芪丹益肺口服液对变应性鼻炎大鼠肝肾功能指标的影响研究

李东棋，刘慧霞，田 理

(1.成都中医药大学，四川 成都 610000；2.成都中医药大学附属医院，四川 成都 610000)

变应性鼻炎(Allergic rhinitis，AR)，是由IgE介导的一种鼻黏膜慢性反应性炎症。AR是一个全球性健康问题，影响世界约40%的人口，流行病学研究表明，AR的患病率不仅在发达国家逐渐增加，而且在包括中国在内的发展中国家也呈上升趋势[1]。调查发现，目前儿童为AR的高发群体，并以每年0.37%的速度增长[2]，因此更好地治疗变应性鼻炎患者成为耳鼻喉科研究的热点。变应性鼻炎在中医学中称为“鼻鼽”，治疗多以补益肺气、活血通窍为主，而芪丹益肺口服液以玉屏风散为主方补益肺气，又加入丹皮、川芎等活血化瘀、通利鼻窍，具有颇好的临床疗效。为此，本实验建立了变应性鼻炎大鼠模型，观察芪丹益肺口服液的治疗作用并判断其对肝肾功能的影响，现将结果报道如下。

1 材料

1.1 实验动物

SPF级SD大鼠，体质量(230±10)g，雌雄各16只，由成都达硕实验动物有限公司提供，生产许可证号：SCXK(川)2020-030。饲养房间采用12/12 h明暗交替照明，由中央控制室监控并记录，保持温度20～26 ℃，相对湿度40%～70%，实验动物使用许可证号：SYXK(川)2015-127。

1.2 药物

芪丹益肺口服液(蜜制黄芪、生白术、防风、牡丹皮、酒川芎、竹叶柴胡、酒黄芩、生荆芥、白芷、诃子、生甘草)(浓度约0.423 g/mL)，成都中医药大学附属医院药剂科提供；氯雷他定片，批号：H20040797，海南海神同洲制药有限公司生产；卵清蛋白(OVA)，批号：A5503-5G，Sigma-Aldrich公司生产；氢氧化铝，大连美仑生物技术有限公司生产；HyclonePBS缓冲液，杭州仟诺生物科技有限公司。

1.3 试剂

①0.3% OVA+AL(OH)3溶液的配置：称取卵清蛋白0.3 mg+氢氧化铝粉末30 mg+生理盐水1 mL，混匀，备用；②0.5% OVA+HyclonePBS缓冲液的配置：称取 0.5 g OVA +10 mL HyclonePBS缓冲液，混匀，备用；③检测试剂：谷草转氨酶、谷丙转氨酶、白蛋白、总胆红素、碱性磷酸酶、葡萄糖、尿酸、尿素及肌酐检测试剂盒，购买于罗氏公司。

1.4 仪器

电子天平，型号：ML6001/02，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；高速冷冻离心机，型号：ST16R，赛默飞世尔科技(中国)有限公司；全自动生化分析仪，型号：cabos c501，Roche公司。

2 方法

2.1 变应性鼻炎大鼠模型的建立

将雌雄各16只大鼠按照体质量随机分为空白组、AR模型组、中药组、西药组，每组各8只。模型的建立分为基础致敏和局部激发2个步骤。基础致敏将制好的0.3% OVA+AL(OH)3溶液，注入大鼠腹腔，隔天1次，共7次；局部激发将0.5%OVA+HyclonePBS缓冲液滴鼻，每个鼻孔50 μL，连续7 d滴鼻。在末次致敏30 min内观察鼻痒、喷嚏、流涕指标并叠加定量评分进行评价，总分>5分则造模成功(见表1)。

表1 大鼠鼻炎症状评分

2.2 给药

建立模型的第22天开始给药，按照每100 g大鼠1 mL给药量给药。空白组及AR模型组给予蒸馏水，中药组给予芪丹益肺口服液，西药组给予氯雷他定片。

2.3 样品的采集与检测

于末次给药后24 h取全血约3 mL，3 000 r/min，15 ℃离心约15 min，取血清放置于洁净干燥的0.6 mL EP管中，置于-20 ℃冰箱中保存。样品中谷草转氨酶、碱性磷酸酶、白蛋白、尿酸、尿素的含量采用比色法进行检测；谷丙转氨酶的含量采用IFCC法进行检测；总胆红素的含量采用重氮法进行检测；葡萄糖的含量采用己糖激酶法进行检测；肌酐的含量采用酶法进行检测。检测方法均严格按照各试剂盒说明书进行检测。

2.4 统计方法

3 结果

3.1 造模结果判断及各组大鼠变应性鼻炎症状总分比较

将各组大鼠治疗前后的评分及各组间的症状总分进行比较。由表2可知，组间比较，治疗前模型组、中药组、西药组与空白组对比结果均具统计学意义(P<0.05)；治疗后，AR模型组与空白组对比，差异有统计学意义(P<0.05)；中药组及西药组与AR模型组对比，差异具有统计学意义(P<0.05)。组内比较，与本组治疗前比较，中药组及西药组症状评分均有明显下降，具有统计学意义(P<0.05)。

表2 大鼠变应性鼻炎症状总分比较

3.2 各组大鼠治疗后肝肾功指标的对比

通过观察对比表3中各组间指标值的变化，比较组间及同组间雌雄两性的差异，发现组间比较时，4组间无统计学意义(P>0.05)；尿素(UREA)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)及肌酐(CREA)指标的会受到雌雄性别的影响(P<0.01)。

表3 大鼠血清中肝肾功各项指标的水平对比

4 讨论

AR是发生在鼻黏膜的I型变态反应，是以 IgE为主导，多种细胞因子和免疫细胞参与的非特异性炎症反应。目前，治疗AR主要以抗组胺药、糖皮质激素、抗白三烯药、色酮类药、鼻内减充血剂、鼻内抗胆碱能药物及中药为主[3]，但由于变应性鼻炎反复难愈的特点，长期使用抗组胺药、糖皮质激素类等药物，可能会使年龄偏小的儿童产生头晕、乏力、口干、恶心、嗜睡等不良反应[4]。而且AR对于儿童的影响不仅局限于鼻部的炎性症状，也存在眼部炎症及中耳炎发作的可能[5]，因此AR的治疗方案和药物选择须兼顾整体并慎重用药。

中医药治疗AR优势显著。中医治疗“鼻鼽”多从补益肺脾两脏入手，加以活血药物通利鼻窍。芪丹益肺口服液主要由蜜制黄芪、生白术、防风、牡丹皮、酒川芎、白芷等组成，适用于肺脾气虚，瘀阻鼻窍证。方中蜜黄芪为君，大补肺脾之气，与白术、防风合用则为玉屏风散，具有益气固表，驱邪外出的功效；牡丹皮、酒川芎、白芷活血化瘀通窍，兼以行气。诸药合用有补气而不闭邪，活血而不伤正气之特点。

本实验结果表明，芪丹益肺口服液与氯雷他定一样皆可有效缓解变应性鼻炎的症状，通过组间比较发现，治疗后中药组与西药组的鼻炎症状评分，差异无统计学意义。在探讨芪丹益肺口服液对肝肾功影响时，组间比较结果显示，大鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU)、尿酸(UA)、尿素(UREA)、及肌酐(CREA)的水平，差异无统计学意义。但组内雌雄两性比较发现，尿素(UREA)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)及肌酐(CREA)指标会受到雌雄性别的影响。这说明芪丹益肺口服液安全有效，可用于长期用药及肝肾功能不良的患者。

综上，芪丹益肺口服液适用于肺脾气虚、瘀阻鼻窍证，对于AR的治疗效果不低于氯雷他定，且对肝肾无损伤，值得临床推广。目前，AR患儿逐渐增加，但适合长期使用的药物不多，中医药在AR的预防与治疗中则优势明显。幼儿脏腑娇嫩，易受外邪侵袭，出现肺脾两虚证，芪丹益肺口服液补肺健脾，驱邪外出，不仅减轻了鼻炎的局部症状，且可调整患者的整体机能，疗效确切。