶段,需要大力发展枣果的精深加工,研究出更多安全卫生且功效显著的枣类保健品,因此需要继续探索研究,以期将这种开发潜力极高的果品更加充分地运用到实际生产生活以及医疗卫生等方面,带动经济和生物研究领域的发展,为人类服务。

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